淺談臨床檢驗(yàn)ABO血型鑒定的質(zhì)量控制方法

血型是人類血液以血型抗原為表現(xiàn)形的遺傳性狀，ABO血型系統(tǒng)和Rh血型系統(tǒng)是紅細(xì)胞的兩大血型抗原抗體系統(tǒng)，在臨床輸血和血液遺傳學(xué)研究上有重要意義。血型鑒定是臨床輸血的首要問題，正確的血型鑒定是保證輸血安全的前提條件。臨床常用的血型鑒定方法有鹽水凝集法和凝膠微柱法。鹽水凝集法因簡(jiǎn)單易行在臨床上廣泛應(yīng)用，其又分為玻片法和試管法，結(jié)果在實(shí)際操作中會(huì)受到諸多因素的影響。本文通過對(duì)200名患者的玻片法和試管法的血型鑒定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，探討ABO血型鑒定中的影響因素。

1資料與方法

1.1一般資料 我院2007年8月～2012年10月間200名患者，年齡18～55歲。對(duì)每名患者同時(shí)用玻片法和試管法兩種方法進(jìn)行ABO血型鑒定。

1.2 標(biāo)本采集 抽取EDTA抗凝血，在2h內(nèi)完成ABO血型鑒定操作。ABO血型鑒定方法包括正定型法與反定型法，其中正定型法主要是玻片法與試管法。

1.3結(jié)果判斷 凝集判斷標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞均勻分布，無凝集顆粒，顯微鏡下紅細(xì)胞分散存在，無凝集靠攏現(xiàn)象為陰性，紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集為陽性。

1.4血型試劑 人ABO血型反定型用紅細(xì)胞試劑盒，上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司；抗A、抗B血型鑒定單克隆抗體；長(zhǎng)春博德生物技術(shù)有限公司提供。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 全部數(shù)據(jù)采用SPSS1 1.5統(tǒng)計(jì)軟件包處理，計(jì)量資料以x±s表示。計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)和率表示，計(jì)數(shù)資料比較用 檢驗(yàn)。P<0.05有差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

①玻片法和試管法的血型鑒定結(jié)果：可以看出不論是玻片法還是試管法，200名患者分布是一致的，即O型最多，之后依次為B、A、AB，即O>B>A>AB。②玻片法和試管法的鑒定結(jié)果顯示AB型人數(shù)相同，而A型、B型和O型人數(shù)不完全一致，存在一定的差異。

3討論

血型由血型基因決定，是血細(xì)胞的主要特征之一， 在臨床輸血和血液遺傳學(xué)研究上有重要意義。輸血安全是臨床輸血的首要問題，正確的血型鑒定（blood typing）是保證輸血安全的前提條件。此文筆者就臨床血型鑒定的經(jīng)驗(yàn)和體會(huì)進(jìn)行簡(jiǎn)單交流。

3.1醫(yī)務(wù)人員的問題 臨床醫(yī)生在填寫輸血申請(qǐng)時(shí)，沒有做血型檢測(cè)，單憑印象或聽信患者的自訴血型而造成血型錯(cuò)誤；臨床護(hù)士在抽取血標(biāo)本時(shí)，未校對(duì)患者的姓名、床號(hào)，僅憑印象，抽了其他人的血液而造成血型報(bào)告錯(cuò)誤或交叉配血不合；檢驗(yàn)科人員沒有對(duì)報(bào)告核對(duì)正確，造成血型鑒定錯(cuò)誤。

