不同類型胃組織病變中p21蛋白表達(dá)的差異及其臨床意義

李繼承，邵志平，邵慶紅，胡育昌，徐偉棟

不同類型胃組織病變中p21蛋白表達(dá)的差異及其臨床意義

李繼承，邵志平，邵慶紅，胡育昌，徐偉棟

目的探討不同類型的胃組織病變中p21蛋白表達(dá)的差異及其臨床意義。方法采用免疫組化法檢測(cè)p21在疣狀胃炎、非萎縮性胃炎、萎縮性胃炎及胃癌組織中的表達(dá)，并對(duì)各組進(jìn)行比較。結(jié)果p21在非萎縮性胃炎、萎縮性胃炎、疣狀胃炎及胃癌組織的表達(dá)分別為0、33.33%、30%及80%，疣狀胃炎的p21陽(yáng)性率顯著高于非萎縮性胃炎組，低于胃癌組，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均＜0.05），但與萎縮性胃炎差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05）。結(jié)論疣狀胃炎患者胃組織中p21蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率與萎縮性胃炎患者形似，可能是一種癌前病變。

胃腫瘤；癌；p21蛋白；疣狀胃炎

疣狀胃炎是由Moutler和Corner于1947年報(bào)道的一種內(nèi)鏡下形態(tài)，是慢性胃炎的一種特殊類型[1-2]。在內(nèi)鏡下，疣狀胃炎患者胃黏膜呈扁平疣狀隆起，胃黏膜表面有很多結(jié)節(jié)狀、痘疹狀突起。疣狀胃炎的具體發(fā)病機(jī)制尚不清楚，其病損是否有惡變傾向及其惡變規(guī)律也不清楚。筆者對(duì)12例疣狀胃炎患者檢測(cè)胃組織中p21蛋白的表達(dá)情況，對(duì)疣狀胃炎以及胃癌的相關(guān)性進(jìn)行探討。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集2009年1月至2012年1月浙江省永嘉縣人民醫(yī)院收治的疣狀胃炎患者12例（疣狀胃炎組），并選取同期本院門診就診的經(jīng)內(nèi)鏡病理檢查診斷為非萎縮性胃炎（非萎縮性胃炎組）、萎縮性胃炎（萎縮性胃炎組）及胃癌患者（胃癌組）各10例作為研究對(duì)象。所有患者均因消化道癥狀至本院就診，入組前均簽署知情同意書(shū)。疣狀胃炎組中男6例，女6例；年齡47～71歲，中位年齡52.3歲。非萎縮性胃炎組中男6例，女4例；年齡36～54歲，中位年齡43.2歲。萎縮性胃炎組中男5例，女5例；年齡37～55歲，中位年齡44.1歲。胃癌組中男4例，女6例；年齡48～72歲，中位年齡58.1歲。各組患者一般資料差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。

1.2 方法本研究主要試劑為鼠抗人p21單克隆抗體，購(gòu)自福州邁新生物有限公司，采用免疫組化法檢測(cè)p21蛋白在胃組織中的表達(dá)。所有患者入組后接受胃鏡檢查，取病變黏膜組織制作成石蠟組織塊，4 mm厚連續(xù)切片，然后進(jìn)行免疫組化染色。免疫組化染色方法如下：石蠟切片常規(guī)脫蠟后，置于3%H2O2室溫孵育5～10 min，然后使用滅菌0.9%氯化鈉注射液沖洗，PBS浸泡2次，每次5min。加入5%～10%正常胎牛血清封閉，室溫下孵育20min，棄去血清，滴加鼠抗人p21單克隆抗體工作液，工作液采用PBS配置，37℃孵育1～2 h；再用PBS沖洗3次，每次5min；然后加入滴加適量生物素標(biāo)記二抗工作液，工作液采用PBS配置，37℃孵育30min后，PBS沖洗3次，每次5 min。最后滴加適量的辣根酶或堿性磷酸酶標(biāo)記的工作液，37℃孵育20 min后，顯色劑顯色10 min。研究用已知p21陽(yáng)性的胃癌切片作為陽(yáng)性對(duì)照，用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果分析研究采用定性結(jié)合定量分析進(jìn)行，若切片中細(xì)胞核、細(xì)胞漿、細(xì)胞膜為棕黃色則視為p21陽(yáng)性。每張切片隨機(jī)觀察20個(gè)高視野(×200)，每個(gè)視野至多計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分比率。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≥5%為陽(yáng)性染色，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤5%為陰性染色。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用2檢驗(yàn)。＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

