無錫市錫山區首次檢出1株倫敦沙門菌的報告

沈梅云+張晴+廉靖賢

[摘要] 目的 了解無錫市錫山區外環境監測樣品中沙門菌的污染狀況。 方法 采集外環境監測標本進行沙門菌分離培養，依照《食品安全國家標準食品微生物學業檢驗沙門菌檢驗》GB4789.4-2010進行目的菌的分離檢測；并對分離株進行生化反應、血清學試驗及藥敏試驗。 結果 從1份市售生螺螄中檢出1株倫敦沙門菌。 結論 沙門菌廣泛存在自然界，開展沙門菌監測，及早檢出和發現沙門菌屬新菌型，對該菌引發的疾病和公共衛生事件的防控有著重要的指導意義。

[關鍵詞] 外環境；監測；倫敦沙門菌

[中圖分類號] R378 [文獻標識碼] C [文章編號] 1673-9701（2014）02-0124-02

Report on detection of London Salmonella for the first time in Xishan district of Wuxi city

SHEN Meiyun ZHANG Qing LIAN Jingxian

Xishan District Center for Disease Control and Prevention in Jiangsu Province， Wuxi 214101， China

[Abstract] Objective To investigate the contamination status of salmorollas in samples which were detected from external environment in Xishan district of Wuxi city. Methods The specimens in external environment were collected for isolation and culture in order to detect Salmonella according to “National food safety standard Food microbiological examination： Salmonella” GB4789.4-2010. Meanwhile the biochemical event， serological test and susceptibility test were tested in isolates. Results London Salmonella were detected from a sample of commercial raw spiral shell. Conclusion There is a variety of salmonellas exist widely in nature. It has important guiding significance for the control and prevention of and public health emergency caused by salmonella that monitoring， detect and find new type of salmonella.

[Key words] External environment； Monitoring； London Salmonella

沙門菌是人類最常見的腸道致病菌之一，是重要的食源性致病菌之一。國際上，許多國家將沙門菌列為食品中病原菌監測菌之一，并建立起分子分型電子網絡監測體系對其進行跟蹤監測[1]。我中心為無錫市外環境監測檢查點，自2011年起每年的4～11月份對東北塘鎮的外環境開展監測，2012年10月從菜場的生螺螄中培養出1株倫敦沙門菌，此菌株是錫山區對外環境樣品監測過程中的首次檢出，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料來源

由本單位流病科磅檢的東北塘街道河水6份（錦陽、農壩各3份），井水共3份（農壩）。所用水樣分裝于滅菌的500 mL廣口瓶中，每瓶450 mL。魚類體表涂抹樣4份，將無菌棉簽用生理鹽水浸濕后在體表反復涂抹，再轉入10 mL緩沖蛋白胨水中。整體樣品（生螺螄、鯽魚內臟、黃鱔內臟）3份以及熟食（蝦、鴨腸等）10份均用滅菌的500 mL廣口瓶分裝，每份250 g左右。標本在采集完成后，由流病科在保證室內溫度下及時送往中心實驗室。

1.2 生化試劑培養基

緩沖蛋白胨水增菌液、四硫磺酸鈉煌綠增菌液、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液、科瑪嘉沙門菌顯色培養基（鄭州博賽生物技術股份有限公司）、HE瓊脂、三糖鐵瓊脂（廣東環凱微生物科技有限公司）、沙門菌屬診斷血清（寧波天潤生物藥業有限公司）、腸桿菌和其他非苛養革蘭陰性桿菌鑒定試驗盒（比色法）API20E（法國bioMerieux SA）、腸桿菌科診斷用噬菌體（廣州虎克生物技術有限公司）、藥敏紙片（杭州天和微生物試劑有限公司）。所用生化試劑、培養基都在有效的時間內進行使用。