3.2被檢紅細(xì)胞 ①血型測(cè)定的錯(cuò)誤血型：檢測(cè)時(shí)，因患者紅細(xì)胞懸液濃度過低，又只用肉眼觀察結(jié)果，使之在血型抗原較弱的情況下，微弱、細(xì)小的凝集未看到，而造成定型報(bào)告錯(cuò)誤。②標(biāo)本新鮮，嚴(yán)防污染。細(xì)菌污染的標(biāo)本，紅細(xì)胞上T抗原被激活，與標(biāo)準(zhǔn)血清中的抗T抗體結(jié)合，出現(xiàn)全凝集現(xiàn)象，干擾血型鑒定。某些疾病如多發(fā)性骨髓瘤所致的高球蛋白血癥在做ABO血型鑒定時(shí)出現(xiàn)假凝集，可加做自身血清和紅細(xì)胞，自身紅細(xì)胞和生理鹽水對(duì)照試驗(yàn)及結(jié)合反定型結(jié)果進(jìn)行鑒定。當(dāng)疑有血漿成分干擾血型鑒定時(shí)，可用生理鹽水反復(fù)洗滌紅細(xì)胞以除去干擾。③冷凝集素屬于冷反應(yīng)性的自身抗體，4℃ 條件下，正常人血清中的冷凝集素效價(jià)低于1：16，冷凝集素效價(jià)增高是導(dǎo)致獻(xiàn)血者血型正反定型不符的常見廄 。在較低溫度條件下，冷凝集素能夠與標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞和自身紅細(xì)胞產(chǎn)生凝集現(xiàn)象，凝集強(qiáng)度隨著溫度的升高而減弱。低效價(jià)的冷凝集素在37qC不能凝集標(biāo)準(zhǔn)RBC和自身RBC，因此不會(huì)造成血型誤判，但高效價(jià)的冷凝集素在37℃仍可產(chǎn)生較強(qiáng)凝集，容易造成血型誤判。如果獻(xiàn)血者血清中含有高效價(jià)的冷凝集素，在血型鑒定試驗(yàn)中應(yīng)使用37℃生理鹽水洗滌紅細(xì)胞或45%熱放散，或用經(jīng)4cI=處理的冷凝集素被自身紅細(xì)胞吸收后的血清進(jìn)行血型鑒定，以排除冷凝集素的干擾。在肺炎、支原體肺炎、肝硬化等疾病患者血清中，冷凝集素很高，嚴(yán)重干擾血型鑒定。④ ABO亞型在血型血清學(xué)試驗(yàn)中是導(dǎo)致正反定型不符的主要原因之一。亞型屬于同一血型抗原，是由基因所決定的抗原結(jié)構(gòu)和位點(diǎn)數(shù)改變導(dǎo)致的弱表現(xiàn)型。在A抗原中主要為A，和A ，其他A亞型不多見，而B亞型通常比A亞型更少。⑤ ABO血型抗體減弱：ABO血型規(guī)則抗體合成量的不足也是造成正反定型不符的重要因素。當(dāng)獻(xiàn)血者血清中抗一A和抗一B效價(jià)減弱，其反定型格局總表現(xiàn)為AB型。在這種情況下，可以通過增加血清用量，降低反應(yīng)溫度，延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，應(yīng)用低離子強(qiáng)度溶液等方法，檢出低效價(jià)的抗一A和抗一B。

3.3實(shí)驗(yàn)器材 ①所用器材必須清潔、干燥，試管、滴管要專用，標(biāo)記清楚。②用試管法定型時(shí)，應(yīng)同時(shí)進(jìn)行正向和反向定型。每批測(cè)定均須設(shè)置對(duì)照。③紅細(xì)胞濃度按要求配制，紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體的比例適當(dāng)。④反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、離心時(shí)間是血型鑒定的重要影響因素，要按操作規(guī)程嚴(yán)格控制。

3.4其它因素 ①經(jīng)輸血或妊娠等免疫刺激產(chǎn)生，在獻(xiàn)血者中常見的不規(guī)則抗體是抗一M、抗一N和抗一A等。在反定型試驗(yàn)中，不規(guī)則抗體可以和標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞上相應(yīng)的抗原發(fā)生凝集反應(yīng)，而這種反定型結(jié)果與A或B抗原無關(guān)，所以導(dǎo)致ABO血型鑒定時(shí)正反定型結(jié)果不一致。②類B抗原某些受腸道革蘭氏陰性桿菌感染的患者，紅細(xì)胞獲得了類B抗原，A型患者可誤定為AB型，O型誤定為B型。因此，感染體征患者配血不合時(shí)，應(yīng)考慮類B。③磺胺類藥物引起的凝集有人報(bào)道一個(gè)B型的獻(xiàn)血員闌尾術(shù)后用氨苯磺胺，3個(gè)月后，其血清能凝集A、AB型的紅細(xì)胞，也能凝集B型的紅細(xì)胞。另外，注射青霉素后，有些人的血清中含有青霉素抗體，而青霉素已吸附在紅細(xì)胞表面，當(dāng)此紅細(xì)胞與含有青霉素抗體的血清相遇時(shí)便發(fā)生凝集。

總之，在患者ABO血型鑒定試驗(yàn)中，如果出現(xiàn)正反定型結(jié)果不符，不能輕易發(fā)報(bào)告，否則，可致ABO血型的誤判。因此，在具備認(rèn)真的工作態(tài)度的基礎(chǔ)上，還需要不斷積累豐富的血型鑒定經(jīng)驗(yàn)，對(duì)異常結(jié)果進(jìn)行系統(tǒng)全面地分析，查明原因，以獲得ABO血型的準(zhǔn)確定型，確保安全輸血。編輯/申磊