白細(xì)胞介素25與兒童哮喘的關(guān)系

任美英，成煥吉，王甲天，魯繼榮，郭 紅＊

（1．解放軍208醫(yī)院，吉林 長春130062；2．吉林大學(xué)第一醫(yī)院 兒內(nèi)一科，吉林 長春130021；3．吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院）

支氣管哮喘（bronchial asthma）是一種常見的慢性下呼吸道疾病，50%患者在幼年發(fā)病［1］。哮喘的發(fā)病機(jī)制極為復(fù)雜，遺傳、感染、神經(jīng)和精神、環(huán)境、運(yùn)動、藥物等因素均與其有關(guān)，免疫功能紊亂與變態(tài)反應(yīng)在哮喘發(fā)病機(jī)制中至關(guān)重要，各種細(xì)胞因子間相互促進(jìn)和制約對哮喘發(fā)病扮演了重要的角色。

IL－25是2001年發(fā)現(xiàn)的Th2細(xì)胞衍生的細(xì)胞因子，可以誘導(dǎo)Th2細(xì)胞因子及嗜酸性粒細(xì)胞的產(chǎn)生，在Th2型變態(tài)反應(yīng)性炎癥中起重要作用。本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA方法測定哮喘兒童、正常兒童及應(yīng)用激素干預(yù)后的哮喘兒童血清中IL－25的水平，對比正常兒童與哮喘兒童血清IL－25水平及激素干預(yù)前后血清IL－25水平。

1 對象和方法

1．1 研究對象

哮喘組：隨機(jī)選取2006年9月－2007年5月在我院就診的哮喘患兒64例，其中男38例，女26例；年齡11個月－14歲，平均8．53±2．72歲；其性別、年齡與哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)均符合全國兒科哮喘防治協(xié)作組制定的兒童哮喘防治常規(guī)。均為未應(yīng)用過激素治療的初治病例。

健康對照組：隨機(jī)選取同期同年齡組健康體檢兒童60例，其中男35例，女25例；年齡1歲－13歲，平均7．41±3．67歲。均無特殊病史；近期無感染史，未使用抗生素與糖皮質(zhì)激素等藥物；無個人及家族過敏性疾病史。其性別、年齡與哮喘組兒童相比差異無顯著性（P＞0．05），具有可比性。

激素干預(yù)組：哮喘組64例患兒中有56例患者接受了規(guī)范的吸入激素治療共吸12周。12周后再次檢測上述56例患兒血清中IL－25水平。

1．2 方法

1．2．1 標(biāo)本采集 分別抽取三組兒童靜脈血2 ml，室溫靜置2小時，4℃下2 500rpm離心，分離血清，置－70℃凍存留待一次性檢測用。哮喘組56例患兒給與規(guī)律激素吸入治療3個月后，病情均有緩解，再次抽血，方法同上。

1．2．2 IL－25水平檢測 采用雙抗體夾心ELISA法（人IL－25酶免定量檢測試劑盒為美國進(jìn)口分裝）。操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。采用BioRad－550型酶標(biāo)儀以492nm波長處讀取OD值。

1．3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所得數(shù)據(jù)采用SPSS16．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用方差分析、直線回歸相關(guān)分析，以P＜0．05差異有顯著性。

2 結(jié)果

2．1 正常對照組、治療組與哮喘組患兒血清IL－25水平比較

哮喘組血清IL－25水平明顯高于正常對照組及激素治療組，有顯著性差異。而正常對照組及激素治療血清IL－25水平無明顯差異，見表1。

表1 三組患兒血清IL－25水平比較（ˉx±s）

2．2 應(yīng)用激素干預(yù)后血清IL－25水平 較激素干預(yù)前明顯減低，P＜0．05，差異有顯著性，見表3。

表3 哮喘組患兒激素干預(yù)前、后血清IL－25水平比較（ˉx±s）

3 討論

支氣管哮喘是是一種兒科常見的下呼吸道可逆性阻塞性疾病，嚴(yán)重影響患兒的生存質(zhì)量。目前的研究證實(shí)［1］哮喘患兒體內(nèi)存在Th1／Th2失衡，即TH1反應(yīng)減弱，而Th2反應(yīng)增強(qiáng)，Th2優(yōu)勢是氣道炎癥持續(xù)存在的原因。

