兒童尿液中8-羥基脫氧鳥苷水平的影響研究

侯小霞

兒童尿液中8-羥基脫氧鳥苷水平的影響研究

侯小霞

目的探討兒童尿液中8-羥基脫氧鳥苷水平與兒童生長發育的影響。方法采用雙抗體夾心法檢測尿液中8-羥基脫氧鳥苷的水平，同時收集兒童的身高、體重、頭圍、胸圍和年齡等指標。結果尿液中8-羥基脫氧鳥苷水平，男童和女童之間差異無統計學意義；7～8歲組兒童高于3～4歲組兒童，差異具有統計學意義(P<0.05)。結論高年齡兒童處于一個較高的氧化應激水平，并可能對兒童生長發育造成影響。

尿液；8-羥基脫氧鳥苷；年齡

在眾多的DNA氧化損傷中，8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)最常見，而且是一種高致突變性氧化損傷產物[1]。在體內穩定存在，為代謝的終產物，是目前國際上公認的一種新型的評價DNA 氧化損傷和氧化應激狀態的敏感指標和生物標志物。機體在氧化應激因素的作用下，出現8-OHdG水平的增高，提示機體發生DNA損傷增加[2]。本實驗以兒童為研究對象，采集兒童尿液，收集有關體格發育指標，檢測其中8-OHdG的水平，從而探討兒童尿液中8-OHdG水平與相關因素之間的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料本研究中，男性兒童70名，女性兒童49名，均來自于同一地區幼兒園。在取得父母及幼兒園老師同意后，進行樣本采集和數據收集。

1.2尿液的采集和8-OHdG水平的檢測 取晨尿中段尿10 ml放入干凈的試管中，標記姓名和編號，-20 ℃冰箱保存。應用雙抗體夾心法測定標本中人8-OHdG水平。主要試劑：人8-OHdG水平檢測試劑盒(廈門慧嘉生物)；主要儀器：全波長酶標儀(美國熱電公司)，金屬恒溫加熱器(上海堪鑫儀器設備有限公司)。用純化的人8-OHdG抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入人8-OHdG抗原，再與HRP標記的人8-OHdG結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人8-OHdG呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品中人8-OHdG濃度。

1.3兒童體格發育指標及相關數據收集 收集兒童性別、年齡等指標，并進行身高(cm)、體重(kg)、頭圍(cm)和胸圍(cm)的檢測，收集數據。

1.4統計學方法 采用SPSS13.0軟件進行統計分析，偏正態分布用中位數表示，均數比較用非參數檢驗(K-S、M-W檢驗)，相關因素分析使用Spearman等級相關分析，以α=0.05作為檢驗標準。

2 結果

兒童尿液中8-OHdG水平經M-W檢驗表明，男、女童尿中8-OHdG值比較差異無統計學意義(P>0.05)；兒童尿中8-OHdG水平隨著年齡的增大而增高，7～8歲組兒童高于3～4歲組兒童，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表1和圖1。

兒童尿液中8-OHdG水平與兒童的身高、體重、頭圍和胸圍之間，經相關性檢驗表明，無統計學意義(P>0.05)。

表1 不同年齡組兒童尿中8-OHdG比較

注：*P<0.05，與3～4歲組兒童8-OHdG水平比較差異具有統計學意義

圖1 不同年齡組兒童尿中8-OHdG比較

3 討論

本次研究中發現，兒童尿液中8-OHdG水平的平均值為412.38 ng/gCr，男、女童8-OHdG水平比較差異無統計學意義。根據兒童年齡分組并分析，實驗數據顯示，與3～4歲組相比，7～8歲組兒童尿中8-羥基脫氧鳥苷明顯增高，差異具有統計學意義。羥自由基和超氧陰離子能直接與DNA分子反應，導致DNA鏈斷裂、堿基修飾和DNA 蛋白交聯等氧化性DNA 損傷，其中最主要的致突變性損傷反應是鳥嘌呤上C8與-OH 結合，產生 8-OHdG[3]。尿液中8-OHdG 水平反映機體氧化應激水平，因此本研究提示隨著兒童年齡的增大，機體DNA損傷增高，與低年齡兒童相比，高年齡兒童處于一個較高的氧化應激水平，并可能對兒童生長發育造成影響。

[1] Arito Yamane, Takashi Kohno, Kohei Ito, et al.Differential ability of polymorphic OGG1 proteins to suppress mutagenesis induced by 8-hydroxyguanine in human cell in vivo. Carcinogenesis, 2004, 25(9) :1689-1694.

[2] Takiguchi M, Achanzar WE, Qu W, et al. Effects of cadmium on DNA-(Cytosine-5) methyltransferase activity and DNA methylation status during cadmium-induced cellular transformation. Exp Cell Res, 2003, 286(2):355-365.

[3] Deng WJ, LP, Liuc WK, et al, Atmospheric levels and cytotoxicity of PAHs and heavy metalsin TSP and PM2.5 at an electronic waste recycling site in southeast China. Atmospheric Environment, 2006, 40(36):6945-6955.

471009 鄭州大學附屬洛陽中心醫院