色譜檢測技術對糧食真菌毒素的檢測方法研究

金明亮

糧食真菌毒素種類及特點

真菌毒素對人體健康構成嚴重威脅，包括黃曲霉毒素、赭曲霉毒素 A、伏馬毒素、嘔吐毒素、展青霉素、玉米赤霉烯酮、T-2 毒素等，其中黃曲霉毒素在紫外線下，黃曲霉毒素 B1、B2 發藍色熒光，黃曲霉毒素 G1、G2 發綠色熒光，難溶于水，易溶于油、甲醇、丙酮和氯仿等有機溶劑，但是不溶于石油醚、乙烷和乙醚中，容易感染黃曲霉毒素的糧食產品包括大豆、稻谷、玉米、通心粉、調味品、牛奶、奶制品、食用油等；赭曲霉毒素 A 是穩定的無色結晶化合物，溶于極性溶劑和稀碳酸氫鈉溶液，微溶于水，容易感染赭曲霉毒素 A 的糧食產品包括大豆、綠咖啡豆、綠豆、啤酒、葡萄汁、調味品、豬腎等；伏馬毒素是一種近年來發現的新型毒素，白色粉末，易溶于水、甲醇及乙腈 - 水中，容易感染該毒素的糧食產品包括大米、面條、調味品、高粱、啤酒等；嘔吐毒素可以導致食用者腸功能紊亂、口腔黏膜和真皮損傷，免疫力下降，一般在大麥、小麥、玉米、燕麥中有較高濃度，在黑麥、高粱和大米中有較低濃度；展青霉素具有致畸性、致突變性和致癌性，主要存在于霉爛的蘋果和山楂中；玉米赤霉烯酮主要存在于玉米、玉米制品、干草和青儲飼料中。

色譜檢測技術流程

色譜檢測需要按照相應的標準內容來實施，首先需要確保檢測數值和結果的準確度。一般情況下，可設置95% ～ 110% 的加標回收率，并要結合實際情況，加入一些混合溶液，控制過大的檢測誤差 . 在前期進行分組時，包含了同類的待測農產品，在此基礎上可以進行標準化空白溶液的調配；然后在檢測過程中，需要針對各組樣本設定相應的加標回收率，確保每批樣本都具有精確的回收率。這里需要采用相應的判定標準，也就是符合 70% ～ 130% 加標回收率的農產品，才能判定為合格。最后，針對那些超標的農產品樣本，需要利用質譜檢驗的工序進行二次確定。

色譜檢測技術檢測方法

樣品與設備。

采用液相色譜檢測方法檢測玉米和小麥中存在的真菌毒素，黃曲霉毒素標溶液、OTA 標準溶液、DON標準溶液、T-2 毒素標準溶液、乙醇、甲醇、乙腈；設備采用 1260 高效液相色譜儀。

各種檢測方法。一是氣相色譜法，當前其得到了廣泛的應用。該方法具有較快的分析速度，可以對有機物進行多層次分離。采用氣相色譜分析方法，可以提高檢測工作的靈敏度。例如，一些物質不易被分解，但在特定的溫度下可能會受到汽化的影響，這類物質便可采用氣相色譜法進行檢測，如各類鹵素、硫化物和磷化物；對于一些肉類產品，其中的三甲胺可以利用氣相色譜法來進行檢測。二是液相色譜法。相比氣相色譜，液相色譜穩定性不強，且揮發性較差，是一種沸點較高的復雜物質，多為化合物。液相色譜儀由液相色譜柱、高壓泵等部件構成，檢測器也具備較高的靈敏度，針對那些離子化合物、高聚物可以選用液相色譜儀來進行檢測，如甲胺磷化物等。三是氣質聯用儀，是將質譜和色譜的性能結合起來，對待測物質可以進行精準的定位，但難以精準判斷較為復雜的農產品。四是液質聯用技術，以液相色譜作為分離系統，質譜為檢測系統。樣品在質譜部分和流動相分離，被離子化后，經質譜的質量分析器將離子碎片按質量數分開，經檢測器得到質譜圖。液質聯用在對獸藥進行檢測時，具有高選擇性、高靈敏度等特點。比如，利用安捷倫 6410 串聯四級桿液質聯用儀對蝦仁和雞肉中的氨霉素進行分析時，可以使用同位素內標和簡單的固相萃取法基質樣品中氯霉素進行檢測，其檢測限可達到 10 mg/kg。

選擇合適的技術指標。從儀器分析的角度來看，在選擇技術指標時，不僅要選用符合特性的檢出限，而且應選用敏銳度、穩定性和重復性較為合適的指標。在實際檢測工作中，一些廠家會根據相應的內容，給出技術性的檢出限指標，然后將待測樣本分為多種，這樣檢測到的數值可能與實際情況存在一些出入。如果選用規模較大的色譜檢測儀，那么需要通過前期的調研和對比才能進行工作。與此同時，應和相關領域的專家進行溝通，全面了解檢測儀的技術優勢和技術性能。

利用高效液相色譜分析法對其進行檢測，實驗表明該種方法具有很高的靈敏性、很強的辨識性、很好的回收率、檢測時間短，該種檢測技術值得被推廣應用到糧食產品真菌毒素的檢測中，為人類食品安全檢測提供保障。endprint