γ－干擾素釋放試驗(yàn)在肺外結(jié)核診斷上的價(jià)值探討

鐘恢海，李林濤，黃素華 （新余市人民醫(yī)院傳染科，江西 新余 338001）

近年來，結(jié)核病免疫診斷技術(shù)的取得了很大進(jìn)展。γ－干擾素釋放試驗(yàn)由于其高敏感性與特異性，對痰結(jié)核菌涂片陰性或痰結(jié)核菌培養(yǎng)陰性的肺結(jié)核、肺外結(jié)核提供了早期無創(chuàng)診斷的重要途徑之一。本研究通過對肺外結(jié)核、肺結(jié)核、肺部感染患者外周血T細(xì)胞致敏后分泌γ－干擾素，探討干擾素釋放試驗(yàn)對臨床醫(yī)生診斷肺外結(jié)核的指導(dǎo)意義。

1 對象與方法

1.1 對象

我院2012年1月至2013年7月肺外結(jié)核患者43例，其中淋巴結(jié)核18例，結(jié)核性腹膜炎7例，結(jié)核性腦膜炎5例，腰椎結(jié)核4例，子宮內(nèi)膜結(jié)核5例，盆腔結(jié)核4例，均通過病理診斷確診，該組病例已作胸部CT排外肺結(jié)核、肺部感染。并選取本科門診及住院肺結(jié)核患者37例，通過胸部CT、痰找結(jié)核菌、支氣管鏡檢查確診。并選肺部感染患者41例，通過胸部CT、痰培養(yǎng)確診做對照。

1.2 樣本采集及實(shí)驗(yàn)室檢測

QFT－GIT試劑盒購自澳大利亞Cellestis公司。按照說明書要求完成樣本的采集、刺激培養(yǎng)和檢測。所有標(biāo)本均于室溫下瞬時(shí)離心，取上清液進(jìn)行ELISA檢測γ－干擾素，應(yīng)用Biotek Synery 2酶標(biāo)儀（Biotek）讀取結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件，各組陽性率的比較采用行×列表卡方檢驗(yàn)。進(jìn)一步兩兩比較采用行×列表分割檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

肺外結(jié)核組43例患者中γ－干擾素釋放試驗(yàn)檢查陽性39例，陽性率為90.7%；肺結(jié)核組37例患者中γ－干擾素釋放試驗(yàn)檢查陽性34例，陽性率為91.9%，兩者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＞0.05）。41例肺部感染組患者5例陽性，陽性率為12.2%，與上述2組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＜0.01）。

3 討論

全球結(jié)核病疫情呈現(xiàn)加重趨勢，我國屬于結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家?？刂平Y(jié)核病的傳播，及早診斷解結(jié)核尤其重要。以往對肺外結(jié)核診斷方法有限，主要依賴于病理活檢進(jìn)行病理診斷，不能進(jìn)行病理診斷者，往往進(jìn)行診斷性治療，這可能造成誤診、誤治，給患者帶來不必要的負(fù)擔(dān)。

早期診斷和治療是改善結(jié)核分枝桿菌感染患者的關(guān)鍵，也是控制結(jié)核播散的重要環(huán)節(jié)。目前涂片鏡檢找抗酸桿菌和分枝桿菌分離培養(yǎng)是臨床結(jié)核病診斷的主要依據(jù)，但其陽性率取決于采集標(biāo)本中目標(biāo)細(xì)菌的數(shù)量，并且分離培養(yǎng)需要2個(gè)月時(shí)間，用BACTEC法一般也需要兩周才能分離出分枝桿菌，不利于早期診斷和治療［1］。目前仍在應(yīng)用的PPD試驗(yàn)不能確診結(jié)核感染，其陽性結(jié)果有以下幾種可能：現(xiàn)癥感染結(jié)核，既往感染結(jié)核，非結(jié)核分支桿菌感染，曾接種過卡介苗。PPD試驗(yàn)的陽性不能作為結(jié)核感染診斷依據(jù)，不能指導(dǎo)治療［2］。γ－干擾素釋放試驗(yàn)是近年來新出現(xiàn)的一種檢測結(jié)核分枝桿菌感染的方法，該法選用在卡介苗和大多數(shù)非結(jié)核桿菌中普遍缺失，通過體外監(jiān)測活化的免疫細(xì)胞數(shù)或免疫分子量的變化來診斷是否存在結(jié)核感染，不會同卡介苗和環(huán)境中的分枝桿菌發(fā)生交叉免疫，且不受機(jī)體免疫環(huán)境的影響［3－4］。

相對于PPD試驗(yàn)，γ－干擾素釋放試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)主要在于：①特異性較高，不受卡介苗和大多數(shù)非結(jié)核分枝桿菌的影響。②結(jié)果解讀客觀。③體外實(shí)驗(yàn)24～48h可獲得結(jié)果，無需再次隨訪，失訪率減少。④對于免疫低下和免疫抑制人群較PPD有更高的靈敏性。但它存在一定局限性：①由于是體外測試而有實(shí)驗(yàn)室要求，采集標(biāo)本需后續(xù)處理并盡早測試以避免細(xì)胞功能下降。②高昂的費(fèi)用是經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)地區(qū)普及的主要障礙。③同時(shí)無法預(yù)測結(jié)核病的進(jìn)展。④由于缺乏足夠的臨床數(shù)據(jù)，尚無法對5歲以下幼兒、近期結(jié)核桿菌暴露者、免疫抑制者及曾多次使用IGRA測試可疑患者進(jìn)行評價(jià)［5］。

本研究發(fā)現(xiàn)，γ－干擾素釋放試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的敏感性、特異性為91.9%，87.8%；診斷肺外結(jié)核的敏感性、特異性為90.7%，87.8%，差異無統(tǒng)計(jì)意義 （P＞0.05）。對于肺外結(jié)核，無其他途徑或患者不接受病理活檢，可考慮使用該方法，避免對患者的創(chuàng)傷。

［1］韋海旭，席薇蓮，陸利歡，等.γ－干擾素釋放分析T－spot.TB在結(jié)核性疾病中的診斷價(jià)值 .臨床肺科雜志 ［J］.2012，17 （8）：1439－1440.

［2］廉國利，王亞婷 .干擾素釋放試驗(yàn)對兒童隱性結(jié)核感染的診斷價(jià)值 .臨床兒科雜志 ［J］.2010，28（2）：116－119.

［3］Yang HL，Kruh－Garcia NA，Dobos KM.Purified protein derivatives of tuberculin－past present andfuture［J］.FEMS Immunol Med Microbiol，2012，66 （3）：273－280.

［4］Yang HL，Troudt J，Grover A，et al.Three protein cocktails mediate delayed－type hypersensitivity responses indistinguishable from thate licited by purified protein derivative in the guinea pig model of Mycobacterium tuberculosis infection［J］.Infect Immun，2011，79（2）：716－723.

［5］辛田田，黎友倫 .結(jié)核潛伏感染診斷方法新進(jìn)展與臨床應(yīng) ［J］.中國人獸共患病學(xué)報(bào)，2013，29（4）：403－407.