威海某地區(qū)水貂阿留申病的診斷與調(diào)查

陳超然　溫建新

摘 要：選取威海某地區(qū)的兩個水貂場作為抽樣樣本，取得疑似阿留申病毒致死的病死貂和2 000多個水貂的血液樣品，檢測該地區(qū)水貂阿留申病的陽性率。對病死貂的視診和病理剖檢，對病貂做出臨床診斷。將血液樣本進(jìn)行碘凝集試驗和對流免疫電泳試驗，完成該地區(qū)水貂阿留申病的檢測調(diào)查。結(jié)果顯示，威海某地區(qū)阿留申病的陽性檢出率為70%以上，表明威海地區(qū)水貂阿留申病的流行情況非常嚴(yán)重。

關(guān)鍵詞：水貂；阿留申??；診斷；調(diào)查

中圖分類號：S858.92 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A DOI編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2014.04.006

水貂阿留申病是由阿留申病毒引起的一種慢性病毒病，又被稱為漿細(xì)胞增多癥。該病毒屬細(xì)小病毒科 [1]，不同年齡階段的水貂患阿留申病可表現(xiàn)出不同的病癥，成年水貂感染ADV后，表現(xiàn)出典型的水貂阿留申病，以體內(nèi)漿細(xì)胞增多，產(chǎn)生大量的r球蛋白，持續(xù)性的毒血癥及由免疫復(fù)合物沉積引發(fā)的嚴(yán)重腎小球炎等為主要癥狀[2]。而新生幼貂感染該病后病毒大量繁殖于病貂體內(nèi)的肺泡II型細(xì)胞，臨床癥狀會出現(xiàn)急性致死性的間質(zhì)性肺炎。不同的急、慢病癥在有些水貂中的表現(xiàn)輕微或某些水貂感染ADV后不出現(xiàn)明顯感染癥狀的情況，也有相關(guān)報道[3] 。

水貂阿留申病在很多養(yǎng)貂國家廣泛流行，我國也是其中之一，它是對養(yǎng)貂業(yè)發(fā)展產(chǎn)生阻礙的主要傳染病之一[4]。自1946年發(fā)現(xiàn)阿留申病至今，國內(nèi)外時常會有該病的研究報道，從1982年開始，我國從美國引進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)黑貂，從那時起阿留申病就普遍存在于全國的各個貂場，在某些嚴(yán)重地區(qū)阿留申的感染率甚至達(dá)到80%[5]。由于該病為慢性傳染病，不能引起養(yǎng)殖戶的足夠重視，對水貂的檢疫力度不夠，對陽性貂沒有及時的淘汰，致使病毒通過體液和排泄物傳到體外，污染了貂場的環(huán)境，導(dǎo)致貂群整體的感染率逐年升高，從而引起該病大面積的流行。本病主要傳染源是病貂和潛伏期病貂。當(dāng)水貂飼養(yǎng)場從病貂場引進(jìn)潛伏帶毒的病貂時，常在引進(jìn)后第一年發(fā)病和死亡。在2～3年內(nèi)貂場中仍有該病緩慢流行，感染率可達(dá)25%～40%[6]。

該病會造成母貂空懷、流產(chǎn)、不發(fā)情、弱胎；公貂配種能力下降，精子活力降低，給養(yǎng)殖單位造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。據(jù)不完全統(tǒng)計，水貂阿留申病所造成的損失占水貂其他疾病總損失的50%以上[7]。目前對阿留申病還沒有根本上的治療藥物，只有通過檢測預(yù)防來控制阿留申病的傳播，筆者對威海地區(qū)的兩個貂場進(jìn)行了調(diào)查。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

水貂血液樣本2 000個（威海榮成某貂場）；病死貂數(shù)只（威海榮成某貂場）。

1.2 試驗儀器

外科剪、鑷子4套；離心管；塑料泡沫；一次性手套；培養(yǎng)皿若干；50～200 μL的微量移液器；高速離心機（上海安亭科學(xué)儀器廠TGL—16G）；滅菌的Tip槍頭若干；載玻片；DYY-6C型電泳儀（北京市六一儀器廠）；對流電泳槽；酒精燈；六聯(lián)電子調(diào)溫萬用電爐（龍口先科儀器公司）；膠頭滴管；燒杯；玻璃棒；打孔器。