1.3 檢測方法

按照《食品安全國家標準》GB4789.4-2010[2]中檢測方法，取水樣、整體樣品、熟食25 mL（g）分別接種于225 mL緩沖蛋白胨水中，涂抹樣標本于10 mL緩沖蛋白胨水中。置（36±1）℃培養8～18 h，然后移取1 mL，接種于10 mL TTB內，于（42±1）℃培養18～24 h。同時，另取1 mL，轉種于10 mL SC內，于（36±1）℃培養18～24 h。分別劃線接種于科瑪嘉沙門菌顯色平板、HE瓊脂平板。經（36±1）℃培養18～24 h，挑取可疑菌落進行革蘭染色鏡檢、生化反應和血清凝集，陽性菌株作藥敏試驗。藥敏試驗采用WHO推薦的K-B紙片擴散法進行。將可疑菌株送往上級單位做鑒定。endprint

2 結果

2.1 培養結果

在1份市售生螺螄中檢出1株倫敦沙門菌，其余25份標本均未檢出沙門菌。此菌株在科瑪嘉沙門菌顯色平板上菌落呈圓形，濕潤、紫紅色；在HE瓊脂平板上菌落呈藍綠色，圓形、濕潤，菌落中心黑色；在三糖鐵瓊脂結果為葡萄糖產酸產氣，乳糖陰性，硫化氫陽性。

2.2 革蘭染色鏡檢

可疑菌株做革蘭染色，油鏡觀察，結果為革蘭陰性、無芽胞、無莢膜的桿菌。

2.3 生化反應

挑取可疑菌落接種于API20E試條上，按說明書操作，生化反應結果見表1。根據API20E生化鑒定試條的反應結果，得出編碼為6704752。經查API20E編碼手冊，該可疑菌落為沙門菌屬某些菌（Salmonella spp）。

2.4 血清學分型

挑取營養瓊脂斜面培養基上的純培養物與生理鹽水、沙門菌診斷血清進行凝集試驗。結果如下：沙門菌A～F群O多價血清凝集，生理鹽水對照不凝集；O抗原10血清凝集；H抗原第1相：l，v血清凝集；H抗原第2相：6血清凝集。

2.5 噬菌體裂解試驗

能被腸桿菌科分屬噬菌體O-I裂解，而不被C、sh、E、CE、E4、Ent噬菌體裂解，符合沙門菌屬的特性。

上述菌株通過血清學試驗、生化反應，參照沙門菌抗原表鑒定，證實為倫敦沙門菌。菌株經無錫市疾病預防控制中心復核結果相同。

2.6 藥敏試驗方法

按WHO推薦的K-B瓊脂紙片擴散法進行。該菌株對諾氟沙星、氯霉素、氧氟沙星、頭孢曲松、環丙沙星、頭孢哌酮高度敏感；對阿米卡星、四環素、鏈霉素、慶大霉素、復方新諾明中度敏感；對紅霉素、利福平、苯唑西林、萬古霉素耐藥。

3 討論

沙門菌是腸桿菌科的一個常見致病菌，其菌型繁多，已知的血清型有2500多個[3]。沙門菌是人畜共患的致病菌，且廣泛分布于自然界中，幾乎全部的血清型都會污染食物引起疾病，且在國內外細菌性食物中毒的報道中由沙門菌所致的食物中毒排行首位[4]。我國內陸地區各類細菌性食物中毒中，仍以沙門菌引起的居多。由倫敦沙門菌引起的食物中毒，文獻很少有報道，在2010年福建省廈門市有過文獻報道[5]。引起食源性疾病的沙門菌最常見血清型一般以腸炎沙門菌、鼠傷寒沙門菌引起的較為多見，因此提示沙門菌食物中毒血清型變遷的趨勢應值得注意[6]。

