不同抗凝劑及標本放置時間對T淋巴細胞亞群檢測結果的影響

摘要：目的 探討不同抗凝劑及標本放置對流式細胞術檢測T淋巴細胞亞群檢測結果的影響。方法 采集健康體檢者血液，分別用肝素鈉、EDTA-K2抗凝，室溫保存，在不同時間進行T淋巴細胞亞群檢測。結果 EDTA-K2抗凝血與0h相比，CD3+、CD8+細胞百分率在24h開增高，CD3+到48h明顯增高（P<0.05），CD8+細胞到36h明顯增高（P<0.05），CD4+細胞到72h變化無統計學意義（P>0.05）；肝素鈉抗凝血CD3+、CD4+、CD8+細胞到72h與0h相比無統計學意義（P>0.05）。結論 不同抗凝劑在室溫下不同保存時間對T淋巴細胞檢測有影響，EDTA-K2抗凝的標本在室溫下應在24h內完成檢測；肝素鈉抗凝的標本可在72h內測定。

關鍵詞：流式細胞術；標本放置時間；T淋巴細胞亞群

T淋巴細胞亞群是目前臨床用于評估患者細胞免疫功能常用的檢測指標之一，其準確性直接影響臨床診斷。因此標本采集真空采血管所用抗凝劑及標本送檢及保存時間等因素都會影響測定結果。針對這一問題，本研究對靜脈血采集后不同抗凝劑、標本放置時間對T淋巴細胞亞群的影響進行實驗分析和評估，報道如下。

1資料與方法

1.1標本來源 2013 年9月本院健康體檢者10例，其中男6例，女4例，平均年齡37歲。

1.2主要儀器和試劑 Beckman Coulter公司FC500型流式細胞儀，熒光標準微球Flow-Check、CD45-FITC /CD3- PE-Cy5/CD4-PE/CD8-ECD及同型對照均購自Immunotech公司。

1.3方法 空腹采集健康體檢者靜脈血于EDTA-K2及肝素鈉抗凝管各2.0mL，充分混勻，室溫（20℃）保存。分別于采血后0h、1h、2h、4h、8h、12h、16h、24h、36h、48h及72h按常規方法用CD45-FITC /CD3- PE-Cy5/CD4-PE/CD8-ECD標記并設同型對照；用熒光標準微球Flow-Check校準流式細胞儀的光路和流路，用同型對照設定陽性域值后檢測，每份樣本均檢測并分析10000個細胞，記錄各抗原表達的百分率?！?br>