兩類中藥方對消化性潰瘍患者熱休克蛋白70及瘦素表達的影響比較

李長軍 張平

武裝警察部隊湖北省總隊醫(yī)院消化內科，湖北武漢430061

兩類中藥方對消化性潰瘍患者熱休克蛋白70及瘦素表達的影響比較

李長軍 張平

武裝警察部隊湖北省總隊醫(yī)院消化內科，湖北武漢430061

目的觀察健脾溫中和疏肝理氣類中藥對消化性潰瘍(PU))患者熱休克蛋白70(HSP70)及瘦素(Leptin)表達的影響。方法2011年10月～2013年4月武裝警察部隊湖北省總隊醫(yī)院41例活動期并幽門螺桿菌(HP)陽性患者，脾胃虛寒型(對照組)19例與肝胃氣滯型(治療組)22例，均在西藥基礎上分別加用健脾溫中和疏肝理氣湯劑，6周后行胃鏡及HP復查；以酶聯(lián)免疫吸附分析方法(ELISA)對患者血清HSP70及Leptin進行檢測。結果HP根除率、胃鏡療效，兩組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；HSP70及Leptin含量，治療前兩組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；治療后，HSP70含量對照組增加顯著高于治療組(t=3.531，P＜0.01)，Leptin含量治療組提高明顯高于對照組(t=2.487，P＜0.05)。結論健脾溫中和疏肝理氣類中藥對消化性潰瘍患者血清HSP70及Leptin表達促進作用存在強度區(qū)別，西醫(yī)醫(yī)師應重視中藥的對證作用。

消化性潰瘍；中醫(yī)證型；中藥方劑；熱休克蛋白70；瘦素

由于獨特的預防和治療作用，尤其在某些疾病上發(fā)揮著化學藥品不可替代的重要作用，各大醫(yī)院采購品種繁多的中成藥［1］，我國約70%的中成藥由綜合醫(yī)院西醫(yī)醫(yī)師開出，但不合理使用率高達四成。許多中成藥也被聯(lián)合運用于消化性潰瘍(peptic ulcer，PU)治療，PU病理過程中相關因子的變化及中藥或中成藥對相關因子的影響及該影響對優(yōu)勢療效的作用有許多與單用西藥的對照性報道［2］。由于不少中成藥已從傳統(tǒng)的以主治證命名方式改變?yōu)橛械囊怨πШ妥饔妹?，有的以治療某病命名，甚至冠以通俗效能名，雖然方便了臨床醫(yī)師運用，但也易產生對病不對證等問題。中藥治病，處方基于中醫(yī)辨證，鑒于以辯證分型為基礎的分類中藥方劑機制對照研究不多，以及西醫(yī)醫(yī)師缺乏中醫(yī)辨證的相關知識與經驗，本文對中西醫(yī)結合治療PU過程中不同類別中藥對患者熱休克蛋白70(heat shock protein，HSP70)及瘦素(Leptin)表達的影響進行比較分析，望提高西醫(yī)醫(yī)師對中成藥對證作用的重視，并對西醫(yī)醫(yī)師盡量準確對證使用中成藥提出建議。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2011年10月～2013年4月武裝警察部隊湖北省總隊醫(yī)院門診患者41例，均經胃鏡檢查證實為活動期潰瘍，并經活檢排除胃癌；幽門螺桿菌(helicobacter pylori，HP)快速尿素酶檢測及14C尿素呼氣試驗均為陽性；男32例，女9例，年齡22～52歲；胃潰瘍9例，十二指腸潰瘍32例?；颊?周內未服用抗生素、鉍劑、抑酸劑及對HP有抑制作用的藥物，有嚴重心、肺、肝、腎及內分泌疾病；多發(fā)性及復合性或有嚴重并發(fā)癥；疑有惡變或有外科手術指征；特殊類型胃潰瘍或十二指腸潰瘍(如胃泌素瘤患者)；不愿、不便參與及有心理精神疾患者，均不列入觀察。脾胃虛寒型(對照組)19例，男15例，女4例，年齡23～50歲，胃潰瘍4例，十二指腸潰瘍15例；肝胃氣滯型(治療組)22例，男17例，女5例，年齡22～52歲，胃潰瘍5例，十二指腸潰瘍17例。各組年齡、性別、職業(yè)、飲酒、吸煙、飲食習慣等差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 主要試劑與儀器

