尿酸對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞HK-2纖維化相關(guān)調(diào)控因子的影響

陳繼承，康 潔，高碧珍，廖凌虹，丁珊珊

尿酸對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞HK-2纖維化相關(guān)調(diào)控因子的影響

陳繼承，康 潔，高碧珍，廖凌虹，丁珊珊

目的觀察不同濃度尿酸對(duì)人腎小管上皮細(xì)胞（HK-2）相關(guān)纖維化調(diào)控因子的影響，探討建立尿酸誘導(dǎo)的人腎小管上皮細(xì)胞纖維化模型，為尿酸性腎纖維化疾病的研究提供細(xì)胞模型。方法以不同濃度的尿酸刺激 HK-2細(xì)胞6，12，24，36h，MTT檢測(cè)細(xì)胞活性抑制率；Real-Time PCR檢測(cè)TGF-β1、CTGF、α-SMA mRNA的表達(dá)，觀察尿酸對(duì)HK-2細(xì)胞的促纖維化作用；26mg／dL濃度尿酸刺激HK-2細(xì)胞24h，免疫組織化學(xué)檢測(cè)TGF-β1、CTGF、α-SMA蛋白的改變。結(jié)果尿酸刺激后細(xì)胞活性抑制率與對(duì)照組比較明顯升高（P＜0.05），呈時(shí)間依賴性；尿酸刺激后TGF-β1、CTGF、α-SMA的表達(dá)量與對(duì)照組比較明顯增加（P＜0.05），并呈劑量依賴性；尿酸刺激后TGF-β1、CTGF、α-SMA蛋白的表達(dá)量與對(duì)照組比較明顯增加（P＜0.05）。結(jié)論尿酸可抑制 HK-2細(xì)胞增殖；采用尿酸誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞，可建立腎纖維化的細(xì)胞模型。

尿酸；上皮細(xì)胞；腎小管；纖維化；免疫組織化學(xué)；聚合酶鏈反應(yīng)

隨著生活水平提高，高尿酸血癥的發(fā)病率逐年遞增。當(dāng)尿酸長(zhǎng)期沉積于腎臟，可造成腎實(shí)質(zhì)損害，最終導(dǎo)致腎纖維化。目前腎纖維化動(dòng)物模型較多，而細(xì)胞模型較少，建立合適的腎纖維化細(xì)胞模型，對(duì)進(jìn)一步研究高尿酸血癥所致的腎纖維化的機(jī)制和防治，具有積極的意義。在高尿酸血癥最終導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化的過(guò)程中有多種纖維化因子，如轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子 β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（connective tissue growth factor，CTGF）、α平滑肌肌動(dòng)蛋白（αsmooth activator protein，α-SMA）參與其中。本實(shí)驗(yàn)擬觀察不同濃度尿酸對(duì)腎小管上皮細(xì)胞相關(guān)纖維化調(diào)控因子表達(dá)水平的影響，探討建立腎纖維化的細(xì)胞模型。……