兩種商品化降鈣素原定量檢測試劑盒方法學比對

楊 琴 張學東 張文星 (勝利油田中心醫院檢驗科，山東 東營 257000)

降鈣素原(Procalcitonin，PCT)由位于11 號染色體(11p15.4)上的Calc-I 基因編碼，通過選擇性剪接(編碼1～4 外顯子)生成Calc-ImRNA，轉錄后在甲狀腺濾泡旁細胞粗面內質網翻譯成降鈣素原前體。裂解生成的PCT 由116 個氨基酸組成，相對分子質量為13 000［1，2］。它在細菌或真菌感染合并嚴重全身系統反應或器官低灌注時顯著升高，而在病毒或局灶感染時水平正常或輕度升高。這個特性使得PCT 用來鑒別系統感染和非感染性炎癥或局灶感染，是具有高靈敏度、特異性的新指標。此外，PCT 還可用來判斷治療的有效性、疾病的嚴重程度和預后［3］。

目前臨床上降鈣素原的試劑大多為進口試劑盒，試劑和耗材價格昂貴，儀器維護成本高，隨著國內全自動磁微粒化學發光技術的發展及國產試劑盒質量的提高，有必要對國內一些廠家的試劑性能進行評估，本文選用臨床比對的方法對國產試劑盒質量進行評價，探討其臨床應用價值。

1 材料與方法

1.1 材料 取材來自隨機選擇2014 年1～3 月間本院門診、急診和住院患者，檢驗申請單目的為降鈣素原檢測，在進口全自動檢測系統和國產全自動化學檢測系統平行檢測靜脈血采集的血清樣本。其中臨床比對樣本300 例，采用雙盲法。進口儀器為羅氏e601，試劑為進口配套化學發光試劑;國產全自動為鄭州安圖生物AutoLumo A2000，配套化學發光試劑為鄭州安圖生物(Autobio)生產提供。

1.2 方法 ①嚴格按照試劑盒說明書操作和判定結果。②進口全自動化學發光系統和國產全自動化學發光系統平行檢測所選樣本的降鈣素原，并對兩種檢測結果結合臨床診斷進行統計、分析、比對。③質控均采用廠家提供的配套質控品，采用L-J 法質控方法判斷。④PCT 試劑盒對照和考核試劑盒檢測原理及結果解釋詳見表1。

1.3 統計學處理 采用SPSS18.0 統計分析軟件進行數據處理和統計分析［10］，陰陽性結果分析進行χ2檢驗分析，檢驗水準P ＞0.05，量值相關性統計分析采用線性回歸模式分析。

表1 兩種商品化試劑盒簡介Tab.1 Instruction of two commercial diagnostic kits

2 結果

兩種檢測系統檢測結果的總符合率為97.67%(詳見表2)，χ2=1.29，P=0.26，兩者差異不顯著(P ＞0.05);相關系數r=0.950 05(詳見圖1)，量值相關性分析有相關性。

不符樣本分析，以0.5 ng/ml 作為參考值分析，不符樣本7 例，其中6 例樣本為灰區樣本，無統計學意義，1 例樣本為第三方進口試劑和國產試劑檢測結果均大于0.5 ng/ml，而進口試劑檢測檢測結果小于0.5 ng/ml，結合這份樣本其他檢測結果如肺炎支原體為陽性，C 反應蛋白(CRP)為78.4 mg/ml，D-二聚體陽性，尿膽原陽性，需要多次抽血動態監測標志物濃度的動態變化，并結合臨床癥狀和體征等綜合分析。

表2 兩試劑盒檢測結果比對表Tab.2 Result comparison between two kits

圖1 兩試劑盒檢測結果量值相關性分析圖Fig.1 Result correlation between two kits

3 討論

臨床上細菌感染性疾病極為常見，而病原學診斷耗時長，在微生物培養結果出來之前臨床上已盲目地使用抗菌藥物，造成了抗菌藥物的濫用，也加重了患者經濟負擔。盡快找到快捷、有效的實驗方法對細菌感染性疾病進行診斷及鑒別診斷，并準確評價細菌感染性疾病的發生、發展，有著非常重要的臨床應用價值。降鈣素原(PCT)是近年來發現的一種新的細菌感染診斷與鑒別診斷的指標，研究發現PCT 可用于疾病的早期診斷、細菌感染與非細菌感染的鑒別診斷，還可用于感染病情的監測，反映炎癥活動情況及疾病嚴重程度，比傳統的炎性指標有更高的敏感性和特異性［4］。

據調查，目前國內三級甲等以上醫院的臨床實驗室已經普及了自動化儀器［5］，其中進口設備以及試劑所占比例超過95%，基本上處于壟斷地位，國產全自動免疫系統處于發展期［6］。目前國內綜合性醫院臨床實驗室降鈣素原定量檢測大多為進口儀器及配套進口試劑，價格昂貴，檢驗及儀器維護成本過高，依賴性強，增加病人經濟及精神負擔。我們用國產磁微粒化學發光全自動降鈣素原定量檢測系統，與用進口免疫檢測系統平行檢測300 例降鈣素原(PCT)樣本，并對兩種試劑檢測結果進行比對分析，結果顯示國產磁微粒化學發光降鈣素原(PCT)定量檢測系統與羅氏降鈣素原定量檢測系統整體對比結果良好，且試劑及儀器維護成本降低，在一定程度上既滿足了臨床定量檢測的需求，同時在較大程度上降低了檢驗費用，減輕了患者經濟負擔，有較大的臨床應用價值。

本研究采用雙盲法，平行檢測了300 例PCT 樣本，比對結果顯示，其中7 例不符樣本，6 例樣本結果為0.5 ng/ml 上下偏差20%的樣本，1 例樣本為第三方進口試劑和國產試劑檢測結果均大于0.5 ng/ml，而進口試劑檢測檢測結果為＞0.5 ng/ml，結合這份樣本其他檢測結果如肺炎支原體為陽性，C反應蛋白(CRP)為78.4 mg/ml，D-二聚體陽性，尿膽原陽性，因此筆者認為對于該例標本及類似樣本，需要多次抽血動態監測標志物濃度的動態變化，并結合臨床癥狀和體征等綜合分析。

［1］Russwurm S，Wiederhold M，Oberhoffer M.Molecular aspects and natural source of procalcitonin［J］.Clin Chem Lab Med，1999，37(8):789-797.

［2］胡如雪.降鈣素原(PCT)的臨床應用價值［J］.江西醫學檢驗，2005，23(3):244，259.

［3］吳 熙，于學忠.降鈣素原［J］.中國醫學科學院學報，2008，30(2):231-235.

［4］吳修宇，鄧 夢，黎楊楊，等.降鈣素原在感染性疾病中的臨床意義［J］.檢驗醫學與臨床，2014，11(1):75-77.

［5］黃建榮，薛一峰，蔣華振.FT3、FT4 化學發光免疫分析的方法學指標及評價［J］.標記免疫分析與臨床，2009，16(1):55-56.

［6］李耀華.國內外免疫自動化發展趨勢現狀與分析［J］.醫藥論壇雜志，2011，32(14):197-200.