HPLC法檢測設備表面鹽酸普拉克索殘留量

杭州朱養心藥業有限公司（310011）郭艷超 李閱東 唐建飛 朱琴 任行鋒 徐凱

帕金森病是一種常見的中樞神經系統變性疾病，常見于老年人。普拉克索（pramipexole）是1997年經FDA批準上市的新型抗帕金森病的新藥，能有效激動多巴胺D2，亞群受體（D2、D3、D4），并對D3亞型受體有最高的親和力，也是第一個作用于D3受體的藥物[1]。鹽酸普拉克索能夠有效的改善早期及晚期帕金森病的運動癥狀，延緩和減輕左旋多巴相關運動并發癥的發生和程度，并能緩解帕金森伴發的抑郁癥狀[2][3]。本研究根據《藥品GMP指南》中的內容[4]對設備表面鹽酸普拉克索殘留的檢測方法進行了考察。

1 儀器與試劑

儀器：Agilent1200/1260液相色譜儀及工作站，BT125D分析天平（塞多利斯科學儀器有限公司），KQ500E超聲清洗器（中國昆山市超聲儀器有限公司）；鹽酸普拉克索對照品（自標，批號120201）。

試劑及試樣：甲醇為色譜純，水為純化水，鹽酸普拉克索片（公司自制）。

2 方法

2.1 色譜條件及系統適用性 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-醋酸-醋酸銨緩沖液（pH4.8，10∶90）為流動相；檢測波長為264nm，進樣量20μl，理論塔板數按鹽酸普拉克索峰計應不低于2000。2.2 溶液制備 精密稱取鹽酸普拉克索對照品適量，用純化水溶解并稀釋成一定濃度溶液，搖勻，即得對照品溶液；取合適濃度的對照品溶液適量，均勻滴加涂布在面積為25cm2的不銹鋼板上，制得25μg/25cm2的不銹鋼板（模擬生產設備進行取樣）；待溶液干后，用棉簽擦拭，之后將棉簽浸在5ml水中超聲，取浸出液即得。

3 結果

3.1 系統適用性 精密量取濃度為5.0μg /ml對照品溶液20μl注入液相色譜儀，連續進樣5次，記錄色譜圖，5次峰面積的RSD%為0.47%（＜2.0%），系統具有良好的適用性。

3.2 準確度試驗 精密稱取對照品和處方量的空白輔料，用純化水稀釋成含鹽酸普拉克索分別為2.5、5.0、7.5μg/ml的回收率溶液，每個濃度3份。三個濃度平均回收率分別為100.0%、98.4%、98.9%，RSD%為0.9%。

3.3 專屬性 取空白溶劑、空白輔料溶液和5.0μg/ml的供試液和對照品溶液進行測定。空白溶劑和空白輔料在主峰位置均無保留，樣品溶液與對照品溶液主峰保留時間一致。結果表明，空白溶劑及空白輔料對鹽酸普拉克索主峰無干擾，該方法專屬性強。

3.4 檢測限 將對照品溶液（5μg/ml）進行系列稀釋，取稀釋溶液20μl注入液相色譜儀。將信號與空白溶劑的信號進行比較，記錄信噪比為3∶1時的濃度。信噪比為2.8∶1時，檢測限為0.012μg/ml。

3.5 線性 取對照品適量，用純化水配成濃度分別為2.5、4.0、5.0、6.0、7.5μg/ml的溶液，精密吸取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜。以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標作圖，得回歸方程為：y＝29.294x-0.6641，R2＝0.9999。結果表明，鹽酸普拉克索濃度在2.5～7.5μg/ml范圍內，線性關系良好。

3.6 溶液穩定性 分別在0、2、4、8、12、24h測定濃度為5.0μg/ml對照品溶液和樣品溶液峰面積，分別計算RSD。RSD分別為0.9%和0.6%，說明兩種溶液在24小時內的穩定性良好。

3.7 取樣回收率 按“2.2”項下的方法，配制成濃度為5.0μg/ml的對照溶液和供試溶液。取樣回收率為90.0%。說明設備表面的大部分殘留都能被擦拭下來。

4 結論

通過上述驗證，說明該檢測方法準確度高、專屬性強、靈敏度高、線性及耐用性均良好，能夠真實可靠地檢測出設備表面殘留的情況，為清潔提供有力的數據支持。