1.3 主要試劑

酒精棉、碘酊棉；PBS緩沖液；碘試劑；巴比妥緩沖液；水貂阿留申病毒抗原和標(biāo)準(zhǔn)陽性血清（吉林特研生物技術(shù)有限責(zé)任公司）。

1.4 試驗方法

1.4.1 水貂阿留申病的臨床診斷

（1）病貂的臨床癥狀觀察

直接觀察病貂的精神狀態(tài)、營養(yǎng)狀況、姿態(tài)、步態(tài)，病貂被毛的光澤度，有無局部脫毛，皮膚顏色，排泄物的性狀；向養(yǎng)殖戶詢問病貂最近的飲食狀況，異常變化。

（2）病貂的剖檢變化

將病死貂尸體放在解剖盤內(nèi)，使其胸腔部充分暴露。用酒精消毒過的解剖打開病貂的腹腔，對腹腔內(nèi)的腸、肝臟、脾臟和腎臟逐一進(jìn)行檢查。

1.4.2 水貂的血清學(xué)檢測

（1）水貂血樣的采集

按文獻(xiàn)報道采集水貂血液[8]。在運輸水貂血樣的過程中，保證離心管不要有太大的晃動，使其處于靜置狀態(tài)，使血清自然分層。

（2）碘凝集試驗

取一個大的培養(yǎng)皿，用酒精棉球擦拭進(jìn)行消毒，然后干燥，取一張?zhí)镒指穹旁谂囵B(yǎng)皿下，向每一個方格內(nèi)加入一滴剛配置好的碘液，用移液管逐一吸取30 μL血清加入碘液中，用槍頭充分搖勻混合，1～2 min后判定試驗結(jié)果，對2 000個血樣的試驗結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計。

（3）對流免疫電泳試驗

①瓊脂凝膠板的制備。瓊脂糖粉1.0 g，溶解于剛制備好的100 mL巴比妥緩沖液中，加熱至瓊脂糖溶解完全，靜置一段時間，以便使溫度降低至60 ℃左右。然后將瓊脂糖溶液用膠頭滴管滴注在水平放置的干凈無油的載玻片上，瓊脂厚度約為3 mm。

②打孔。將凝膠板放在打孔模板上，每孔直徑為3 mm，孔間距為3 mm。將打好孔的凝膠板進(jìn)行封底，一般封底溫度在50 ℃左右。

③加樣。將被檢血清按照編號順序用移液管從左向右加入到正極端孔內(nèi)，負(fù)極端孔加入抗原，以加滿孔但不外溢為準(zhǔn)。每塊凝膠板均須設(shè)標(biāo)準(zhǔn)陰性和陽性血清作對照。

④電泳。將電泳槽兩側(cè)加入巴比妥緩沖液，接通電源開始電泳，調(diào)節(jié)電壓在90 V左右，電泳30～60 min，然后關(guān)閉電源，取出凝膠板，在陽光下或日光燈下，以黑色背景觀察沉淀線，進(jìn)行結(jié)果判定。

2 結(jié)果與分析

2.1 病貂的臨床癥狀觀察結(jié)果

觀察可見其精神高度沉郁，嗜睡，渴欲猛增，體溫高達(dá)41.7 ℃，抓捕時齒齦易出血，貧血，痙攣，步態(tài)蹣跚，共濟(jì)失調(diào)，病貂進(jìn)行性消瘦，生長滯緩，雙眼無神，被毛暗淡無光，排煤焦樣糞便。

2.2 病貂的剖檢變化結(jié)果

可見腸道內(nèi)有煤焦油樣糞便和腥味稀糞，腹腔內(nèi)有出血，腎臟體積增大至正常時的兩倍左右，呈淡黃色，有點狀出血，被膜容易剝離掉，表面出現(xiàn)黃白色小病灶；脾臟比正常時腫大約3倍，呈紅褐色，被膜緊張，富有彈性，邊緣銳利；肝臟腫大，表面顏色呈灰黃色。

2.3 碘凝集試驗結(jié)果

（1）碘凝集的試驗結(jié)果如下圖1所示。

結(jié)果判定依據(jù)：當(dāng)向血清中加入碘劑后，混合物還是透明的，呈碘液原來的本色時，判定為陰性（—）；當(dāng)析出的絮狀物量少且小的時候則判定為陽性（++和+）；當(dāng)混合物中析出大的暗褐色絮狀物時判定為強陽性（++++和+++）。

