高效液相色譜儀分析法檢測食品中人工色素的技術(shù)研究

陳姍姍

【摘 要】 目的：對高效液相色譜儀分析法對食品中人工色素進行測定方法進行分析探討，為今后的研究工作提供可靠的參考依據(jù)。方法：采取Venusil MP C18柱，流動相為甲醇-乙腈（1：1）梯度洗脫，外標法進行定量，對食品中7種人工合成色素進行檢測。結(jié)果：該方法檢測食品中人工合成色素時色素濃度在0.5-20.0mg/l時存在良好線性關(guān)系，r>0.9991，加樣回收率在78.6%-100.7%之間，RSD值在0.2%-4.3%之間。結(jié)論：采取高效液相色譜法對食品中人工色素檢測檢測時方法可靠，值得推廣。

【關(guān)鍵詞】 高效液相色譜法 食品 人工色素 技術(shù)研究

食品中的人工合成色素為化學合成方法所制備的，以苯、甲苯、萘等化工產(chǎn)品作為原料，經(jīng)一系列反應(yīng)合成制得。目前食品中合成色素濫用現(xiàn)象嚴重，食品合成色素檢測已經(jīng)成為食品檢查工作中一項重要內(nèi)容[1]。本次研究中建立了高效液相色譜法對食品中人工色素進行了檢測，現(xiàn)匯報如下。

1 材料與方法

（1）儀器與試劑

實驗中所需儀器為我實驗室現(xiàn)有高效液相色譜儀，電子天平、旋渦混合儀、超聲波清洗機、恒溫水浴鍋、高速離心機、純水器。

實驗試劑包括：甲醇、乙腈均為色譜純，乙酸銨、乙酸鉛為分析純，日落黃（0.500mg/mL）、檸檬黃（0.500mg/mL）、莧菜紅 （0.500mg/mL）、亮藍（0.500mg/mL）、胭脂紅（0.500mg/mL）、赤蘚紅（100mg/L）以及誘惑紅（100mg/L）標準品。

（2）樣品來源：本次實驗中樣品來源于周邊超時、零售攤點以及菜市場食品。

（3）方法：（a）標準品配制：將上述7種標準品經(jīng)濃度為20%的甲醇進行溶解制成質(zhì)量濃度為100mg/l的混合標準儲備液，在4℃條件下保存。將制備好的混合標準儲備液經(jīng)濃度為20%的甲醇稀釋成不同濃度（0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0mg/l）的標準系列溶液，先用現(xiàn)配。（b）色譜條件：實驗中所需色譜柱為Venusil MP C18柱，柱溫設(shè)定為30℃，流動相A相為甲醇乙腈，B相為濃度為0.02mol/l的乙酸銨溶液，流速為1.0ml/min，梯度洗脫：0-12.0 min時A相5%，12-30min時A相自5%-35%，30-35min時A相自35%-98%，35-35.1min是A相在98%-4%，35.1-55min時A相維持5%。進樣量為10ul，檢測波長分別為：檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃為254nm，誘惑紅、赤蘚紅為500nm，亮藍為600nm。分別展開線性關(guān)系考察、加樣回收實驗、精密度實驗。（c）樣品處理：所取樣品進行處理后取上清液，在10ml的離心管中在10000r/min條件下離心操作5min，經(jīng)0.45微孔濾膜過濾后備用。

2 結(jié)果

2.1 線性關(guān)系考察結(jié)果

本次試驗中7種人工合成色素0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0mg/l不同濃度溶液經(jīng)1.3.2色譜條件進樣檢測，以峰面積為縱坐標，以色素濃度為橫坐標，的線性回歸方程，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，色素濃度在0.5-20.0mg/l時存在良好線性關(guān)系，r>0.9991，詳見表1。

2.2 加樣回收實驗結(jié)果和精密度

本次實驗中在樣品中分別添加各色素含量為3、15、40mg/kg的標準品，以1.3.2所示色譜條件進樣檢測，外標法進行定量，計算回收率和RSD值，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，7中色素加樣回收率在78.6%-100.7%之間，RSD值在0.2%-4.3%之間，詳見表2。

3 討論

近幾年的實驗研究發(fā)現(xiàn)，高效液相色譜法在藥學、食品等諸多領(lǐng)域均發(fā)揮了重要作用，為含量測定、質(zhì)量控制等工作提供了可靠的參考依據(jù)[2]。本次實驗中建立的高效液相色譜法在7種食品人工合成色素檢測中，色素濃度在0.5-20.0mg/l之間時存在良好線性關(guān)系，回收率在78.6%-100.7%之間，相對較高， RSD值在理想范圍內(nèi)，精密度良好，檢測效果理想，在大批量樣品中多種色素檢測中可發(fā)揮重要作用，值得對其給予重視并推廣，為今后的食品安全檢驗工作提供參考依據(jù)。

參考文獻

[1]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局，中國國家標準化管理委員會.GB/T 23496-2009，食品中禁用物質(zhì)的檢測-堿性橙染料 高效液相色譜法[S]，2009.

[2]路勇，渠巖，馮楠等.超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜法快速篩查食品中的45種工業(yè)染料[J].食品科學，2012，33（6）：176-180.endprint