沙門菌污染的食物，主要為家禽肉及其制品、蛋類、鹵類等。此次在市售生螺螄中檢出1株倫敦沙門菌為無錫地區首次報告。據調查此農貿市場整體衛生環境較差，淡水產品攤點無控溫設施。銷售攤位從業人員從未辦理過健康體檢，衛生意識較為薄弱。為此，政府應加大農貿市場的環境改造，對市場衛生、清潔和區域控溫采取相應的措施；衛生相關管理部門及健康教育窗口應從熟食食品轉移到加工前生鮮食品的衛生管理和宣教[7]，加強對市售食品主動監測，嚴格地進行衛生檢驗，做好從業人員的衛生知識培訓，提高從業人員的衛生意識，發現并控制沙門菌感染的源頭，做好一切預防控制疾病的工作，進而達到預防食物中毒和食源性沙門菌病的發生與流行，更好地保障人民群眾的身體健康。

另外，提醒廣大消費者在日常生活中應增強衛生意識，加工用生熟容器一定要分開，避免交叉污染。食用時要煮熟煮透，預防食源性疾病的發生。

藥敏試驗結果顯示，此菌株對氯霉素、頭孢曲松、頭孢哌酮高度敏感，對四環素、鏈霉素中度敏感，與有關文獻報道趨向一致[8]；對慶大霉素、復方新諾明中度敏感與文獻報道不相一致[9]。由于不同菌株對不同抗生素的耐藥程度不同，提示臨床醫生對患者在選擇抗生素藥物治療時應引起重視。

沙門菌屬型別的不同，所引起的疾病流行方式和對藥物的敏感程度亦不相同。開展沙門菌的監測，及早地檢出和發現沙門菌屬新菌型，對該菌引發的疾病和公共衛生事件的防控有著重要的指導意義。

[參考文獻]

[1] 許少洪，孫鳳琪，曾愛芳，等. 廣州海珠地區2002年-2011年沙門菌血清型分布[J]. 中國衛生檢驗雜志，2013， 23（2）：466-469.

[2] 中華人民共和國衛生部. 食品安全國家標準食品微生物學檢驗[S]. GB4789-2010.

[3] 朱超，許學斌. 沙門菌屬血清型診斷[M]. 上海：同濟大學出版社，2009：52-62.

[4] 葉玉龍，鐘海明. 上海市金山區2009-2010年腹瀉病人及食品中沙門菌檢測結果分析[J]. 中國衛生檢驗雜志，2011，21（11）：2768-2769.

[5] 高亞色，李恩. 一起由奇異變形桿菌和倫敦沙門菌引起的食物中毒的實驗室檢驗[J]. 中國衛生檢驗雜志，2011， 21（9）：2222-2223.

[6] 何曉青. 衛生防疫細菌檢驗[M]. 北京：新華出版社，1989：479.

[7] 葉紅萍，虞精明，謝勤美，等. 2010年桐廬縣市售食品食源性致病菌污染調查分析[J]. 中國衛生檢驗雜志，2012， 22（1）：141-143.

[8] 李麗婕，李秀娟，趙冬. 石家莊市2006年-2008年食源性疾病監測中沙門菌的耐藥性分析[J]. 中國衛生檢驗雜志，2010，20（9）：2262-2263.

[9] 羅雪梅，廖國東，陳家圖，等. 2009年茂名市食源性沙門菌菌型分布及藥敏結果分析[J]. 中國衛生檢驗雜志，2011， 21（3）：644-647.

（收稿日期：2013-09-18）endprint

2 結果

2.1 培養結果

在1份市售生螺螄中檢出1株倫敦沙門菌，其余25份標本均未檢出沙門菌。此菌株在科瑪嘉沙門菌顯色平板上菌落呈圓形，濕潤、紫紅色；在HE瓊脂平板上菌落呈藍綠色，圓形、濕潤，菌落中心黑色；在三糖鐵瓊脂結果為葡萄糖產酸產氣，乳糖陰性，硫化氫陽性。

2.2 革蘭染色鏡檢

可疑菌株做革蘭染色，油鏡觀察，結果為革蘭陰性、無芽胞、無莢膜的桿菌。

2.3 生化反應

挑取可疑菌落接種于API20E試條上，按說明書操作，生化反應結果見表1。根據API20E生化鑒定試條的反應結果，得出編碼為6704752。經查API20E編碼手冊，該可疑菌落為沙門菌屬某些菌（Salmonella spp）。

