西洛他唑通過P38 MAPK信號途徑對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用

藍琳友 洪溪屏 蔡元暉

腦卒中目前是全球第2常見死因，在我國已成為第1位死因，其中缺血性腦卒中占全部腦卒中的大部分，而缺血再灌注損傷是大多數缺血性腦血管疾病的主要病理生理過程，其發生機制尚未完全闡明［1］。有研究表明，缺血后神經元細胞凋亡參與了缺血性腦損傷的過程［2］。因此，抑制神經元細胞凋亡可減輕腦缺血損傷。

西洛他唑是一種選擇性磷酸二酯酶3抑制劑，可通過增加細胞內環磷腺苷酸含量和激活蛋白激酶A從而發揮抗血小板凝聚和舒張血管的作用，本研究擬觀察西洛他唑對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型中神經細胞凋亡的影響及其作用機制［3］。

材料與方法

1．動物和材料:成年雌性 SD 大鼠，體重304．5 ±25．4g，由溫州醫學院動物實驗中心提供;西洛他唑(純度＞98%)購自Sigma公司;免疫組化染色試劑盒購自上海碧云天生物技術研究所;Tunel試劑盒購自瑞士羅氏公司;caspase-3、p-P38、p-ERK、p-JNK和β-actin抗體購自美國Epitomics公司;BCA蛋白濃度測定試劑盒購自美國Sigma公司。

2．動物分組和模型制備:將SD大鼠按照數字表法隨機分成5組:假手術組、模型組、西洛他唑低劑量(5mg/kg)組、西洛他唑中劑量(10mg/kg)組和西洛他唑高劑量(20mg/kg)組，每組15只。按照Longa EZ等報道的線栓法制作大鼠右側大腦中動脈閉塞模型，以動物出現右眼Horner征為模型成功的標志，阻斷血流2h后再灌注24h，成功建立缺血再灌注模型45只［5］。假手術組僅將縫線插入后拔出，不阻斷大腦中動脈。西洛他唑在術前2h和6h分別經灌胃給藥1次，模型組和假手術組分別灌胃給予等量生理鹽水。……