血清趨化因子受體CCR5和CXCR3與胎膜早破并發絨毛膜羊膜炎的關系

樊柳宜

廣東省佛山市順德區桂洲醫院產科，廣東佛山 528305

PROM是產科常見的并發癥，是指發生于臨產前的胎膜自然破裂，可引起CAM，臍帶脫垂、羊水過少，胎盤早剝，早產、新生兒感染，增加孕產婦及圍生兒的感染率和病死率。從50年代起，研究人員已開始重視和探索PROM發病原因，但至今并不十分明確，現在公認重要發病因素是感染，而在近年研究中，已關注到了PROM中炎性因子所起的作用，CK受體對炎細胞在炎癥活動中的趨化及聚集到有炎癥的地方發揮著較關鍵作用。在PROM中，CCR5和CXCR3可能會有表達量的改變。本研究以孕婦血清中游離CCR5和CXCR3為檢測指標，擬探討其與PROM-CAM的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2012年7月—2013年7月在本院產科住院分娩的PROM時間不超過24h孕婦72例（實驗組），平均年齡（28.12±4.27）歲，孕周（38.39±1.22）周，根據產后最終胎盤、胎膜病理檢查結果再分為PROM-CAM組（實驗組1）38例、PROM無并發CAM組（實驗組 2）34 例。再按破膜不同時間分為 0～6、6～12、12～24h 組。選取同期正常足月孕婦 40例（對照組），平均年齡（27.03±3.88）歲，孕周（39.21±2.06）周，兩組孕婦均為單活胎頭位、足月妊娠（37～41+6周）、無全身性或下殖道感染癥狀、無產科其它并發癥，無內外科疾病，分娩方式不限，未使用過抗生素，對照組的病檢均無CAM。統計兩組人員的年齡和孕周平均值和標準差，差異無統計學意義。

1.2 方法

所有孕婦在使用抗生素之前、分娩前以干燥管抽取外周血靜脈血3～4 mL（不加抗凝劑），3000 r/mim離心10 mim后取血清，置-20℃冰箱保存備用。采用ELISA檢測血清中的CCR5、CXCR3水平。按ELISA試劑盒要求進行操作。胎盤病理學檢查：胎盤娩出后于胎膜破口邊緣取胎盤及胎膜取約 2 cm×2 cm做組織學標本，甲醛固定，送病理科常規石蠟包埋切片，HE染色，由專人閱片。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 實驗組和對照組的CCR5、CXCR3水平比較

PROM-CAM組 (實驗組1)CCR5、CXCR3表達水平明顯高于PROM無CAM組（實驗組2）及對照組，差異均具有統計學意義（P＜0.05），PROM 無 CAM 組（實驗組 2）CCR5、CXCR3 表達水平雖高于對照組，但差異不具有統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 實驗組和對照組的CCR5、CXCR3水平比較（±s）

表1 實驗組和對照組的CCR5、CXCR3水平比較（±s）

注：實驗組1與實驗組2、對照組比較P＜0.05，實驗組2與對照組比較P＞0.05。

組別例數CCR5 CXCR3實驗組1實驗組2對照組38344042.92±10.4521.45±6.8617.20±7.1934.66±12.3816.91±8.6512.32±9.61

2.2 PROM時間與CCR5、CXCR3水平變化關系

破膜時間＞12 h血清中CCR5、CXCR3表達水平高于破膜時間不足12 h的兩組，差異具有統計學意義（P＜0.05），破膜時間不足12 h的兩組間的CCR5、CXCR3水平，差異不具有統計學意義結論（P＞0.05）見表 2。

表2 PROM 時間與 CCR5、CXCR3水平變化關系（±s）

表2 PROM 時間與 CCR5、CXCR3水平變化關系（±s）

注：＞12 h 組與 6～12、0～6 h 時組比較 P＜0.05，6～12 h 組與 0～6 h 時組比較 P＞0.05。

組別例數CCR5 CXCR3＞12 h 6～12h 0～6hh 30241841.36±14.7124.79±9.8519.06±7.7833.42±11.1915.22±5.5213.28±8.59

3 討論

完整的胎膜，使羊膜腔內保持著適量的羊水，防止了陰道的上行性感染，引起PROM病因很多。越來越多的資料證實羊膜腔感染與PROM密切相關[1]。破膜時間的長短與羊膜腔感染的嚴重程度有關，病原體通過宮頸口感染胎膜，也可經血行播散至子宮、胎盤、羊水及胎膜。微生物產生的蛋白水解酶或者感染部位的血管滲出、白細胞浸潤水腫等，胎膜張力更為低下，從而引起PROM[2]。