（2） 對A場的1 651只水貂的血清樣本進(jìn)行碘凝集試驗后，統(tǒng)計結(jié)果如表1。

由表1中可以看出，A場的不同舍的發(fā)病情況是不同的，其中6號舍的發(fā)病情況最為嚴(yán)重，+++以上的陽性貂占到該舍的31.2%；8號舍的發(fā)病情況是調(diào)查的5個舍中最輕的，但+++以上的陽性貂也占到了該舍的11.9%。通過該方法檢出+以上的陽性貂是1 067只，其陽性率為64.63%；+++以上的陽性貂是333只，其陽性率為20.17%，陰性貂為584只，陰性率為35.37%，由此可見，A場的阿留申病發(fā)病情況還是較為嚴(yán)重的。

對B家的513只水貂的血清樣本進(jìn)行碘凝集試驗后，統(tǒng)計結(jié)果如表2。

由表2可以看到，B家公貂總共101只，其中陽性公貂92只，占公貂總數(shù)的92%，陰性公貂占公貂總數(shù)的8.00%；母貂總共412只，其中陽性母貂360只，其陽性率為87.38%，+++以上的占母貂總數(shù)的39.57%，陰性母貂52只，占母貂總數(shù)的12.62%，由此可見，公貂感染阿留申病的比重要大于母貂，更容易感染阿留申??；B家總共有513只水貂，其中，+++以上陽性貂占到了41.91%，將近一半，說明了B家貂場阿留申病的感染情況要比A場更嚴(yán)重。由表3我們可以看到榮成該地區(qū)水貂阿留申的陽性率為71.24%。

2.4 對流免疫電泳驗證試驗結(jié)果

由于所采的血樣過多，我們只抽取兩貂場中的50個血樣進(jìn)行對流免疫電泳試驗，其中碘凝集試驗顯陽性的為20份，陰性為15。陽性個數(shù)為19份，陽性符合率為95%；陰性個數(shù)為14份， 陰性符合率為93.3%。結(jié)果證明，碘凝集試驗結(jié)果是準(zhǔn)確和可靠的。

3 討 論

3.1 水貂阿留申病的流行病學(xué)

該病對所有品系的水貂都能感染。它通過不同方式和途徑傳播，如病貂污染過的飼料、飲水、食具等。不同年齡和性別的水貂均可感染。本病具有明顯的季節(jié)性，在秋冬季節(jié)的發(fā)病率和死亡率大大增加，因為腎臟高度損害的病貂，會表現(xiàn)出渴欲增高，而在秋冬季節(jié)由于冰凍，其飲水常常得不到滿足，致使原來就衰竭的病貂，在這樣急劇惡劣的條件下，發(fā)生大批死亡，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院通過對國內(nèi)大、中型水貂養(yǎng)殖場進(jìn)行調(diào)查研究表明，國內(nèi)水貂養(yǎng)殖場水貂感染率為40%～70%[9]。本試驗的結(jié)果顯示榮成地區(qū)的感染率在70%左右，遠(yuǎn)高于國內(nèi)的平均水平，說明榮成地區(qū)阿留申的感染情況還是非常嚴(yán)重的。

3.2 碘凝集試驗與對流免疫試驗的優(yōu)缺點

1962年，Henson等[10]首先將該法應(yīng)用于對阿留申病毒的檢測，碘凝集試驗最大的優(yōu)點在于簡便易行，它所要求的試驗條件非常低，一般的水貂養(yǎng)殖戶都有能力完成這個試驗，而且具有依據(jù)它淘汰陽性帶病貂的能力，能夠達(dá)到控制蔓延和減少損失的目的，但缺點是檢測是非特異性的，有些同樣可以引起血清蛋白發(fā)生變化的疾病，如膿腫、結(jié)核、甚至感冒等病狀也均可造成檢測結(jié)果顯陽性，因而不能達(dá)到最終撲滅的目的。1972—1974年，Cho和Ingnam[11]首先在加拿大應(yīng)用對流免疫電泳檢測水貂阿留申病，而對流免疫試驗在診斷水貂阿留申病中不論是檢出率還是特異性和敏感性方面都要高于碘凝集試驗，陽性檢出率的準(zhǔn)確性甚至可以達(dá)到100%。缺點是要求的試驗條件較高，一般的養(yǎng)殖戶不能利用這個方法對水貂進(jìn)行檢測，所以在實際的生產(chǎn)應(yīng)用中不如碘凝集試驗普及。本試驗通過這兩種方法對榮成地區(qū)阿留申病的檢測結(jié)果是一致的，所以試驗結(jié)果是可靠準(zhǔn)確的。