2.4 血清學分型

挑取營養瓊脂斜面培養基上的純培養物與生理鹽水、沙門菌診斷血清進行凝集試驗。結果如下：沙門菌A～F群O多價血清凝集，生理鹽水對照不凝集；O抗原10血清凝集；H抗原第1相：l，v血清凝集；H抗原第2相：6血清凝集。

2.5 噬菌體裂解試驗

能被腸桿菌科分屬噬菌體O-I裂解，而不被C、sh、E、CE、E4、Ent噬菌體裂解，符合沙門菌屬的特性。

上述菌株通過血清學試驗、生化反應，參照沙門菌抗原表鑒定，證實為倫敦沙門菌。菌株經無錫市疾病預防控制中心復核結果相同。

2.6 藥敏試驗方法

按WHO推薦的K-B瓊脂紙片擴散法進行。該菌株對諾氟沙星、氯霉素、氧氟沙星、頭孢曲松、環丙沙星、頭孢哌酮高度敏感；對阿米卡星、四環素、鏈霉素、慶大霉素、復方新諾明中度敏感；對紅霉素、利福平、苯唑西林、萬古霉素耐藥。

3 討論

沙門菌是腸桿菌科的一個常見致病菌，其菌型繁多，已知的血清型有2500多個[3]。沙門菌是人畜共患的致病菌，且廣泛分布于自然界中，幾乎全部的血清型都會污染食物引起疾病，且在國內外細菌性食物中毒的報道中由沙門菌所致的食物中毒排行首位[4]。我國內陸地區各類細菌性食物中毒中，仍以沙門菌引起的居多。由倫敦沙門菌引起的食物中毒，文獻很少有報道，在2010年福建省廈門市有過文獻報道[5]。引起食源性疾病的沙門菌最常見血清型一般以腸炎沙門菌、鼠傷寒沙門菌引起的較為多見，因此提示沙門菌食物中毒血清型變遷的趨勢應值得注意[6]。

沙門菌污染的食物，主要為家禽肉及其制品、蛋類、鹵類等。此次在市售生螺螄中檢出1株倫敦沙門菌為無錫地區首次報告。據調查此農貿市場整體衛生環境較差，淡水產品攤點無控溫設施。銷售攤位從業人員從未辦理過健康體檢，衛生意識較為薄弱。為此，政府應加大農貿市場的環境改造，對市場衛生、清潔和區域控溫采取相應的措施；衛生相關管理部門及健康教育窗口應從熟食食品轉移到加工前生鮮食品的衛生管理和宣教[7]，加強對市售食品主動監測，嚴格地進行衛生檢驗，做好從業人員的衛生知識培訓，提高從業人員的衛生意識，發現并控制沙門菌感染的源頭，做好一切預防控制疾病的工作，進而達到預防食物中毒和食源性沙門菌病的發生與流行，更好地保障人民群眾的身體健康。

另外，提醒廣大消費者在日常生活中應增強衛生意識，加工用生熟容器一定要分開，避免交叉污染。食用時要煮熟煮透，預防食源性疾病的發生。

藥敏試驗結果顯示，此菌株對氯霉素、頭孢曲松、頭孢哌酮高度敏感，對四環素、鏈霉素中度敏感，與有關文獻報道趨向一致[8]；對慶大霉素、復方新諾明中度敏感與文獻報道不相一致[9]。由于不同菌株對不同抗生素的耐藥程度不同，提示臨床醫生對患者在選擇抗生素藥物治療時應引起重視。

沙門菌屬型別的不同，所引起的疾病流行方式和對藥物的敏感程度亦不相同。開展沙門菌的監測，及早地檢出和發現沙門菌屬新菌型，對該菌引發的疾病和公共衛生事件的防控有著重要的指導意義。

[參考文獻]

[1] 許少洪，孫鳳琪，曾愛芳，等. 廣州海珠地區2002年-2011年沙門菌血清型分布[J]. 中國衛生檢驗雜志，2013， 23（2）：466-469.

