慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群變化臨床研究

江浪進(jìn)，陳 欣

（解放軍202醫(yī)院 檢驗科，遼寧 沈陽110003）

外周血T淋巴細(xì)胞亞群是細(xì)胞免疫中重要的細(xì)胞群，反應(yīng)機(jī)體細(xì)胞免疫狀態(tài)的較好指標(biāo)［1］，谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶是肝臟損傷后釋放到血清中的一種重要蛋白，直接肝細(xì)胞損傷程度。乙型肝炎是一種免疫相關(guān)疾病，機(jī)體感染乙型肝炎病毒（HBV）后并不直接對肝細(xì)胞造成損傷，而是通過誘發(fā)機(jī)體的免疫反應(yīng)間接損傷肝細(xì)胞［2，3］。細(xì)胞免疫的異常在乙型肝炎慢性化發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著重大的作用，T淋巴細(xì)胞對清除細(xì)胞內(nèi)HBV起主導(dǎo)作用［4］。近年研究表明細(xì)胞免疫與慢性乙型肝炎的關(guān)系。本實驗通過監(jiān)測外周血T淋巴細(xì)胞亞群中CD3＋、CD4＋及CD8＋細(xì)胞在慢性乙型肝炎患者和健康人群間的變化，進(jìn)一步了解慢性乙型肝炎患者在細(xì)胞免疫方面的動態(tài)。

1 材料與方法

1．1 研究對象 試驗組：解放軍202醫(yī)院傳染科門診及住院患者，慢性乙型肝炎患者280例，診斷符合2010年《慢性乙型肝炎防治指南》慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中男性130例，女性150例，年齡介于26－52歲。對照組：解放軍202醫(yī)院體檢健康者235例，其中男性124例，女性111例，均無肝臟疾病，肝臟功能檢查均正常。

1．2 方法 試驗組及對照組測定T淋巴細(xì)胞亞群均使用抗凝管抽取清晨空腹靜脈血5ml送檢。采血后均在2小時內(nèi)進(jìn)行測定。使用儀器為美國BD公司生產(chǎn)的FACS Calibur流式細(xì)胞儀，所用檢測試劑均為原裝配套試劑，嚴(yán)格按照儀器操作。ALT檢測均使用帶分離膠的真空采血管抽取清晨空腹靜脈血3ml。ALT檢測使用的是瑞士羅氏公司生產(chǎn)的Modular D2700全自動生化分析儀，所用檢測試劑均為原裝配套試劑，嚴(yán)格按照儀器操作。

1．3 統(tǒng)計學(xué)分析 所有數(shù)據(jù)使用SPSS11．5統(tǒng)計軟件分析，T淋巴細(xì)胞亞群的百分率用ˉx±s，組間均數(shù)比較用t檢驗。

2 結(jié)果

2．1 試驗組的CD3＋、CD4＋百分率及CD4＋／CD8＋百分率比值明顯低于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．01）；試驗組CD8＋百分率較對照組升高，差異也具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．01），具體數(shù)值見表1。

表1 試驗組和對照組CD3＋、CD4＋、CD8＋百分率及CD4＋／CD8＋比值結(jié)果

2．2 慢性乙型肝炎患者ALT統(tǒng)計 ALT異常組外周血CD3＋、CD8＋細(xì)胞數(shù)百分率明顯高于慢性乙型肝炎患者中ALT正常組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．01），異常組和正常組CD4＋百分率差異無統(tǒng)計學(xué)意義，異常組CD4＋／CD8＋比值低于正常組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．05），具體數(shù)值見表2。

表2 ALT正常組與異常組CD3＋、CD4＋、CD8＋百分率及CD4＋／CD8＋比值結(jié)果

3 討論

慢性乙型肝炎是一種常見的傳染病，當(dāng)機(jī)體感染HBV后并不是直接損傷肝細(xì)胞，而是誘發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答間接的損傷肝細(xì)胞。慢性乙型肝炎患者病情反復(fù)發(fā)作一方面與病毒損害程度有關(guān)，另一方面與機(jī)體免疫功能紊亂有關(guān)。外周血T淋巴細(xì)胞亞群是公認(rèn)的反應(yīng)機(jī)體細(xì)胞免疫狀態(tài)的較好指標(biāo)。