3.3 關(guān)于阿留申病防治的討論

（1）首先應(yīng)該加強對飼養(yǎng)管理的重視程度，必須保證飼料的優(yōu)質(zhì)、新鮮和全價，這樣可以有效提高水貂自身的機體抵抗力，從根本上將水貂發(fā)病控制在較低水平。

（2）由于病貂的尿液、唾液和糞便都可能含有阿留申病毒，所以對獸場內(nèi)的用具、食具籠舍和地面都要定期進(jìn)行消毒。最有效的消毒方法是用噴燈火焰或蒸氣處理預(yù)先清掃過的籠舍表面。在化學(xué)藥物中應(yīng)用5%福爾馬林溶液消毒金屬結(jié)構(gòu)，用2%的鹼溶液或漂白粉處理獸場地面[12]。

（3）病貂和潛伏期帶病貂的病毒長期存在于病貂體內(nèi)，可以建立定期檢疫和淘汰陽性貂制度。可以每年檢疫2次，第一次在配種開始前，通常在1—2月間進(jìn)行；第二次在選留種期間，一般在9—10月間進(jìn)行。所以每年可通過本試驗的碘凝集試驗或?qū)α髅庖唠娪緝煞N診斷方法進(jìn)行檢疫，先檢查成年水貂，后檢查幼齡水貂，對幼齡水貂只有其雙親都是陰性反應(yīng)者方可留做種用。處殺陽性貂，逐年減少發(fā)病率，經(jīng)過3～5年時間，可以使貂場的陽性率控制在5%以內(nèi)[13]。

參考文獻(xiàn)：

[1] 吳清民.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2001：310-314.

[2] 徐鳳宇，王樹志.水貂阿留申病概述[J].經(jīng)濟(jì)動物學(xué)報，2006，10（2）：106-109.

[3] 黃永凱，周煜，孔德軍.水貂阿留申病[J].云南畜牧獸醫(yī)，2006（5）：41.

[4] 張麗華.貂阿留申病發(fā)病機理與防治[J].吉林畜牧獸醫(yī)，2011（8）：32.

[5] Ellis L C. 阿留申病的現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[M].董克舒，王立群，陳啟仁，等譯.北京：科學(xué)出版社，1993，16（4）：517.

[6] Basrur P K， Gray D P， Karstad L.Alentian disease（plasmacytosis） of mink. Propagation of virus in mink tissue culture[J]. Can J Comp Med vet Sci， 1963， 27（12）：301-306.

[7] 白文彬，于康震.動物傳染病診斷學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002：901-903.

[8] 李振榮，吳斌，胡傳偉，等.進(jìn)境水貂阿留申病關(guān)鍵檢疫技術(shù)的研究[J].中國科學(xué)研上海研究所，2000，15（6）：103.

[9] 畢世坤，薛強.水貂阿留申病的檢測技術(shù)總結(jié)[J].山東畜牧獸醫(yī)，2005（3）：42.

[10] Henson J B，Gorham J R，Leader R W，et al. Experimental hypergammaglobulinemia in mink[J]. Journal of experimental medicine， 1962， 116（3）：357-364.

[11] Cho H J， Ingram D G. Antigen and antibody in Aleutian disease in mink.The Reaction of Antibody with the aleutian disease agent using immunodiffusion and immunoelectroosmophoresis[J].Can J comp Med，1973，37（3）：217-223.

[12] 梁春彩.人工養(yǎng)殖水貂常見病及其防治[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2005（8）：13.

[13] 劉慶仁，李秀峰，宋旭春.水貂阿留申病的防治經(jīng)驗[J]北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1988，（14）：125.