人熱休克蛋白70 ELISA試劑盒(美國RD公司)；人瘦素ELISA試劑盒(安徽安科生物工程股份有限公司)；Elx800自動酶標儀(美國Bio.TekInstruments公司)。

1.3 方法

1.3.1 中醫(yī)分型及療效判定標準參照《中藥新藥臨床研究指導原則》(試行)［3］，中醫(yī)辨證分型標準：必備胃痛隱隱，喜暖喜按主癥，兼具其余主癥中1項加次癥2項為脾胃虛寒型；必備胃脘脹痛，兩脅脹悶，兼具其余主癥中1項加次癥2項為肝胃氣滯型。胃鏡療效判定標準：臨床痊愈為潰瘍及周圍炎癥全部消失；顯效為潰瘍消失，仍有炎癥；有效為潰瘍縮小50%及以上；無效為潰瘍縮小不及50%。

1.3.2 治療方法兩組患者均給予泮托拉唑(海南海力制藥有限公司，批號：11120290)40 mg/d，餐前0.5 h服用，2次/d；阿莫西林膠囊(珠海聯(lián)幫制藥股份有限公司中山分公司，批號；18578)1000 mg/d、克拉霉素分散片(黑龍江肇東華富藥業(yè)有限責任公司，批號：100901) 500 mg/d，2次/d，餐后即服；10 d后，泮托拉唑20 mg，1次/d；1個月后，雷尼替丁(杭州民生藥業(yè)有限公司，批號：4110101)300 mg/d，2次/d。對照組加服自擬健脾溫中湯(由黨參20 g，炒白術15 g，炙甘草10 g，干姜6 g，肉桂3 g等組成，由本院制劑室制作成煎劑，每袋100 mL，下同)，200 mL/d，2次/d，飯前1 h服用；治療組加服自擬自疏肝理氣湯(由柴胡15 g，陳皮15 g，香附10 g，枳殼12 g，炙甘草6 g等組成)，飯后1 h服用，均每7天為停服1 d。6周后進行胃鏡等復查。

1.3.3 標本采集和處理治療前后，每例患者取胃竇及胃體黏膜組織各2塊做尿素酶試驗；清晨空腹，用帶分離膠的血清采集管采前臂靜脈血6 mL，室溫靜置1 h，離心取上清2 mL分裝2個EP管，分置.27℃、.85℃冰箱保存。

1.3.4 血清標本檢測方法按ELISA試劑使用說明進行操作，在酶標儀450 nm波長下測定光密度值(OD值)，以曲線回歸方程計算樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 16.0軟件，計量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(±s)表示，采用t檢驗。計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 HP根除率

對照組17/19(89.47%)，治療組20/22(90.91%)，兩組比較，差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.024，P=0.877＞0.05)。

2.2 胃鏡療效

對照組19例，痊愈15例(78.95%)，顯效2例(10.53%)，有效1例(5.26%)，無效1例(5.26%)，總有效率94.73%。治療組22例，痊愈18例(81.82%)，顯效2例(9.09%)，有效1例(4.55%)，無效1例(4.55%)，總有效率95.45%。兩組臨床痊愈率比較，差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.054，P=0.817＞0.05)。

2.3 血清HSP70及Leptin含量

治療前兩組血清HSP70及Leptin含量比較，差異無統(tǒng)計學意義(t=0.052，t=0.197，P＞0.05)。治療后，對照組HSP70含量顯著增加(t=25.241，P＜0.01)，治療組亦明顯增加(t=2.136，P=0.045＜0.05)，對照組增加顯著高于治療組(t=3.531，P=0.001＜0.01)；治療組Leptin含量顯著提高(t=97.018，P＜0.01)，對照組明顯提高(t=0.264，P=0.472＜0.05)，治療組提高明顯高于對照組(t=2.487，P=0.017＜0.05)。表明健脾溫中與疏肝理氣類中藥對PU患者HSP70及Leptin的表達促進作用存在強度區(qū)別。見表1。

表1 兩組患者治療前后血清HSP70及Leptin含量比較（ng/mL，±s）

表1 兩組患者治療前后血清HSP70及Leptin含量比較（ng/mL，±s）

注：與對照組治療后比較，*P＜0.05，**P＜0.01；HSP70：熱休克蛋白70；Leptin：瘦素

組別例數(shù)H S P 7 0治療前治療后L e p t i n治療前治療后對照組治療組1 9 2 2 2 . 1 6 2 ± 0 . 0 1 5 2 . 1 6 4 ± 0 . 0 1 0 2 . 2 6 4 ± 0 . 0 1 1 2 . 2 1 3 ± 0 . 0 1 3**3 . 1 7 2 ± 0 . 0 1 4 3 . 1 6 9 ± 0 . 1 1 6 3 . 2 7 4 ± 0 . 0 1 3 3 . 3 1 9 ± 0 . 0 1 2*

