梅毒檢測的ELISA法、TPPA法、TRUST法比較

高 凱

（河南省焦作市馬村區(qū)人民醫(yī)院，河南 焦作 454171）

梅毒檢測的ELISA法、TPPA法、TRUST法比較

高 凱

（河南省焦作市馬村區(qū)人民醫(yī)院，河南 焦作 454171）

目的 比較梅毒檢測的ELISA法、TPPA法、TRUST法。方法 選取2013年1月至7月于我院進(jìn)行梅毒血清學(xué)試驗(yàn)的200例患者為研究對(duì)象，選取同期的200例健康體檢者作為對(duì)照組，采集空腹靜脈血，離心分離血清，所有標(biāo)本分別用ELISA法、TPPA法、TRUST法檢測。結(jié)果 200例梅毒患者血清標(biāo)本采用ELISA法陽性率最高（95.5%）；TPPA法檢測結(jié)果為陽性187例（93.5%），與ELISA法進(jìn)行比較，兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.562，P=0.675）。TRUST法陽性率最低（82%），與ELISA法比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=52.15，P=0.015），ELISA法與TPPA法的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值均高于TRUST法（P＜0.05）。結(jié)論 ELISA法、TPPA法、TRUST法各有優(yōu)缺點(diǎn)，若能多種檢測方法聯(lián)用，可避免漏診和誤診，提高陽性率，又有利于梅毒的診斷、治療及預(yù)后的判斷。

梅毒；ELISA法；TPPA法；TRUST法

梅毒是一種性傳播疾病，因感染梅毒螺旋體引起的，其傳播方式有3種，分別為性接觸、血液傳播及胎盤垂直傳播。其癥狀也比較復(fù)雜，多樣化，危害較大。近年來，梅毒的患病率逐漸增多，尤其是發(fā)展中國家[1]。因此，準(zhǔn)確性和靈敏性高的實(shí)驗(yàn)檢測方法，是臨床及時(shí)、準(zhǔn)確診斷和治療的關(guān)鍵。目前，梅毒血清學(xué)檢測是梅毒診斷的常用方法，主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)（TPPA）、甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）等[2]。其中ELISA法和TPPA法是特異性試驗(yàn)，而TRUST法是非特異性試驗(yàn)。因此，本文中筆者就梅毒檢測的ELISA法、TPPA法、TRUST法進(jìn)行比較，現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2013年1～7月于我院進(jìn)行梅毒血清學(xué)試驗(yàn)的200例梅毒患者為研究對(duì)象，其中男性103例，女性97例，年齡2～76歲，平均年齡為（43.7±2.4）歲。選取同期的200例健康體檢者作為對(duì)照組，其中男性105例，女性95例，年齡3～78歲，平均年齡為（41.6±3.6）歲。

1.2 試劑

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑購于英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司；明膠凝集試驗(yàn)（TPPA）試劑購于日本富士株式會(huì)社；甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（TRUST）試劑購于北京萬泰生物藥業(yè)有限公司。所有試劑均合格，且使用于有效期內(nèi)。

1.3 儀器

安圖實(shí)驗(yàn)儀器（鄭州）有限公司生產(chǎn)的PHOMO型全自動(dòng)酶標(biāo)儀和iWO型洗板機(jī)，上海醫(yī)用分析儀器廠生產(chǎn)的微量攪拌器，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司生產(chǎn)的電熱恒溫水浴鍋，江蘇捷達(dá)離心機(jī)制造有限公司生產(chǎn)的低速自動(dòng)平衡離心機(jī)等。

1.4 方法

采集空腹靜脈血4mL，離心分離血清，所有標(biāo)本分別用ELISA法、TPPA法、TRUST法檢測，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS進(jìn)行相關(guān)處理，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 3種方法檢測結(jié)果比較

200例梅毒患者血清標(biāo)本采用ELISA法檢測結(jié)果為陽性191例（95.5%），其陽性率最高；TPPA法檢測結(jié)果為陽性187例（93.5%），這兩種方法進(jìn)行比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.562， P=0.675）。TRUST法檢測結(jié)果為陽性164例（82%），其陽性率最低，分別與ELISA法、TPPA法比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=52.15，P=0.015），見表1。

表1 3種方法檢測結(jié)果比較

2.2 3種方法的評(píng)價(jià)

ELISA法與TPPA法的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值均高于TRUST法（P＜0.05），ELISA法和TPPA法檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。