HBV感染時對病毒抗原的免疫作用與病毒清除和乙型肝炎發(fā)病機(jī)制相關(guān)，其中包括特異性的CD8＋細(xì)胞、毒性T細(xì)胞（CTL細(xì)胞）和CD4＋輔助性T細(xì)胞（Th細(xì)胞）、非特異性的單核巨噬細(xì)胞還有自然殺傷細(xì)胞，他們可直接損傷肝細(xì)胞或由其分泌細(xì)胞因子發(fā)揮抗病毒作用。乙型肝炎的免疫病理機(jī)制主要由T細(xì)胞的免疫應(yīng)答所決定。CD4＋細(xì)胞在不同細(xì)胞因子作用下分化為Th1和Th2兩種［6］。對病毒的清除起重大作用的CD8＋細(xì)胞的抑制和激活依賴CD4＋細(xì)胞。如果Th1細(xì)胞比例占優(yōu)勢，可提高CD8＋細(xì)胞的活性，進(jìn)而清除病毒并使得肝細(xì)胞損傷加重；如果Th2細(xì)胞比例占優(yōu)勢，CD8＋細(xì)胞的活性降低，肝細(xì)胞損傷減輕。因此Th1／Th2比值是反應(yīng)機(jī)體免疫狀態(tài)的非常重要指標(biāo)。

國內(nèi)有實驗報道［5－6］，慢性肝炎患者總體上表現(xiàn)為CD4＋T細(xì)胞計數(shù)明顯低于健康人，CD8＋T細(xì)胞計數(shù)則較健康人高，CD4＋／CD8＋比值下降，與本實驗結(jié)果一致。段國榮等［7］報道，慢性乙型肝炎患者外周血 CD3＋、CD4＋百分率、CD4＋／CD8＋比值下降。李夢東等［8，9］報告：CD3＋、CD4＋百分率在各型肝炎患者中均有下降，CD3＋、CD8＋細(xì)胞數(shù)均明顯高于正常對照組，在慢性乙型肝炎患者中，肝功能損害越重，其變化程度越明顯，而隨著病情緩解，這種變化接近正常，其中CD3＋、CD4＋百分率下降，與本實驗結(jié)果不一致。

本實驗表明，由于T細(xì)胞亞群間的不平衡，導(dǎo)致免疫功能紊亂，病毒清除障礙。本研究病例數(shù)不多，仍需擴(kuò)大樣本進(jìn)一步觀察對比，比如T細(xì)胞分化和成熟以及細(xì)胞間信號轉(zhuǎn)導(dǎo)方面是否障礙，希望能對慢性乙型肝炎的免疫應(yīng)答和免疫治療提供一些參考和啟發(fā)。

［1］Mizukoshi E，Sideny J，Livingston B，et al．Cellularsponses immune response to the hepatitis B virus polymerase Immunol，2004，173（9）：5863－5871．

［2］金 萍，楊明榮，孫 琦，等．慢性乙型肝炎患者外周血單個核細(xì)胞Fas抗原及T淋巴細(xì)胞亞群檢測的意義．大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2003（3）

［3］段國榮，周永興，聶青和，等．慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群及其細(xì)胞膜IFN－r，IL－6表達(dá)的變化．第四軍醫(yī)大學(xué)報，2003（15）．

［4］鄔祥惠．慢性肝炎的發(fā)病機(jī)理和治療．現(xiàn)代實用醫(yī)學(xué)，2001，13（1）：5．

［5］馬存根，劉淑璋，王力生，等．乙肝患者T淋巴細(xì)胞亞群變化與血清HBV DNA關(guān)系的觀察．中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，1992，12（5）：301．

［6］劉麗霞，張 錚，蘇先獅，等．慢性活動乙型肝炎患者免疫功能檢測及其臨床意義．中華免疫學(xué)雜志，1995，11（3）：176．

［7］段國榮，周永興，聶青和，等．慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎患者外周血T細(xì)胞亞群及其細(xì)胞膜IFN－r、IL－6表達(dá)的變化．第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2003，24（15）．

［8］李夢東 ．實用傳染病學(xué)第2版 ．北京：人民衛(wèi)生出版社1998，104－111．

［9］李 鳴，林 蔚．慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群變化．Journal of morden Clinical Medcial Bioengineering，2002 1（8）36－37．