摘要:隨著國(guó)家的發(fā)展和社會(huì)的進(jìn)步,越來(lái)越多新的科學(xué)技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到了應(yīng)用。測(cè)定重要成分和含量的方法也在逐漸的發(fā)展和改進(jìn)。本文中筆者根據(jù)自身的經(jīng)驗(yàn)以及對(duì)目前有關(guān)中藥成分含量測(cè)定的已有資料的研究,總結(jié)和歸納了目前常用的重要成分含量測(cè)定方法,以期能夠更好的對(duì)比和研究各個(gè)方法的優(yōu)缺點(diǎn),為業(yè)內(nèi)的研究和應(yīng)用者提供參考和借鑒。
關(guān)鍵詞:中藥;成分;含量;測(cè)定
中藥作為中華民族的傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)內(nèi)容其獨(dú)特的理論體系已經(jīng)為我國(guó)的民族醫(yī)學(xué)發(fā)展和民眾健康生活做出了重要的貢獻(xiàn)。近些年來(lái),隨著中藥的各種品種、制劑以及其他應(yīng)用在各個(gè)方面的飛速發(fā)展,中藥制品主要以復(fù)方制劑呈現(xiàn),由于其種類(lèi)較多,生長(zhǎng)環(huán)境和加工環(huán)境各不相同,產(chǎn)地和成分相對(duì)復(fù)雜,制作工藝存在差異等問(wèn)題導(dǎo)致了中藥制劑的有效成分問(wèn)題備受關(guān)注。對(duì)中藥制劑的質(zhì)量控制最關(guān)鍵的部分就是對(duì)其有效成分的控制,下文加針對(duì)這一問(wèn)題進(jìn)行闡述,主要是對(duì)近些年來(lái)業(yè)內(nèi)的研究成果做一個(gè)總結(jié)和概括。現(xiàn)有的有關(guān)中藥有效成分的測(cè)定方法主要有如下幾種:
1化學(xué)定量法
對(duì)中藥制劑成分測(cè)定的最原始的方法就是化學(xué)定量法,但這種方法只適用于對(duì)處方中的無(wú)機(jī)成分的測(cè)定,并且只適用于單味中藥制劑[1]。這一部分主要包括滴定法和重量法,一旦所測(cè)定的處方比較復(fù)雜就只能得到某類(lèi)成分的總量,而不能找到專(zhuān)屬性特點(diǎn)。
2比色法
比色法是指將特定的顯色試劑與中藥的有效成分進(jìn)行呈色后進(jìn)行比對(duì)和測(cè)定的方法,這種方法可以用于分離中藥成分中的酚性化合物、生物堿、皂甙類(lèi)、蒽醌類(lèi)、黃酮類(lèi)等常見(jiàn)成分。
3紫外分光光度法
紫外分光光度法主要是利用中藥中的有效成分對(duì)紫外分光有特定的吸收程度,在不添加顯色劑的情況下對(duì)各種波長(zhǎng)的光進(jìn)行吸收,最后通過(guò)對(duì)吸收度的測(cè)量來(lái)計(jì)算成分含量的方法。這種方法在實(shí)際使用中比比色法運(yùn)用的更廣,可以用來(lái)測(cè)定二苯乙烯苷類(lèi)、皂甙類(lèi)、香豆素類(lèi)、黃酮類(lèi)等化合物的含量,進(jìn)行痕量和微量的組分分析,并且可以達(dá)到0.5%的精密度和10-4~10-7g/ml的靈敏度。
4紅外光譜法(FTIR)
FTIR是紅外光譜法(Frustrated Total Internal Reflection)的簡(jiǎn)稱(chēng),該方法在使用過(guò)程中會(huì)在演示屏幕的夾層中加入LED光線,當(dāng)用戶(hù)按下屏幕時(shí),便會(huì)使夾層的光線造成不同的反射效果,感應(yīng)器接收光線變化而捕捉用戶(hù)的施力點(diǎn),從而作出反應(yīng)[2]。這一方法具有很高的重現(xiàn)性和專(zhuān)屬性,并且操作相對(duì)簡(jiǎn)便,可以對(duì)分子結(jié)構(gòu)信息進(jìn)行分析。近些年,紅外光譜儀的使用越來(lái)越廣泛,其在中藥成分測(cè)定中發(fā)揮的作用也被更多關(guān)注。