[2] 中華人民共和國衛生部. 食品安全國家標準食品微生物學檢驗[S]. GB4789-2010.

[3] 朱超，許學斌. 沙門菌屬血清型診斷[M]. 上海：同濟大學出版社，2009：52-62.

[4] 葉玉龍，鐘海明. 上海市金山區2009-2010年腹瀉病人及食品中沙門菌檢測結果分析[J]. 中國衛生檢驗雜志，2011，21（11）：2768-2769.

[5] 高亞色，李恩. 一起由奇異變形桿菌和倫敦沙門菌引起的食物中毒的實驗室檢驗[J]. 中國衛生檢驗雜志，2011， 21（9）：2222-2223.

[6] 何曉青. 衛生防疫細菌檢驗[M]. 北京：新華出版社，1989：479.

[7] 葉紅萍，虞精明，謝勤美，等. 2010年桐廬縣市售食品食源性致病菌污染調查分析[J]. 中國衛生檢驗雜志，2012， 22（1）：141-143.

[8] 李麗婕，李秀娟，趙冬. 石家莊市2006年-2008年食源性疾病監測中沙門菌的耐藥性分析[J]. 中國衛生檢驗雜志，2010，20（9）：2262-2263.

[9] 羅雪梅，廖國東，陳家圖，等. 2009年茂名市食源性沙門菌菌型分布及藥敏結果分析[J]. 中國衛生檢驗雜志，2011， 21（3）：644-647.

（收稿日期：2013-09-18）endprint

2 結果

2.1 培養結果

在1份市售生螺螄中檢出1株倫敦沙門菌，其余25份標本均未檢出沙門菌。此菌株在科瑪嘉沙門菌顯色平板上菌落呈圓形，濕潤、紫紅色；在HE瓊脂平板上菌落呈藍綠色，圓形、濕潤，菌落中心黑色；在三糖鐵瓊脂結果為葡萄糖產酸產氣，乳糖陰性，硫化氫陽性。

2.2 革蘭染色鏡檢

可疑菌株做革蘭染色，油鏡觀察，結果為革蘭陰性、無芽胞、無莢膜的桿菌。

2.3 生化反應

挑取可疑菌落接種于API20E試條上，按說明書操作，生化反應結果見表1。根據API20E生化鑒定試條的反應結果，得出編碼為6704752。經查API20E編碼手冊，該可疑菌落為沙門菌屬某些菌（Salmonella spp）。

2.4 血清學分型

挑取營養瓊脂斜面培養基上的純培養物與生理鹽水、沙門菌診斷血清進行凝集試驗。結果如下：沙門菌A～F群O多價血清凝集，生理鹽水對照不凝集；O抗原10血清凝集；H抗原第1相：l，v血清凝集；H抗原第2相：6血清凝集。

2.5 噬菌體裂解試驗

能被腸桿菌科分屬噬菌體O-I裂解，而不被C、sh、E、CE、E4、Ent噬菌體裂解，符合沙門菌屬的特性。

上述菌株通過血清學試驗、生化反應，參照沙門菌抗原表鑒定，證實為倫敦沙門菌。菌株經無錫市疾病預防控制中心復核結果相同。

2.6 藥敏試驗方法

按WHO推薦的K-B瓊脂紙片擴散法進行。該菌株對諾氟沙星、氯霉素、氧氟沙星、頭孢曲松、環丙沙星、頭孢哌酮高度敏感；對阿米卡星、四環素、鏈霉素、慶大霉素、復方新諾明中度敏感；對紅霉素、利福平、苯唑西林、萬古霉素耐藥。