2.3 碘凝集試驗結(jié)果

（1）碘凝集的試驗結(jié)果如下圖1所示。

結(jié)果判定依據(jù)：當(dāng)向血清中加入碘劑后，混合物還是透明的，呈碘液原來的本色時，判定為陰性（—）；當(dāng)析出的絮狀物量少且小的時候則判定為陽性（++和+）；當(dāng)混合物中析出大的暗褐色絮狀物時判定為強陽性（++++和+++）。

（2） 對A場的1 651只水貂的血清樣本進(jìn)行碘凝集試驗后，統(tǒng)計結(jié)果如表1。

由表1中可以看出，A場的不同舍的發(fā)病情況是不同的，其中6號舍的發(fā)病情況最為嚴(yán)重，+++以上的陽性貂占到該舍的31.2%；8號舍的發(fā)病情況是調(diào)查的5個舍中最輕的，但+++以上的陽性貂也占到了該舍的11.9%。通過該方法檢出+以上的陽性貂是1 067只，其陽性率為64.63%；+++以上的陽性貂是333只，其陽性率為20.17%，陰性貂為584只，陰性率為35.37%，由此可見，A場的阿留申病發(fā)病情況還是較為嚴(yán)重的。

對B家的513只水貂的血清樣本進(jìn)行碘凝集試驗后，統(tǒng)計結(jié)果如表2。

由表2可以看到，B家公貂總共101只，其中陽性公貂92只，占公貂總數(shù)的92%，陰性公貂占公貂總數(shù)的8.00%；母貂總共412只，其中陽性母貂360只，其陽性率為87.38%，+++以上的占母貂總數(shù)的39.57%，陰性母貂52只，占母貂總數(shù)的12.62%，由此可見，公貂感染阿留申病的比重要大于母貂，更容易感染阿留申?。籅家總共有513只水貂，其中，+++以上陽性貂占到了41.91%，將近一半，說明了B家貂場阿留申病的感染情況要比A場更嚴(yán)重。由表3我們可以看到榮成該地區(qū)水貂阿留申的陽性率為71.24%。

2.4 對流免疫電泳驗證試驗結(jié)果

由于所采的血樣過多，我們只抽取兩貂場中的50個血樣進(jìn)行對流免疫電泳試驗，其中碘凝集試驗顯陽性的為20份，陰性為15。陽性個數(shù)為19份，陽性符合率為95%；陰性個數(shù)為14份， 陰性符合率為93.3%。結(jié)果證明，碘凝集試驗結(jié)果是準(zhǔn)確和可靠的。

3 討 論

3.1 水貂阿留申病的流行病學(xué)

該病對所有品系的水貂都能感染。它通過不同方式和途徑傳播，如病貂污染過的飼料、飲水、食具等。不同年齡和性別的水貂均可感染。本病具有明顯的季節(jié)性，在秋冬季節(jié)的發(fā)病率和死亡率大大增加，因為腎臟高度損害的病貂，會表現(xiàn)出渴欲增高，而在秋冬季節(jié)由于冰凍，其飲水常常得不到滿足，致使原來就衰竭的病貂，在這樣急劇惡劣的條件下，發(fā)生大批死亡，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院通過對國內(nèi)大、中型水貂養(yǎng)殖場進(jìn)行調(diào)查研究表明，國內(nèi)水貂養(yǎng)殖場水貂感染率為40%～70%[9]。本試驗的結(jié)果顯示榮成地區(qū)的感染率在70%左右，遠(yuǎn)高于國內(nèi)的平均水平，說明榮成地區(qū)阿留申的感染情況還是非常嚴(yán)重的。

3.2 碘凝集試驗與對流免疫試驗的優(yōu)缺點

1962年，Henson等[10]首先將該法應(yīng)用于對阿留申病毒的檢測，碘凝集試驗最大的優(yōu)點在于簡便易行，它所要求的試驗條件非常低，一般的水貂養(yǎng)殖戶都有能力完成這個試驗，而且具有依據(jù)它淘汰陽性帶病貂的能力，能夠達(dá)到控制蔓延和減少損失的目的，但缺點是檢測是非特異性的，有些同樣可以引起血清蛋白發(fā)生變化的疾病，如膿腫、結(jié)核、甚至感冒等病狀也均可造成檢測結(jié)果顯陽性，因而不能達(dá)到最終撲滅的目的。1972—1974年，Cho和Ingnam[11]首先在加拿大應(yīng)用對流免疫電泳檢測水貂阿留申病，而對流免疫試驗在診斷水貂阿留申病中不論是檢出率還是特異性和敏感性方面都要高于碘凝集試驗，陽性檢出率的準(zhǔn)確性甚至可以達(dá)到100%。缺點是要求的試驗條件較高，一般的養(yǎng)殖戶不能利用這個方法對水貂進(jìn)行檢測，所以在實際的生產(chǎn)應(yīng)用中不如碘凝集試驗普及。本試驗通過這兩種方法對榮成地區(qū)阿留申病的檢測結(jié)果是一致的，所以試驗結(jié)果是可靠準(zhǔn)確的。