但是在早期的羊膜腔感染的孕婦中，絕大多數無臨床表現，因此在產前早期快速檢測出亞臨床感染的PROM孕婦，并給予及時治療，可以降低圍產期孕婦發病率和死亡率。這就需要有相應的指標來進行監測，可有利于早期診斷改善妊娠結局。

現在PROM的發病與Thl／Th2失衡可能有關的觀點越來越得到了研究人員的認可。羊膜絨毛膜炎是PROM的一個重要發病因素，羊膜絨毛膜炎胎膜組織內的主要炎細胞為中性粒細胞及單個核細胞[3]。中性粒細胞可以產生Thl化學CK受體配體干擾素，誘導T細胞到胎膜組織中，在胎膜中T細胞再次釋放干擾素等進一步誘導T細胞到胎膜組織中從而形成正反饋，促進Thl免疫炎癥。Th2細胞可以發揮抗炎作用是負反饋機制中抑制Thl細胞介導的免疫反應，控制Thl細胞引發的組織損傷。機體中對抗細菌、病毒羊膜絨毛膜炎與Thl、Th2細胞因子之間平衡偏移結果相關。在PROM時胎膜組織存在炎性破壞過度和修復不足，呈現Th1免疫炎癥。

CK是有趨化作用的細胞因子，是一類在淋巴細胞募集過程中發揮趨化和激活作用的蛋白質超家族，相對分子質量8000～12000，分為CXC、CC、C、CX3C四個亞家族。CK受體是一類介導CK行使功能、與G蛋白相偶聯并具有7次跨膜結構的受體，它的表達是CK發揮作用的一個重要決定因素[4]。CK及其受體在T細胞活化和Th1／Th2介導的免疫應答中也起了重要作用。CK對CD4+T細胞亞群有選擇作用。Th1和Th2細胞表面表達不同種類的CK受體，并對不同的CK產生反應，如Th1細胞活化后主要表達CK受體CCR5和 CXCR3，Th2細胞活化后主要表達CCR3、CCR4和CCR8。因此，CK受體可以作為Th1和Th2細胞的表面標志[5]。CCR5和CXCR3與Th1細胞亞群關系密切，其表達量改變，可能是PROM的重要影響因素。

本研究結果顯示：PROM-CAM組CCR5、CXCR3水平明顯高于PROM無CAM組及對照組，差異均具有統計學意義（P＜0.05），PROM無CAM組CCR5、CXCR3水平雖高于正常對照組，但差異不具有統計學意義 （P＞0.05）,破膜時間＞12 h血清中CCR5、CXCR3水平高于破膜時間不足12 h的兩組，差異具有統計學意義（P＜0.05），破膜時間不足 12 h 的兩組間的 CCR5、CXCR3 水平，差異不具有統計學意義（P＞0.05）。

通過本研究，提示孕婦血清中CK受體CCR5、CXCR3與PROMCAM之間密切相關，CCR5、CXCR3表達水平的檢測可作為一種指標用于PROM-CAM的早期診斷，尤其是亞臨床感染的孕婦，節約診治時間，減少圍產期產婦和圍生期新生兒的各種不良合并癥。這一結果也利于深入探討CK受體拮抗劑在PROM治療中的可行性，為探索PROM的治療新途徑提供理論依據。

[1]Briery CM,Veillon E W,Klauser C K,et al.Women with preterm premature rupture of the membranes do not benefit from weekly progesterone[J].American journal of obstetrics and gynecology,2011,204(1):54.e1-54.e5.

[2]呂發輝.胎膜早破并發絨毛膜羊膜炎的診斷進展[J].醫學綜述,2013,19(2):294-297.

[3]Kim C J,Romero R,Kusanovic J P,et al.The frequency,clinical significance,and pathological features of chronic chorioamnionitis:a lesion associated with spontaneous preterm birth[J].Modern Pathology,2010,23(7):1000-1011.

[4]Popowski T,Goffinet F,Maillard F,et al.Maternal markers for detecting early-onset neonatal infection and chorioamnionitis in cases of premature rupture of membranes at or after 34 weeks of gestation:a two-center prospective study[J].BMC pregnancy and childbirth,2011,11(1):26.

[5]Xie A L,DI X D,Chen X M,et al.Factors and neonatal outcomes associated with histologic chorioamnionitis after premature rupture of membranes in the preterms[J].Zhonghua fu chan ke za zhi,2012,47(2):105.