miR-26a 在糖尿病小鼠創面愈合中的作用

俞楠澤 龍 笑 白 明 王曉軍

創面愈合具有非常復雜調控機制，許多內源性或外源性的因素均可影響其生物學過程，其中糖尿病是最為常見的不利因素。約15%的糖尿病患者會產生糖尿病性潰瘍創面，其中84%的患者會經歷截肢［1］。促進血管化，增加創面血供是治療糖尿病創面的關鍵之一。小分子RNA(miRs)是一類內源性的、小的、非編碼RNA，在轉錄后水平通過抑制基因表達調節細胞活動［2］。miR-26a 是新發現的具有血管生成抑制作用的miR，利用抑制劑阻斷其表達后，心肌梗死模型中血管新生增加兩倍，因此，miR-26a 被認為是缺血性疾病的治療新靶點［3］。但miR -26a 在糖尿病模型中的表達和調控血管新生的作用，尚未見報道。在本研究中，筆者檢測了糖尿病小鼠與非糖尿病小鼠創面組織中miR -26a 的表達差異，并將外源性miR-26a 抑制劑應用于糖尿病小鼠全層皮膚缺損創面，探討其對傷口愈合的影響。

材料與方法

1.實驗材料:清潔級雄性7 ～8 周齡C57/BL6 小鼠6 只，db/db 糖尿病小鼠18 只，均購于Jackson 實驗室。mmu -miR-26a-5p 抑制劑和陰性對照劑(廣州銳博生物科技有限公司)，氯胺酮(美國Phoenix 公司)，甲苯噻嗪(美國AnaSed 公司)，CD31 抗體(美國BD Biosciences 公司)，Tegaderm 透明敷料(美國3M 公司)，mirScript 試劑盒(美國Qiagen 公司)，TRIzol 試劑(美國Invitrogen 公司)，DAB 顯色試劑盒(武漢博士德公司)。

2.實驗方法:(1)小鼠全層皮膚缺損創面模型建立和處理:腹腔注射氯胺酮90mg/kg +甲苯噻嗪:9mg/kg 麻醉，電動剃刀和脫毛膏脫去背部所有毛發。在小鼠背部正中偏尾側制造1cm×1cm 皮膚全層缺損創面，注意徹底去除皮下的肉膜層，直至肌膜淺面，以阻止創面收縮。……