3.3 關(guān)于阿留申病防治的討論

（1）首先應(yīng)該加強對飼養(yǎng)管理的重視程度，必須保證飼料的優(yōu)質(zhì)、新鮮和全價，這樣可以有效提高水貂自身的機體抵抗力，從根本上將水貂發(fā)病控制在較低水平。

（2）由于病貂的尿液、唾液和糞便都可能含有阿留申病毒，所以對獸場內(nèi)的用具、食具籠舍和地面都要定期進(jìn)行消毒。最有效的消毒方法是用噴燈火焰或蒸氣處理預(yù)先清掃過的籠舍表面。在化學(xué)藥物中應(yīng)用5%福爾馬林溶液消毒金屬結(jié)構(gòu)，用2%的鹼溶液或漂白粉處理獸場地面[12]。

（3）病貂和潛伏期帶病貂的病毒長期存在于病貂體內(nèi)，可以建立定期檢疫和淘汰陽性貂制度。可以每年檢疫2次，第一次在配種開始前，通常在1—2月間進(jìn)行；第二次在選留種期間，一般在9—10月間進(jìn)行。所以每年可通過本試驗的碘凝集試驗或?qū)α髅庖唠娪緝煞N診斷方法進(jìn)行檢疫，先檢查成年水貂，后檢查幼齡水貂，對幼齡水貂只有其雙親都是陰性反應(yīng)者方可留做種用。處殺陽性貂，逐年減少發(fā)病率，經(jīng)過3～5年時間，可以使貂場的陽性率控制在5%以內(nèi)[13]。

參考文獻(xiàn)：

[1] 吳清民.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2001：310-314.

[2] 徐鳳宇，王樹志.水貂阿留申病概述[J].經(jīng)濟(jì)動物學(xué)報，2006，10（2）：106-109.

[3] 黃永凱，周煜，孔德軍.水貂阿留申病[J].云南畜牧獸醫(yī)，2006（5）：41.

[4] 張麗華.貂阿留申病發(fā)病機理與防治[J].吉林畜牧獸醫(yī)，2011（8）：32.

[5] Ellis L C. 阿留申病的現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[M].董克舒，王立群，陳啟仁，等譯.北京：科學(xué)出版社，1993，16（4）：517.

[6] Basrur P K， Gray D P， Karstad L.Alentian disease（plasmacytosis） of mink. Propagation of virus in mink tissue culture[J]. Can J Comp Med vet Sci， 1963， 27（12）：301-306.

[7] 白文彬，于康震.動物傳染病診斷學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002：901-903.

[8] 李振榮，吳斌，胡傳偉，等.進(jìn)境水貂阿留申病關(guān)鍵檢疫技術(shù)的研究[J].中國科學(xué)研上海研究所，2000，15（6）：103.

[9] 畢世坤，薛強.水貂阿留申病的檢測技術(shù)總結(jié)[J].山東畜牧獸醫(yī)，2005（3）：42.

[10] Henson J B，Gorham J R，Leader R W，et al. Experimental hypergammaglobulinemia in mink[J]. Journal of experimental medicine， 1962， 116（3）：357-364.

[11] Cho H J， Ingram D G. Antigen and antibody in Aleutian disease in mink.The Reaction of Antibody with the aleutian disease agent using immunodiffusion and immunoelectroosmophoresis[J].Can J comp Med，1973，37（3）：217-223.

[12] 梁春彩.人工養(yǎng)殖水貂常見病及其防治[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2005（8）：13.

[13] 劉慶仁，李秀峰，宋旭春.水貂阿留申病的防治經(jīng)驗[J]北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1988，（14）：125.

