蘋果清汁中多酚物質的高效液相指紋圖譜研究

摘要以蘋果清汁為樣品，優化多酚檢測條件，建立了不同品種蘋果清汁中多酚的HPLC指紋圖譜。結果表明，采用Welchrom C18色譜柱，在檢測波長280 nm，柱溫30 ℃，進樣量20 μl，流動相0.3%三氟乙酸水溶液和甲醇（流速1 ml/min）以及梯度洗脫的條件下，標定了12個共有指紋峰，測定出10個品種蘋果清汁多酚的指紋相似度均在0.900以上，多酚含量為1 974～3 598 μg/ml，初步建立了蘋果清汁的高效液相指紋圖譜。該方法可為蘋果加工企業對蘋果多酚的質量進行定性、定量地控制提供試驗依據。

關鍵詞 蘋果清汁；多酚；指紋圖譜；高效液相色譜分析

中圖分類號S661.1；TS255.7文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）24-08335-06

HPLC Fingerprint of Polyphenol Compounds in Apple Juice

DENG Hong， MENG Yonghong et al（College of Food Engineering and Nutritional Science， Shaanxi Normal University， Xi’an， Shaanxi 710062）

AbstractThe HPLC fingerprint of polyphenols in different varieties apple juice was established using apple juice as a sample and after optimizing the polyphenol analysis conditions. The results show that under those conditions of using Welchrom C18 column， at the detection wavelength of 280 nm， the column temperature 30 ℃， amount of sample 20 μl， mobile phase of 0.3% three trifluoroacetic acid aqueous solution and methanol （flow 1 ml/min）， gradient elution， 12 common fingerprint peaks were determined. As well as the finger print similarity of polyphenol is above 0.900， and the content of polyphenol in 10 categories apple juice was 1 974 to 3 598 μg/ml. So the HPLC fingerprint of apple juice was initially established. This method will provide the test basis for apple juice processing enterprises in their qualitative and quantitative analysis and control of apple polyphenol.

Key wordsApple juice； Polyphenol； Fingerprint； HPLC analysis

蘋果（Malus domestica）是薔薇科蘋果亞科蘋果屬的落葉喬木。蘋果的果實富含礦物質和維生素，是人們最常食用的一種水果。我國具有豐富的蘋果資源，除大部分蘋果用以鮮食外，還有部分蘋果用于濃縮果汁的生產。目前，我國蘋果濃縮汁產業規模較大，僅陜西就有多家蘋果濃縮汁生產企業，且濃縮蘋果汁產量位列世界濃縮蘋果汁生產和出口第一[1-2]。濃縮果汁以其可口的味道、低廉的價格，深受國內外飲料生產商的喜愛。

蘋果多酚（Applepolyphenols，APP）是蘋果中的一種次生代謝產物，具有預防高血壓、抗腫瘤、阻礙紫外線吸收等多種生理保健功能[3-5]，是蘋果汁的主要營養功效成分之一。研究表明，蘋果多酚化合物的組分和含量因其品種、種植條件、氣候等條件的不同而改變，從而影響蘋果汁產品的質量。

由于蘋果多酚（APP）是蘋果中所含的多元酚類物質的混合體，其產品質量無法用單一的組分說明，所以建立一種能夠綜合反映蘋果中多酚組分及其含量的質量評價方法非常有必要。指紋圖譜[6-7]是國內外能普遍接受的一種食品及藥材質量評價的模式，它可宏觀地綜合分析其所含成分的復雜性和相關性，能更好地評價蘋果多酚的質量；因而建立蘋果汁多酚的高效液相（HPLC）指紋圖譜對控制多酚的質量及蘋果汁產品的摻假鑒別具有重要的意義。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗原料與試劑。試驗收集了10個不同品種的蘋果樣品（表1），0～5 ℃低溫冰箱保存，分析前自行榨汁獲得蘋果清汁供提取多酚用。

3 結論

蘋果清汁多酚的高效液相色譜檢測的條件為：檢測波長為280 nm，流動相為甲醇-0.3%三氟乙酸水溶液，梯度洗脫程序為：0～70 min，B為10%～45%；70～80 min，B為50%～50%，流速為1 ml/min。

通過對蘋果清汁多酚指紋圖譜的研究，發現不同品種的蘋果清汁的多酚雖然出現了相應的主成分峰，但是峰高和峰面積具有顯著性差異，說明蘋果多酚與蘋果的品種、產地、種植條件等因素有關。

不同品種蘋果清汁多酚的12種共有峰中標定的9種單體酚分別是兒茶素、綠原酸、咖啡酸、表兒茶素、金絲桃苷、蘆丁、根皮苷、槲皮苷、槲皮素。其中含量最高的是綠原酸（2號峰），含量最低的是槲皮素（12號峰）。

該試驗初步建立的蘋果清汁的高效液相指紋圖譜方法，其精密度、穩定性、重現性均很好，測定出10種蘋果清汁多酚的指紋相似度均在0.900以上，蘋果清汁總多酚含量為1 974～3 598 μg/ml。

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