3 討論

中醫(yī)中藥在治療消化性潰瘍方面積累了豐富經驗，有許多臨床觀察和研究［4］，中西醫(yī)結合治療PU能提高療效，能更快地改善臨床癥狀［5］，但對按中醫(yī)辯證分型確定的不同類中藥配方進行較為深入機制對照研究不多?；谌魏斡行У闹兴幏絼┒伎赡鼙恢谱鳛橹谐伤幍目紤]，筆者根據(jù)辨證分型以對證的自擬方劑合用西藥進行PU治療對照觀察，結果胃鏡下臨床痊愈率，對照組78.95%，治療組81.82%，與相關中藥方劑合用西藥療效接近［6］，再次說明中西醫(yī)結合治療能提高PU的療效。

各種生物受到外界不利或有害因素刺激時都會發(fā)生熱休克反應并產生熱休克蛋白(HSPs)，它們具有參與蛋白折疊、轉運、機體免疫和細胞凋亡等多種生理功能［7］。HSP70是熱休克蛋白家族主要成員之一，其通過提高細胞對應激的耐受性、抑制炎性反應、抗氧化、抗凋亡等多種途徑發(fā)揮細胞保護作用。Leptin在機體內作用廣泛，在免疫功能，細胞增殖、分化、轉移和調亡等方面具有重要的調節(jié)作用，其對免疫功能和炎性反應的調節(jié)作用是目前的研究熱點［8］。有研究顯示，黃芪建中湯合失笑散能顯著增加消化性潰瘍患者血清HSP70及瘦素的表達水平，并通過它們各自的保護機制促進潰瘍愈合［9］，筆者觀察PU患者治療后HSP70及Leptin含量兩組有顯著和明顯增加，推測較好的中西醫(yī)結合療效可能與上述兩種因子通過相關環(huán)節(jié)與因素的保護作用有關。PU患者HSP70表達較正常人增強［10］，消化性潰瘍的發(fā)生可使黏膜組織中Leptin的表達增加［11］，PU病理過程中的相關因子因素對HSP70及Leptin的表達應該有激發(fā)作用。但也有研究表明，PU患者治療前Leptin水平與正常人接近，治療后水平輕度下降［12］，與相關研究結果不一致的原因有待進一步研究，與本研究結果不一致的原因，筆者推測可能與病例選擇標準及檢驗時間不同有關，更有可能是中藥的促進表達影響作用。HSP70及Leptin調控機制十分復雜，潰瘍病理過程中的組織壞死性毒素、缺氧、胃酸和疼痛等諸多刺激因素可激活HSP70表達，而Leptin的表達促進則受體脂含量、某些激素、炎癥等多因素影響。他們的調控與作用涉及相關基因水平的激活與抑制，包含激素、酶類、神經機制等諸多因子因素間環(huán)節(jié)相互作用與反饋作用。筆者觀察發(fā)現(xiàn)健脾益氣類中藥提升HSP70作用強勢于疏肝理氣類中藥，而疏肝理氣類中藥提升Leptin作用強勢于健脾益氣類中藥，提示兩類中藥對PU患者HSP70及Leptin的表達的促進強度存在區(qū)別。該結果雖不能代表兩類中藥作用的全面機制，也可能對證使用的表達促進強度差異對機體發(fā)揮保護作用是適宜的，但從HSP70及Leptin調控機制及環(huán)節(jié)作用分析，兩種因子的表達差異應該對機體整體病理生理產生不同影響。盡管HSP70及Leptin對機體不良影響研究不多，但上述差異對療效和機體在不對證使用中藥時可能產生的不利影響應引起重視，也提示西醫(yī)醫(yī)師使用中成藥時要認真考慮對證作用。至于差異的原因仍有待進一步研究，也應加強治療前與正常人和組內與單用西藥治療的對照觀察。