IL－25是2001年Fort等［6］首先報(bào)道由Th2細(xì)胞衍生的細(xì)胞因子，是IL－17家族中的新成員，與IL－17家族中其他成員不同，IL－25可以誘導(dǎo)IL－4、IL－5等Th2細(xì)胞因子及嗜酸性粒細(xì)胞的產(chǎn)生［2］，在Th2型變態(tài)反應(yīng)性炎癥中起重要作用。IL－25可通過調(diào)節(jié)Th2細(xì)胞功能而在Th2型變態(tài)反應(yīng)性炎癥中起作用［4］。

動物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，無論經(jīng)呼吸道給予外源性IL－25還是自身表達(dá)IL－25，均可引起肺內(nèi)Th2細(xì)胞因子如IL－4、IL－5和IL－13的增多、黏液分泌增加、氣道高反應(yīng)性等病理變化。而給予可溶性IL－25受體后可減少CD4＋T細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞在呼吸道的募集［2，3］，因此，IL－25 與 哮 喘 變 應(yīng) 性 炎 性 反 應(yīng) 的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系。

本研究顯示，哮喘急性發(fā)作期患兒血清IL－25水平較緩解期組、正常對照組明顯升高，提示IL－25水平的升高與哮喘發(fā)作有關(guān)。

對急性發(fā)作的哮喘患兒，盡快緩解喘息癥狀，縮短發(fā)作時間，是治療的關(guān)鍵。當(dāng)前認(rèn)為吸入糖皮質(zhì)激素（ICS）是防治哮喘最有效的辦法。ICS主要通過抗炎效應(yīng)，但同時也通過免疫抑制起作用，是哮喘治療的首選藥物［5、6］。

本研究采用ICS治療前后測定哮喘患兒血清IL－25水平，以利于自身對照比較。結(jié)果顯示，治療3個月后血清IL－25水平顯著下降（P＜0．01），部分控制加未控制患者治療后較治前水平下降，顯示ICS治療可使血清IL－25水平降低。

目前臨床上采用靜脈滴注糖皮質(zhì)激素的治療效果不很理想。本研究對哮喘患兒按照GINA方案，其中＜5歲患者選用儲霧罐吸入輔舒酮?dú)忪F劑；≥5歲者選用舒利迭，后者含氟替卡松與長效β2受體激動劑沙美特羅2種藥物，作為聯(lián)合治療在改善癥狀與肺功能方面均優(yōu)于單一ICS。但哮喘患兒按不同年齡段在分別應(yīng)用2種劑型藥物治療3個月后，均有較高的臨床控制率，二者之間無顯著差異［7］。

綜上，Th1／Th2免疫失衡是哮喘發(fā)生的重要機(jī)制，上調(diào)Th1反應(yīng)，抑制Th2反應(yīng)，調(diào)節(jié)Th1／Th2平衡是目前哮喘免疫治療的研究熱點(diǎn)。IL－25在哮喘等變態(tài)反應(yīng)性疾病的氣道炎癥中起著重要的作用，但它是否會促使氣道重構(gòu)、特別是通過何種細(xì)胞產(chǎn)生Th2型細(xì)胞因子、以及是否存在基因多態(tài)性等問題仍亟待解決。因此，對IL－25的生物學(xué)活性及作用機(jī)制等的進(jìn)一步研究，有助于闡明哮喘的發(fā)病機(jī)理，并且為今后兒童哮喘的治療提供新的策略。

［1］林耀廣．現(xiàn)代哮喘病學(xué)［M］．北京：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，2004：94－211．

［2］Kawaguchi M，Adachi M，Oda N，et al．IL－17cytokin family［J］．J Allergy Clin Immunol，2004，114：1265－1273．

［3］Wang YH，Angkasekwinai P，Lu N，et al．IL－25augments type 2 immune responses by enhancing the expansion andfunctions of TSLP－DC－activated Th2memory cells［J］．JEM，2007，204（8）：1837．

［4］王艷麗，黃 茂．白介素25與變態(tài)反應(yīng)性氣道炎癥［J］．Int Respir，2007，27（13）：1021－1023．

［5］中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會哮喘組．支氣管哮喘防治指南（支氣管哮喘定義、診斷、治療和管理方案）［J］．中華結(jié)核和呼吸雜志，2008，31（3）：177．

［6］MoinM，AghamohammadiA，GharaviMH，et al．Risk factors leading to hospital admission in Iranian asthmatic children［J］．IntArchAllergy Immunol，2008，145（3）：244．

［7］LiHT，ZhangTT，ZhouH．Combination therapywith the single inhaler salmeterol／fluticasone propionate versus increased doses of inhaled corticosteroids in patients with asthma［J］．Respiration，2007，74（1）：33．