三七不同藥用部位聚炔類成分的GC-MS分析研究

周建良， 陸靜嫻， 譚春梅， 鄭 成， 陳碧蓮

(浙江省食品藥品檢驗研究院，浙江杭州310004)

三七為五加科植物三七Panax notoginseng(Burk．)F．H．Chen的干燥根，主產于云南、廣西及四川等地，是我國特有的名貴中藥材，具有散瘀止血、消腫止痛之功效。三七含有多種化學成分，主要有效成分之一是皂苷類成分。此外，三七還含有其他藥用成分，如三七素、黃酮、揮發油、氨基酸、植物甾醇等［1-2］。近年來，有文獻報道三七的脂溶性成分對結腸癌細胞株及部分革蘭氏陽性菌有強烈的抑制活性，經分離純化并鑒定了兩個聚乙炔醇類化合物，人參炔醇 (panaxynol)和人參環氧炔醇 (panaxydol)［1］。人參炔醇可抑制血管緊張素II誘導的血管收縮，降低自發性高血壓大鼠平均脈動壓，同時還具有抗炎及抗血小板凝聚活性;另人參炔醇具有抗癌、抑菌、鎮靜、鎮痛、降壓、抗炎和神經細胞保護等多種作用［3-5］。

目前，三七水溶性皂苷類和氨基酸成分的分析研究較多［6-11］，但少有對聚炔類成分分析的研究報道［12］，鑒于該類成分的特殊活性，本研究采用氣質聯用 (GC-MS)方法對12批三七藥材及不同藥用部位中的聚炔類成分進行分析和測定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 7000 GC/MS Triple Quad氣質聯用儀 (氣相系統為7890A GC System)。

1.2 試藥 環己烷為分析純;對照品正十八烷(octadecane)購自中國食品藥品檢定研究院;三七藥材及不同藥用部位購自亳州、文山藥材市場，經浙江省食品藥品檢驗研究院郭增喜主任中藥師鑒定均屬于五加科植物三七Panax notoginseng(Burk．)F．H．Chen，樣品來源見表1。

2 方法與結果

2.1 樣品制備 取三七藥材 (或不同藥用部位)粉末約1 g，精密稱定，精密加入環己烷25 mL，正十八烷內標溶液 (40.25μg/mL，溶劑環己烷)1.0 mL，85℃加熱回流30 min，濾過，取續濾液進行GC-MS分析。

2.2 GC-MS分析條件 HP-5MS毛細管柱(30 m×0.25mm×0.25μm);初始柱溫60℃，保持3 min，再以10℃/min的速率升至250℃，保持8 min;載氣為氦氣;體積流量1.2 mL/min;進樣口溫度250℃;分流模式為不分流。MS條件:離子源為EI;電離電壓70 eV;質譜質量掃描范圍為50～600 amu;溶劑延遲5 min。

表1 三七藥材及藥用部位樣品來源Tab.1 Sam p les collection of Panax notoginseng

2.3 三七聚炔類成分結構解析 在上述GC-MS色譜分離條件下，對三七藥材不同藥用部位 (主根、花、剪口、筋條、莖葉、須根)進行分析。將GCMS所得的質譜信息經NIST08數據庫檢索對照分析，鑒定了3個聚炔類成分，保留時間15.1 min的色譜峰為 methyl 5，7-hexadecadiynoate，19.7 min為人參炔醇，21.1 min為人參環氧炔醇，保留時間17.3 min的色譜峰為內標峰正十八烷，見表2。代表性色譜圖見圖1。

表2 三七藥材中鑒定的聚炔類成分Tab.2 Polyacetylenes identified from different parts of Panax notoginseng

2.4 三七聚炔類成分相對定量分析 由于缺乏聚炔類成分的對照品，采用定量加入內標溶液，比較樣品峰面積與內標峰面積比值的大小表征樣品中methyl 5，7-hexadecadiynoate、人參炔醇和人參環氧炔醇量的相對高低。定量分析時，采用豐度高且具有特征性的碎片離子作為定量離子，其中人參炔醇和人參環氧炔醇為m/z91.1，methyl 5，7-hexadecadiynoate為m/z205.2，內標峰正十八烷為m/z 71.1，內標出峰位置處未出現干擾峰，見圖2。在精密度試驗中，對同一份樣品重復進樣分析6次，內標峰面積的RSD為2.1%(n=6)，表明精密度良好。

三七主根、花、剪口、筋條、莖葉和須根等三七不同藥用部位中聚炔類成分的相對含有量結果見圖3［相對含有量=樣品峰面積/內標峰面積/稱樣量 (折算至每克的含有量)］。結果表明methyl 5，7-hexadecadiynoate、人參炔醇和人參環氧炔醇在三七不同藥用部位中有較大差異。

3 討論

本實驗從三七環己烷提取物中鑒定了3個聚炔類成分，其中人參炔醇和人參環氧炔醇為主要的聚炔類成分。由于三七聚炔類成分不穩定，加上對照品缺乏，本實驗采用內標校正的相對含有量測定法對該類成分進行了定量測定，其結果在同一操作下具有可比性。

測定結果表明，3個聚炔類成分的總含有量在三七筋條、3年生主根、花、剪口中較高，在莖葉中較低;主根中，三七3年生的總含有量最高，而頭數越多，含有量越低;三七花中的人參炔醇含有量很高，但人參環氧炔醇幾乎未能檢測到。

圖1 三七藥材不同藥用部位的GC-MS總離子流代表性圖譜Fig.1 Representative GC-M S total ion chromatograms(TICs)of different parts of Panax notoginseng

圖2 不加內標的樣品GC-MS總離子流代表性圖譜 (文山剪口)Fig.2 Representative GC-MS TIC of Panax notoginseng sample w ithout internal standard(W ensan Jiankou)

圖3 三七不同藥用部位聚炔類成分的相對含有量及其總和Fig.3 Relative amount of polyacetylenes from different parts of Panax notoginseng

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