2.3 碘凝集試驗結(jié)果

（1）碘凝集的試驗結(jié)果如下圖1所示。

結(jié)果判定依據(jù)：當(dāng)向血清中加入碘劑后，混合物還是透明的，呈碘液原來的本色時，判定為陰性（—）；當(dāng)析出的絮狀物量少且小的時候則判定為陽性（++和+）；當(dāng)混合物中析出大的暗褐色絮狀物時判定為強陽性（++++和+++）。

（2） 對A場的1 651只水貂的血清樣本進(jìn)行碘凝集試驗后，統(tǒng)計結(jié)果如表1。

由表1中可以看出，A場的不同舍的發(fā)病情況是不同的，其中6號舍的發(fā)病情況最為嚴(yán)重，+++以上的陽性貂占到該舍的31.2%；8號舍的發(fā)病情況是調(diào)查的5個舍中最輕的，但+++以上的陽性貂也占到了該舍的11.9%。通過該方法檢出+以上的陽性貂是1 067只，其陽性率為64.63%；+++以上的陽性貂是333只，其陽性率為20.17%，陰性貂為584只，陰性率為35.37%，由此可見，A場的阿留申病發(fā)病情況還是較為嚴(yán)重的。

對B家的513只水貂的血清樣本進(jìn)行碘凝集試驗后，統(tǒng)計結(jié)果如表2。

由表2可以看到，B家公貂總共101只，其中陽性公貂92只，占公貂總數(shù)的92%，陰性公貂占公貂總數(shù)的8.00%；母貂總共412只，其中陽性母貂360只，其陽性率為87.38%，+++以上的占母貂總數(shù)的39.57%，陰性母貂52只，占母貂總數(shù)的12.62%，由此可見，公貂感染阿留申病的比重要大于母貂，更容易感染阿留申??；B家總共有513只水貂，其中，+++以上陽性貂占到了41.91%，將近一半，說明了B家貂場阿留申病的感染情況要比A場更嚴(yán)重。由表3我們可以看到榮成該地區(qū)水貂阿留申的陽性率為71.24%。

2.4 對流免疫電泳驗證試驗結(jié)果

由于所采的血樣過多，我們只抽取兩貂場中的50個血樣進(jìn)行對流免疫電泳試驗，其中碘凝集試驗顯陽性的為20份，陰性為15。陽性個數(shù)為19份，陽性符合率為95%；陰性個數(shù)為14份， 陰性符合率為93.3%。結(jié)果證明，碘凝集試驗結(jié)果是準(zhǔn)確和可靠的。

3 討 論

3.1 水貂阿留申病的流行病學(xué)

該病對所有品系的水貂都能感染。它通過不同方式和途徑傳播，如病貂污染過的飼料、飲水、食具等。不同年齡和性別的水貂均可感染。本病具有明顯的季節(jié)性，在秋冬季節(jié)的發(fā)病率和死亡率大大增加，因為腎臟高度損害的病貂，會表現(xiàn)出渴欲增高，而在秋冬季節(jié)由于冰凍，其飲水常常得不到滿足，致使原來就衰竭的病貂，在這樣急劇惡劣的條件下，發(fā)生大批死亡，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院通過對國內(nèi)大、中型水貂養(yǎng)殖場進(jìn)行調(diào)查研究表明，國內(nèi)水貂養(yǎng)殖場水貂感染率為40%～70%[9]。本試驗的結(jié)果顯示榮成地區(qū)的感染率在70%左右，遠(yuǎn)高于國內(nèi)的平均水平，說明榮成地區(qū)阿留申的感染情況還是非常嚴(yán)重的。

3.2 碘凝集試驗與對流免疫試驗的優(yōu)缺點

1962年，Henson等[10]首先將該法應(yīng)用于對阿留申病毒的檢測，碘凝集試驗最大的優(yōu)點在于簡便易行，它所要求的試驗條件非常低，一般的水貂養(yǎng)殖戶都有能力完成這個試驗，而且具有依據(jù)它淘汰陽性帶病貂的能力，能夠達(dá)到控制蔓延和減少損失的目的，但缺點是檢測是非特異性的，有些同樣可以引起血清蛋白發(fā)生變化的疾病，如膿腫、結(jié)核、甚至感冒等病狀也均可造成檢測結(jié)果顯陽性，因而不能達(dá)到最終撲滅的目的。1972—1974年，Cho和Ingnam[11]首先在加拿大應(yīng)用對流免疫電泳檢測水貂阿留申病，而對流免疫試驗在診斷水貂阿留申病中不論是檢出率還是特異性和敏感性方面都要高于碘凝集試驗，陽性檢出率的準(zhǔn)確性甚至可以達(dá)到100%。缺點是要求的試驗條件較高，一般的養(yǎng)殖戶不能利用這個方法對水貂進(jìn)行檢測，所以在實際的生產(chǎn)應(yīng)用中不如碘凝集試驗普及。本試驗通過這兩種方法對榮成地區(qū)阿留申病的檢測結(jié)果是一致的，所以試驗結(jié)果是可靠準(zhǔn)確的。