疣狀胃炎組患者p21蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率為33.3%（4/12），明顯高于非萎縮性胃炎組患者陽(yáng)性率0（0/10），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2=4.074，=0.044）；亦低于胃癌陽(yáng)性率80%（8/10），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2=4.791，=0.029）；疣狀胃炎組患者p21蛋白陽(yáng)性率與萎縮性胃炎組[30%（3/10）]差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（2=0.028，=0.867）；疣狀胃炎組患者中，男性患者p21蛋白陽(yáng)性者2例，女性患者中p21蛋白陽(yáng)性者2例。

3 討論

在胃組織的病變中，p21的表達(dá)有著重要的臨床價(jià)值[3]。p21蛋白屬于ras蛋白，ras是最早發(fā)現(xiàn)的人類癌基因,其分子量是21000 kD，故稱p21蛋白；Ras基因在進(jìn)化中高度保守，廣泛存在于各種真核生物細(xì)胞中。p21蛋白定位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，為GTP/GDP結(jié)合蛋白，通過(guò)GTP與GDP的相互轉(zhuǎn)化來(lái)調(diào)節(jié)信號(hào)通路的傳遞。有研究表明，胃癌中p21陽(yáng)性表達(dá)率可高達(dá)80%，隨著病變惡性程度的增高，p21陽(yáng)性率逐漸下降[4-5]。本研究也證實(shí)，胃癌患者中p21的陽(yáng)性率高達(dá)80%，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。因此，p21蛋白表達(dá)可作為評(píng)估胃癌細(xì)胞惡性程度以及預(yù)后的指標(biāo)[6]。

萎縮性胃炎也稱慢性萎縮性胃炎，是指胃黏膜表面反復(fù)受到損害后導(dǎo)致的黏膜固有腺體萎縮，甚至消失，黏膜肌層常見(jiàn)增厚的病理改變。由于腺體萎縮或消失，胃黏膜有不同程度的變薄，并常伴有腸上皮化生，炎性反應(yīng)及不典型增生[7]。該病是消化系統(tǒng)常見(jiàn)疾病之一，慢性萎縮性胃炎多由慢性淺表性胃炎失治或誤治轉(zhuǎn)化而成，本研究結(jié)果顯示萎縮性胃炎組患者的p21蛋白陽(yáng)性率高達(dá)30%，提示少數(shù)萎縮性胃炎有演變?yōu)槲赴┑目赡苄浴ｐ酄钗秆资橇硗庖环N較為特殊的慢性胃炎，其特點(diǎn)為再發(fā)生或持續(xù)性胃多發(fā)性糜爛，糜爛呈特征性的疣狀，多數(shù)分布于幽門腺區(qū)和移行區(qū)范圍，少數(shù)可見(jiàn)于整個(gè)胃[8-9]。疣狀胃炎與目前已知的慢性胃炎的原因無(wú)關(guān)，其發(fā)病機(jī)制及轉(zhuǎn)歸不清。本研究結(jié)果表明，疣狀胃炎患者胃組織中p21蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率為33.3%，與萎縮性胃炎患者相似，也可能是一種癌前病變，但仍需進(jìn)一步的研究確認(rèn)。此外，本研究疣狀胃炎組患者中，男性患者p21蛋白陽(yáng)性者2例，女性患者中p21蛋白陽(yáng)性者2例，說(shuō)明其陽(yáng)性率和性別無(wú)相關(guān)性。

綜上所述，疣狀胃炎患者胃組織中p21蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率與萎縮性胃炎患者形似，可能是一種癌前病變。

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10.3969/j.issn.1671-0800.2014.11.028

R573；R365

A

1671-0800(2014)11-1378-03

325100浙江省永嘉，永嘉縣人民醫(yī)院

李繼承，Email：29875402@qq.com