下調miR—155表達對鼻咽癌CNE2細胞增殖的影響

摘要：目的 miR-155在人類多種腫瘤中過表達。本研究觀察干擾miR-155表達對鼻咽癌細胞CNE2增殖的影響。方法 使用脂質體將miR-155抑制物 （miR-155 inhibitor）轉染CNE2，以無關序列（Control inhibitor）作為陰性對照。采用qRT-PCR技術驗證miR-155 inhibitor轉染細胞中miR-155的表達水平；采用MTS法測定各組細胞1d、2d、3d和4d的吸光度（OD）值，繪制生長曲線，觀察干擾miR-155表達對CNE2細胞增殖能力的影響。結果 轉染miR-155 inhibitor的CNE2細胞中miR-155的表達明顯下調，并且呈現明顯的濃度依賴性。表明轉染miR-155 inhibitor能有效抑制CNE2細胞中miR-155的表達。轉染miR-155 inhibitor的 CNE2細胞與對照細胞相比，增殖速度明顯減慢。差異具有顯著性（P<0.05）。結論 miR-155能促進鼻咽癌細胞增殖能力，它可能在鼻咽癌的發生和進展中發揮重要作用。

關鍵詞：鼻咽癌；miR-155；細胞增殖

miRNA是由長約19-24個核苷酸組成的非編碼小分子RNA，它通過降解靶mRNA或抑制靶mRNA的翻譯來調節靶基因表達。MiRNAs參與生命過程中一系列的重要進程，包括生長發育、細胞增殖、分化、細胞運動、新陳代謝等 [1]。其中miR-155在許多類型的腫瘤中過度表達，且其過度表達被認為與腫瘤的發生發展有重要關系[2～4]。然而miR-155在鼻咽癌發生發展中的作用目前并不清楚。本研究通過在鼻咽癌CNE2細胞中轉染miR-155 inhibitor使miR-155表達下調，探討干擾miR-155對鼻咽癌細胞增殖的影響，從而初步揭示miR-155在鼻咽癌發生發展中的作用。

1資料與方法

1.1一般資料 qRT-PCR miRNA Detection Kit購自上海吉瑪生物公司。MiRNA inhibitor為Ambion公司產品。RPMI-1640培養基購自Hyclone公司、胎牛血清來自杭州四季青公司。25ml培養瓶、96孔板（美國Coming公司）。MTS細胞增殖檢測試劑盒購自美國Promega公司。Lipofectamine 2000轉染試劑購自美國Invitrogen公司。

1.2細胞培養 鼻咽癌細胞株CNE2為典型低分化鱗癌細胞，由我院研究所保存，培養于含10%小牛血清的RPMI1640，在95%濕度，5% CO2，37°C條件下。……