3.3 關(guān)于阿留申病防治的討論

（1）首先應(yīng)該加強對飼養(yǎng)管理的重視程度，必須保證飼料的優(yōu)質(zhì)、新鮮和全價，這樣可以有效提高水貂自身的機體抵抗力，從根本上將水貂發(fā)病控制在較低水平。

（2）由于病貂的尿液、唾液和糞便都可能含有阿留申病毒，所以對獸場內(nèi)的用具、食具籠舍和地面都要定期進(jìn)行消毒。最有效的消毒方法是用噴燈火焰或蒸氣處理預(yù)先清掃過的籠舍表面。在化學(xué)藥物中應(yīng)用5%福爾馬林溶液消毒金屬結(jié)構(gòu)，用2%的鹼溶液或漂白粉處理獸場地面[12]。

（3）病貂和潛伏期帶病貂的病毒長期存在于病貂體內(nèi)，可以建立定期檢疫和淘汰陽性貂制度。可以每年檢疫2次，第一次在配種開始前，通常在1—2月間進(jìn)行；第二次在選留種期間，一般在9—10月間進(jìn)行。所以每年可通過本試驗的碘凝集試驗或?qū)α髅庖唠娪緝煞N診斷方法進(jìn)行檢疫，先檢查成年水貂，后檢查幼齡水貂，對幼齡水貂只有其雙親都是陰性反應(yīng)者方可留做種用。處殺陽性貂，逐年減少發(fā)病率，經(jīng)過3～5年時間，可以使貂場的陽性率控制在5%以內(nèi)[13]。

參考文獻(xiàn)：

[1] 吳清民.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2001：310-314.

[2] 徐鳳宇，王樹志.水貂阿留申病概述[J].經(jīng)濟(jì)動物學(xué)報，2006，10（2）：106-109.

[3] 黃永凱，周煜，孔德軍.水貂阿留申病[J].云南畜牧獸醫(yī)，2006（5）：41.

[4] 張麗華.貂阿留申病發(fā)病機理與防治[J].吉林畜牧獸醫(yī)，2011（8）：32.

[5] Ellis L C. 阿留申病的現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢[M].董克舒，王立群，陳啟仁，等譯.北京：科學(xué)出版社，1993，16（4）：517.

[6] Basrur P K， Gray D P， Karstad L.Alentian disease（plasmacytosis） of mink. Propagation of virus in mink tissue culture[J]. Can J Comp Med vet Sci， 1963， 27（12）：301-306.

[7] 白文彬，于康震.動物傳染病診斷學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002：901-903.

[8] 李振榮，吳斌，胡傳偉，等.進(jìn)境水貂阿留申病關(guān)鍵檢疫技術(shù)的研究[J].中國科學(xué)研上海研究所，2000，15（6）：103.

[9] 畢世坤，薛強.水貂阿留申病的檢測技術(shù)總結(jié)[J].山東畜牧獸醫(yī)，2005（3）：42.

[10] Henson J B，Gorham J R，Leader R W，et al. Experimental hypergammaglobulinemia in mink[J]. Journal of experimental medicine， 1962， 116（3）：357-364.

[11] Cho H J， Ingram D G. Antigen and antibody in Aleutian disease in mink.The Reaction of Antibody with the aleutian disease agent using immunodiffusion and immunoelectroosmophoresis[J].Can J comp Med，1973，37（3）：217-223.

[12] 梁春彩.人工養(yǎng)殖水貂常見病及其防治[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2005（8）：13.

[13] 劉慶仁，李秀峰，宋旭春.水貂阿留申病的防治經(jīng)驗[J]北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1988，（14）：125.