TLT與TCL兩種液基細胞學技術應用對比分析

王 婭

(重慶市大足區人民醫院病理科， 重慶 大足 402360)

近年來，宮頸癌的臨床發病率呈逐年上升的趨勢[1]。對宮頸癌或癌前病變進行早期診斷是目前預防和治療宮頸癌的最重要手段[2]。液基細胞學檢查技術已逐漸發展為一種宮頸疾病的普查手段[3]。液基細胞檢測能顯著降低傳統巴氏涂片法對宮頸病變檢測的假陰性率，進而提高診斷的準確性。隨著液基細胞學檢查技術的不斷發展，其制片方法也得到不斷改進。目前，臨床主要采用的制片方法有離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種[4]。本文收集了我院2011年1月至2012年6月行宮頸液基細胞學檢查的450例受檢者標本，分別進行離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片方法，比較兩種方法制片質量及檢測結果的差異。現將結果總結如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料:收集我院2011年1月至2012年6月行宮頸液基細胞學檢查的450例受檢者，年齡18-61歲，平均年齡為42.3歲。受檢者主要臨床表現有白帶異常、不規則陰道流血、絕經后出血、性交后出血、外陰贅生物、宮頸糜爛等癥狀。

1.2 制片方法

1.2.1 取樣方法:受檢者取膀胱截石位，使用陰道窺器將子宮頸充分暴露，采用特制的小刷子尖端靠近宮頸口，將毛刷以適當的力度抵住后，沿順時針或逆時針方向旋轉4-5周。完成后，將刷頭置于存有保存液的小瓶內，蓋緊瓶蓋后寫上受檢者姓名送檢。

1.2.2 離心甩片(TLT)液基細胞制作法:首先進行液基細胞固定，將宮頸刷頭取材后置于保存液中，使紅細胞與部分白細胞溶解。繼而進行離心操作，將小瓶輕輕振搖，混勻細胞保存液。取14mL保存液于離心管內，以1500轉/min的離心速度，離心3min后，棄去上層澄清的液體，留下管底細胞團及2.5mL保存液。再對標本進行涂片，取2mL保存液于細胞團混勻后，加入制片機內的拋液器中，離心速度為1000轉/min，離心3min。最后對涂片進行固定，將玻片與吸水紙從拋液器中取出后，輕輕將吸水紙剝去，切勿損傷涂片表面，將玻片完整放于95%乙醇中固定10min。

1.2.3 膜式(TCL)液基細胞制作法:首先將宮頸刷頭取材后置于保存液中，使紅細胞與部分白細胞溶解。再將保存液瓶移入液基薄層細胞制片機，經過分散細胞、隔離無診斷意義的物質后，將宮頸細胞收集于微孔膜表面，最后轉移到載玻片上。

1.2.4 染色方法:對兩種制片方法獲得的標本均進行巴氏染色，具體方法為，將所有標本放于95%乙醇中固定10min后，進行H-E染色，封片后在光學顯微鏡下進行鏡檢。

1.3 效果評價方法:根據Bethesda系統標本評估標準對兩種制片方法所得標本質量進行評估與比較。滿意標本:鱗狀上皮細胞數量為5000-12000個，結構清晰，覆蓋面大于10%;頸管柱狀上皮細胞團數量較多，存在化生細胞。不滿意標本:鱗狀上皮細胞較少，結構不結構清晰，其覆蓋面小于10%;炎癥細胞與血細胞過多，細胞的重疊現象炎癥，細胞層過厚，固定效果不佳，污染情況較嚴重，使大于75%的上皮細胞觀察受到影響。

根據TBS-2001診斷標準對兩種標本分別進行閱片，陽性標本包括不典型鱗狀上皮、低度鱗狀上皮內瘤變、不典型鱗狀上皮、高度鱗狀上皮內瘤變、鱗狀上皮癌、可疑腺癌以及腺癌。比較兩種制片診斷結果的差異。

1.4 統計學方法:運用SPSS13.0統計學軟件進行數據處理，計量資料采用t檢驗，計數資料采用卡方檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 比較離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片方法細胞片背景與滿意度，結果顯示，離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片方法獲得的標本制片效果均較理想，細胞片背景清晰，制片滿意度較高，兩者制片質量無統計學差異(P＞0.05)，見表1。

表1 離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片方法細胞片背景與制片滿意度比較 n(%)

2.2 比較離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片法檢出率情況，離心甩片(TLT)法檢出陽性標本47例，陽性率為10.44%;膜式液基(TCL)法檢出陽性標本46例，陽性率為10.22%。兩種制片方法對陽性標本檢出率無統計學差異(P＞0.05)。

2.3 比較離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片法制片過程，離心甩片(TLT)法操作簡便，一次操作可對12張細胞片進行處理，對血性標本無需進行特殊處理;而膜式液基(TCL)法操作相對復雜，一次只操作僅能處理1張細胞片，對血性標本必須進行預處理。

3 討論

本文通過對離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片方法的制片質量及陽性標本檢出率進行比較發現，離心甩片(TLT)和膜式液基(TCL)兩種制片方法獲得的標本制片效果均較理想，細胞片背景清晰，制片滿意度較高，兩者制片質量無統計學差異(P＞0.05)。兩種制片方法對陽性標本檢出率無統計學差異(P＞0.05)。離心甩片(TLT)法操作簡便，一次操作可對12張細胞片進行處理，對血性標本無需進行特殊處理;而膜式液基(TCL)法操作相對復雜，一次只操作僅能處理1張細胞片，對血性標本必須進行預處理。

由于膜式液基細胞(TCL)制片方法中無分離步驟，僅僅依靠過濾膜對取樣細胞進行過濾，易導致最終細胞片中細胞數量不足，另外，部分粘液可黏附在薄膜上，在制片時容易轉移到玻片上。此外，制片系統在進行高速旋轉時可能造成部分細胞核膜破裂，對診斷造成困難，因此，使制片的質量不易控制(本文收集的樣本制片效果較好)[5]。膜式制片法需要使用專門儀器與耗材，費用相對昂貴。

離心甩片(TLT)法利用細胞黏附原理，采用梯度離心去除黏液和無診斷意義的物質，再使用特殊的細胞基液將脫落細胞混勻，然后進行人工涂片。涂片質量較好，細胞豐富，背景清晰。離心甩片(TLT)法不需要使用特殊的儀器和耗材，操作簡便、一次操作可進行多張細胞片同時制作。

本文比較結果表明，離心甩片(TLT)法與膜式液基細胞(TCL)制片方法相比，陽性樣本的檢出率均較高，制片質量較好，滿意度相仿。但離心甩片(TLT)法的操作過程更簡便，對血性樣本無需進行特殊處理，檢測成本低廉，因此，離心甩片(TLT)法用于宮頸癌液基細胞學檢查與膜式液基細胞(TCL)制片方法相比效果更理想。

[1]高淑平.宮頸癌診斷與治療的新進展[J].醫學理論與實踐，2012，25(12):1446-1448.

[2]郭超楠，任力.子宮頸癌早期診斷的研究進展[J].空軍醫學雜志，2011，27(4):222-225.

[3]陳曉露，何磊樂.宮頸液基細胞學檢查在宮頸癌篩查中的應用[J].按摩與康復醫學，2012，3(17):96-97.

[4]國宏莉，唐幕湘，田林，等.宮頸液基細胞學檢查國內外方法的對比研究[J].西部醫學，2009，21(9):1524-1526.

[5]黃敏，鐘桂玲，許成芳.宮頸巴氏涂片與液基細胞薄層技術 (TCT)的比較分析[J].國際醫藥衛生導報，2008，14(6):68-70.