3 討論

沙門菌是腸桿菌科的一個常見致病菌，其菌型繁多，已知的血清型有2500多個[3]。沙門菌是人畜共患的致病菌，且廣泛分布于自然界中，幾乎全部的血清型都會污染食物引起疾病，且在國內外細菌性食物中毒的報道中由沙門菌所致的食物中毒排行首位[4]。我國內陸地區各類細菌性食物中毒中，仍以沙門菌引起的居多。由倫敦沙門菌引起的食物中毒，文獻很少有報道，在2010年福建省廈門市有過文獻報道[5]。引起食源性疾病的沙門菌最常見血清型一般以腸炎沙門菌、鼠傷寒沙門菌引起的較為多見，因此提示沙門菌食物中毒血清型變遷的趨勢應值得注意[6]。

沙門菌污染的食物，主要為家禽肉及其制品、蛋類、鹵類等。此次在市售生螺螄中檢出1株倫敦沙門菌為無錫地區首次報告。據調查此農貿市場整體衛生環境較差，淡水產品攤點無控溫設施。銷售攤位從業人員從未辦理過健康體檢，衛生意識較為薄弱。為此，政府應加大農貿市場的環境改造，對市場衛生、清潔和區域控溫采取相應的措施；衛生相關管理部門及健康教育窗口應從熟食食品轉移到加工前生鮮食品的衛生管理和宣教[7]，加強對市售食品主動監測，嚴格地進行衛生檢驗，做好從業人員的衛生知識培訓，提高從業人員的衛生意識，發現并控制沙門菌感染的源頭，做好一切預防控制疾病的工作，進而達到預防食物中毒和食源性沙門菌病的發生與流行，更好地保障人民群眾的身體健康。

另外，提醒廣大消費者在日常生活中應增強衛生意識，加工用生熟容器一定要分開，避免交叉污染。食用時要煮熟煮透，預防食源性疾病的發生。

藥敏試驗結果顯示，此菌株對氯霉素、頭孢曲松、頭孢哌酮高度敏感，對四環素、鏈霉素中度敏感，與有關文獻報道趨向一致[8]；對慶大霉素、復方新諾明中度敏感與文獻報道不相一致[9]。由于不同菌株對不同抗生素的耐藥程度不同，提示臨床醫生對患者在選擇抗生素藥物治療時應引起重視。

沙門菌屬型別的不同，所引起的疾病流行方式和對藥物的敏感程度亦不相同。開展沙門菌的監測，及早地檢出和發現沙門菌屬新菌型，對該菌引發的疾病和公共衛生事件的防控有著重要的指導意義。

[參考文獻]

[1] 許少洪，孫鳳琪，曾愛芳，等. 廣州海珠地區2002年-2011年沙門菌血清型分布[J]. 中國衛生檢驗雜志，2013， 23（2）：466-469.

[2] 中華人民共和國衛生部. 食品安全國家標準食品微生物學檢驗[S]. GB4789-2010.

[3] 朱超，許學斌. 沙門菌屬血清型診斷[M]. 上海：同濟大學出版社，2009：52-62.

[4] 葉玉龍，鐘海明. 上海市金山區2009-2010年腹瀉病人及食品中沙門菌檢測結果分析[J]. 中國衛生檢驗雜志，2011，21（11）：2768-2769.

[5] 高亞色，李恩. 一起由奇異變形桿菌和倫敦沙門菌引起的食物中毒的實驗室檢驗[J]. 中國衛生檢驗雜志，2011， 21（9）：2222-2223.

[6] 何曉青. 衛生防疫細菌檢驗[M]. 北京：新華出版社，1989：479.

[7] 葉紅萍，虞精明，謝勤美，等. 2010年桐廬縣市售食品食源性致病菌污染調查分析[J]. 中國衛生檢驗雜志，2012， 22（1）：141-143.

[8] 李麗婕，李秀娟，趙冬. 石家莊市2006年-2008年食源性疾病監測中沙門菌的耐藥性分析[J]. 中國衛生檢驗雜志，2010，20（9）：2262-2263.

[9] 羅雪梅，廖國東，陳家圖，等. 2009年茂名市食源性沙門菌菌型分布及藥敏結果分析[J]. 中國衛生檢驗雜志，2011， 21（3）：644-647.

（收稿日期：2013-09-18）endprint