表2 3種方法的評(píng)價(jià)（%）

3 討 論

機(jī)體感染梅毒螺旋體后，一般會(huì)產(chǎn)生兩種抗體，首先是特異性抗體，主要是IgM、IgG。這兩種抗體的特點(diǎn)各不相同，IgM持續(xù)的時(shí)間較短，而IgG則終生存在，如果抗體的濃度較低，再感染的概率仍比較大。其次是非特異性抗體，當(dāng)受梅毒感染后，機(jī)體免疫應(yīng)答迅速調(diào)動(dòng)起來，在3～4周左右，機(jī)體產(chǎn)生的類脂樣物質(zhì)及梅毒螺旋體分泌的類脂和脂蛋白等抗原物質(zhì)刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體[3]。

實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒的方法主要是血清學(xué)檢查，此方法對(duì)潛伏期的梅毒尤其有效。梅毒血清學(xué)檢測一般分為非特異性類脂質(zhì)抗原試驗(yàn)和特異性螺旋體抗原試驗(yàn)兩大類，非特異性類脂質(zhì)抗原試驗(yàn)主要有TRUST、USR、VDRL、RPR等，而特異性螺旋體抗原試驗(yàn)有TPELISA、TPPA、TPHA、TP-EL、FTA-ABS等[4，5]。

TRUST法在非特異性類脂質(zhì)抗原試驗(yàn)中較為常用，其抗原來源于牛心的心磷脂、雞蛋黃的卵磷脂及膽固醇，該法操作簡便、經(jīng)濟(jì)，常用于皮膚、性病等梅毒患者的篩查和療效觀察，其效價(jià)滴度一般是其療效觀察的指標(biāo)之一，也用于梅毒復(fù)發(fā)或再感染的判斷。但有研究表明[6]，TRUST法存在假陰性結(jié)果，且比例很高，其敏感性和特異性差，容易出現(xiàn)漏診，另外，也會(huì)因受其它疾病如病毒性感染、腫瘤、妊娠、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等的影響，而出現(xiàn)誤診。

成功研制梅毒螺旋體基因工程抗原對(duì)ELISA法的建立有促進(jìn)作用，從特異性和敏感性來看，該法均比TRUST法高，此外，操作方便，價(jià)格低廉，酶標(biāo)儀檢測結(jié)果較客觀，適用于批量篩查[7]。由于ELISA法對(duì)梅毒IgM、IgG均能檢測，而梅毒IgG抗體在治愈后長時(shí)間存在，因此，ELISA法結(jié)果為陽性，只能提示著正感染或者曾經(jīng)感染過梅毒，無法判斷梅毒活動(dòng)的狀態(tài)，故不能用于療效、再感染的判斷。

TPPA法是目前公認(rèn)的梅毒確認(rèn)試驗(yàn)，是采用明膠顆粒包裹抗原，與血清中梅毒特異性抗體結(jié)合生成沉淀的方法，特異性和敏感性均較高，但是操作繁瑣，價(jià)格昂貴，不適于批量排查。TPPA法可用于潛伏期的梅毒和妊娠期梅毒的檢測。

綜上所述，ELISA法、TPPA法、TRUST法各有優(yōu)缺點(diǎn)，若能多種檢測方法聯(lián)用，可避免漏診和誤診，提高陽性率，又有利于梅毒的診斷、治療及預(yù)后的判斷。

[1] 唐滿玲,顧敏,將最明,等.幾種梅毒血清學(xué)檢測方法的評(píng)價(jià)及臨床應(yīng)用[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(9):1105-1107.

[2] 李鳳中,黃永建,陳波.三種血清方法檢測梅毒的比較分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(4):442-443.

[3] Busse C,Navid MH,Strubel A,et al.Evaluation of a new recombinant antigen-based Virotech Treponema pallidum screen ELISA for diagnosis of syphilis[J].Clin Lab,2013,59(5-6):523-529.

[4] 李珍瑤,龍華泉,陳銀仲.3種臨床常用梅毒檢測方法的比較[J].醫(yī)學(xué)檢驗(yàn),2011,19(1):140-141.

[5] 周建芳.3種梅毒血清學(xué)診斷試驗(yàn)的臨床應(yīng)用評(píng)價(jià)[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2010,19(16):2036.

[6] 陳遠(yuǎn)貴.梅毒不同血清學(xué)檢測方法的比較[J].臨床輸血與檢驗(yàn), 2009,11(2):174-175.

[7] Wellinghausen N,Dietenberger H.Evaluation of two automated chemiluminescence immunoassays,the LIAISON Treponema Screen and the ARCHITECT Syphilis TP,and the Treponema pallidum particle agglutination test for laboratory diagnosis of syphilis[J].Clin Chem Lab Med,2011,49(8):1375-1377.

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1671-8194（2013）34-0108-02