5薄層掃描法(TLCS)
TLCS是薄層掃描法(Thin Layer Chromatograph Scanning)的簡(jiǎn)稱(chēng),該方法是以一定波長(zhǎng)的光照射展開(kāi)后的薄層色譜板,測(cè)定其對(duì)光的吸收或所發(fā)出的熒光,進(jìn)行定量分析的方法[3]。通常選擇斑點(diǎn)中化合物的吸收峰波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)、選擇化合物吸收光譜的基線部分、即化合物無(wú)吸收的波長(zhǎng)作為參比波長(zhǎng)。薄層掃描法一般可分為吸收掃描法和熒光掃描法。對(duì)薄層進(jìn)行分離得到的直觀結(jié)果可以很好的提高中藥有效成分的檢測(cè)穩(wěn)定性和靈敏度,并且操作相對(duì)簡(jiǎn)單,對(duì)靛玉紅、豬去氧膽酸、淫羊藿苷、綠原酸等成分的測(cè)定過(guò)程都有很好的效果。
6氣相色譜法(GC)
GC是氣相色譜法(Gas Chromatography)的簡(jiǎn)稱(chēng),該方法的重現(xiàn)性也相對(duì)較好,可以通過(guò)很少的樣品用量實(shí)現(xiàn)快速的高靈敏高選擇性測(cè)定[4]。但是由于檢測(cè)方法的原理限制,受到樣品蒸汽壓的影響,只能測(cè)定出揮發(fā)性成分在樣品中的含量。對(duì)于具有重要揮發(fā)性成分的制劑,采用GC分析的方法可以說(shuō)是目前最好的方法之一,能夠?qū)?nèi)酯類(lèi)、冰片、生物堿、麝香酮、酚類(lèi)、麻黃堿、蒎烯、斑鰲素、察香酮、丹皮酚、芳香醇等成分實(shí)現(xiàn)高效分析。
7高效液相色譜法(HPLC)
HPLC是高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography)的簡(jiǎn)稱(chēng)。高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要組成部分,采用高壓輸液系統(tǒng),以液體為流動(dòng)相,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的緩沖液、混合溶劑等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析[5]。這一方法測(cè)定重要成分的時(shí)候也同樣具有靈敏度高和選擇性好的優(yōu)點(diǎn),并且重現(xiàn)性和分析速度都能夠達(dá)到一般測(cè)定要求。因此,高效液相色譜法已經(jīng)成為當(dāng)前醫(yī)學(xué)界對(duì)重要含量測(cè)定所采用的最廣泛的做法。但是這一方法也有一定的弊端,就是其對(duì)儀器的基本要求相對(duì)較高,建立色譜的過(guò)程和條件也相對(duì)復(fù)雜。
本文中介紹了目前醫(yī)學(xué)界對(duì)中藥成分含量測(cè)定的常見(jiàn)方法,包括高效液相色譜法、氣相色譜法、薄層掃描法、紅外光譜法、紫外分光光度法、比色法和化學(xué)定量法,其中前四種是目前普遍使用的,而后三種的技術(shù)已經(jīng)逐漸在使用過(guò)程中淘汰。醫(yī)學(xué)界目前對(duì)重要成分的檢測(cè)已經(jīng)朝著更加全面和合理的方向的發(fā)展,色譜技術(shù)以其較多的優(yōu)勢(shì)在應(yīng)用中倍受青睞,發(fā)揮了較多的作用。相信隨著科技的進(jìn)步帶動(dòng)醫(yī)學(xué)界的不斷發(fā)展,中藥成分含量測(cè)定的工作一定會(huì)開(kāi)展的更加完善和合理,其測(cè)定效果也會(huì)越來(lái)越精確。
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編輯/王海靜