中醫(yī)的證，是對致病因素與機體反應性兩方面情況的綜合，辨證是根據(jù)患者的臨床表現(xiàn)，辨別出病變當前的位置和性質，既含病因又含機制。客觀而言，高年資中醫(yī)醫(yī)師能做到辯證精準也屬不易，加之中醫(yī)癥狀體征、病因病機描述術語及身體部位的概念與西醫(yī)又存在很大區(qū)別，要求西醫(yī)醫(yī)師正確辯證極不現(xiàn)實。有學者發(fā)現(xiàn)PU患者中醫(yī)各證型與感染HP關系比較有顯著差異性［13］，更有學者對慢性腎功能衰竭不同中醫(yī)證型與HSP70、尿水通道蛋白2含量等指標的關系作了研究［14］，即便如此，也很難做到西醫(yī)檢查的客觀依據(jù)與中醫(yī)辨證所需要素的有機對應。目前，除傳統(tǒng)的膏、丹、丸、散外，針劑、口服液等穩(wěn)定安全的新劑型逐漸進入市場。但許多中成藥說明書，功能與主治說明既含中醫(yī)的證，也含西醫(yī)的病，或說明治療西醫(yī)某病中的某證，或按西醫(yī)藥理直接寫明某作用，如此勢必導致不熟悉中醫(yī)辯證的西醫(yī)醫(yī)師按病開藥，或按藥理和效能處方，不考慮對證或對證不準的問題在所難免。中醫(yī)界應加快與證相關檢查、檢驗客觀依據(jù)的定性、量化系統(tǒng)研究；中西醫(yī)結合工作者在中醫(yī)癥狀體征、部位術語等方面描述與西醫(yī)的差異要多作對照融通探索和宣教工作；單方復方機制研究，應將對證藥物可能引起對應癥狀體征改變的原因在機制上以現(xiàn)代醫(yī)學已有的病理生理及藥理認識和發(fā)展趨勢進行預測，開展如西醫(yī)的激動與阻滯、抑制與興奮似的中藥宏觀歸類與微觀作用的系列研究。要盡力減少只作與西醫(yī)相關因子符合性、驗證性的研究，避免支離性和分散性，中醫(yī)辨證分型結果關聯(lián)中藥性味，要把性味概念提升為西醫(yī)醫(yī)師易于理解的中藥藥理依據(jù)，中成藥說明書也應根據(jù)上述工作的開展作必要的內容調整。如此，也許能為西醫(yī)醫(yī)師盡量對證準確運用中成藥提供便利。

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The influence comparison on expression of heat shock protein 70 and Leptin by two types Chinese herbal medicine prescription in the treatment of peptic ulcer

LI ChangjunZHANG PingDepartment of Gastroenterology,Hubei Provincial Corps Hospital of Chinese People′s Armed Police Forces,Hubei Province,Wuhan430061,China

Objective To observe the expression influence of heat shock protein 70（HSP70）and Leptin on patients with peptic ulcer（PU）treated by traditional spleen.nourishing middle.warming and soothing liver regulating qi prescription.Methods 41 patients with Helicobacter pylori（HP）positive in active stage in Hubei Provincial Corps Hospital of Chinese People′s Armed Police Forces from October 2011 to April 2013,were divided into two groups,of which there were 19 cases with deficiency cold of spleen and stomach（control group）,22 cases with qi.stagnation of liver and stomach（treatment group）.The two groups were treated respectively by spleen.nourishing middle.warming and soothing liver regulating qi decoction while using western medicine,reexamination of gastroscope and HP were taken after 6 weeks. The HSP70 and Leptin content in serum were tested by enzyme.linked immunosorbent assay（ELISA）.Results The HP eradication rat and gastroscopic curative effect were not significantly different between control group and treatment group（P＞0.05）.The HSP70 and Leptin content were no significant differences between control group and treatment group before treatment（P＞0.05）after treatment,the content of HSP70 in control group was significantly higher than that in the treatment group（t=3.531,P＜0.01）,the content of Leptin improved was much higher in treatment group than that in control group（t=2.487,P＜0.05）.Conclusion There are intensive difference on expression of HSP70 and Leptin in serum of patients with peptic ulcer treated by traditional spleen.nourishing middle.warming and soothing liver regulating qi prescription,the medicine physicians should attach much weight to the consistence of TCM syndrome type and Chinese herbal medicine prescription.

Ulcer peptic;TCM syndrome type;Chinese herbal medicine prescription;Heat shock protein 70;Leptin

R259

A

1673-7210（2014）02（a）-0084-03

2013.11.08本文編輯：衛(wèi)軻)