嬰幼兒腹瀉病原菌分布特點及藥敏分析

薛愛國 李海燕 宋冬 丁偉

嬰幼兒腹瀉病原菌分布特點及藥敏分析

薛愛國 李海燕 宋冬 丁偉

目的研究青島市2013年兒童感染性腹瀉的病原菌的分布、流行病學特征及對抗菌藥物的敏感情況, 為臨床預防以及合理用藥提供參考依據。方法對2013年1月～2013年12月臨床初步診斷為感染性腹瀉患兒的新鮮糞便標本進行細菌分離培養和血清分型鑒定, 采用紙片擴散法進行藥敏試驗, 并以免疫層析雙抗體夾心法定性檢測A群輪狀病毒抗原。結果526份糞便培養共檢出病原菌6種80株, 檢出率為15.2%(80/526)。檢出沙門菌38株(47.5%), 志賀菌8株(10.0%), 致瀉性大腸桿菌8株(10.0%), 金黃色葡萄球菌4株(5.0%), 銅綠假單胞菌19株(23.7%), 白假絲酵母菌3株(3.75%)。8株志賀菌7株為福氏志賀菌, 1株鮑氏志賀菌。沙門菌和志賀菌的耐藥率分別為氨芐西林(68.7%、76.9%)、復方新諾明(21.1%、38.5%)、環丙沙星(15.8%、15.4%)、頭孢曲松(6.25%、15.3%)。526份標本中A群輪狀病毒陽性107份。結論2013年青島市兒童細菌性腹瀉的病原菌以沙門菌為主, 易感人群以2歲以下嬰幼兒為主；而金黃色葡萄球菌感染以1歲以下嬰兒為主；銅綠假單胞菌和白假絲酵母菌引起的腹瀉主要是由于長期應用廣譜抗生素使腸道菌群失調所導致；A群輪狀病毒是引起嬰幼兒秋冬季腹瀉的主要病原。應規范臨床用藥, 加強細菌耐藥監測。

兒童；感染性腹瀉；病原學；耐藥性；輪狀病毒

兒童感染性腹瀉是嬰幼兒時期的常見病, 主要是由于嬰幼兒時期消化系統發育還不完善, 并且機體的防御功能較差,該病對兒童的健康危害嚴重, 治療不及時或不恰當可導致死亡, 故加強對其的防治具有重要意義。為明確青島市兒童感染性腹瀉的病原學分布特點及耐藥性情況, 本研究對2013年青島兒童醫院腸道門診就診的急性感染性腹瀉患兒糞便標本的細菌培養和藥敏結果進行分析, 以期為臨床的預防治療提供依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 采集2013年1月～2013年12月本院腸道門診中糞便常規鏡檢顯示WBC≥10/HPF、RBC≥0/HPF, 臨床初步診斷為急性腹瀉病患兒的新鮮糞便標本526份, 置Carry-Blair運送培養基, 立即做細菌培養, 檢測沙門菌、志賀菌、致瀉性大腸桿菌和金黃色葡萄球菌等；同時做快速A群輪狀病毒(RV)抗原檢測。

1.2試劑來源 菌株鑒定使用法國梅里埃API鑒定試條；沙門菌、志賀菌、致瀉性大腸桿菌診斷血清由寧波天潤生物藥業有限公司提供；藥敏紙片使用英國Oxoid公司產品, 藥敏培養基使用英國Oxoid生產的MH瓊脂；標準菌株大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923作為質控菌株,由衛生部檢驗中心提供。A群RV抗原檢測試劑盒由北京萬泰生物藥業股份有限公司提供。

1.3細菌分離鑒定及藥敏試驗 細菌培養按《全國臨床檢驗操作規程》操作。糞便標本分別接種于血平板、麥康凱(MAC) 、SS平板(沙門菌和志賀菌瓊脂平板)、35℃培養18～24 h后觀察, 可疑菌落接種克氏雙糖鐵瓊脂(KIA), 35℃培養過夜后, 進一步做血清分型鑒定。藥敏試驗使用紙片擴散法, 結果按臨床實驗室標準化委員會(CLSI)制訂的標準進行判斷。

1.4A群RV抗原檢測 采用免疫層析雙抗體夾心法(膠體金法)快速定性檢測。

2 結果

2.1病原菌檢出率及構成 526份糞便培養標本共檢出病原菌6種80株, 檢出率15.2%(80/526)。病原菌檢出率及構成比見表1。

表180株腹瀉病原菌檢出率及構成比

2.238株沙門菌陽性檢出率 檢出非傷寒沙門菌O4群18株, 占沙門菌檢出總株數的47.3%；沙門菌O9群17株, 占44.7%；O7群、O8群、O12群各1株, 占2.6%。

2.38株志賀菌陽性檢出率 檢出B群(福氏志賀菌)7株,鮑氏志賀菌1株。

2.4藥敏結果 沙門菌和志賀菌的藥敏結果見表2。

表2沙門菌和志賀菌的藥敏情況

2.5A群RV感染 在526份臨床初步診斷為感染性腹瀉病患兒的糞便標本中, A群RV抗原檢測陽性107份, 占20.3%。細菌培養陽性者另有銅綠假單胞菌19株, 金黃色葡萄球菌4株, 白假絲酵母菌3株。

3 討論

小兒腹瀉是一組由多病原、多因素引起的, 以腹瀉為主要癥狀的疾病, 是嬰幼兒時期的常見病。據文獻報道, 每年至少350萬5歲以下兒童因腹瀉而死亡, 其中細菌性痢疾60萬人［1］。本組調查中, 526份糞便標本檢出病原菌6種80株,檢出率為15.2%(80/526)。其中80株病原菌中, 非傷寒沙門菌38株, 占總陽性菌株的47.5%, 其中沙門菌O4群鼠傷寒沙門菌檢出率最高, 共18株, 占沙門菌的47.4%。O9群共檢出17株, 占沙門菌的44.7%, 另外還檢出O7、O8和O12群3株非傷寒沙門菌, 提示2013年青島市嬰幼兒細菌性腹瀉以沙門菌為主要病原菌, 其中以非傷寒沙門菌O4群鼠傷寒沙門菌為主要流行株。這一結果與近年來報道的非傷寒沙門菌的發病率有逐年上升趨勢, 引起人類沙門菌感染的菌種亦逐年增多一致［2］。鼠傷寒沙門菌引起的小兒腹瀉是小兒沙門菌感染中最常見者, 全年均有發生, 以6～9月發病率最高。絕大多數患兒為2歲以下的嬰幼兒, ＜1歲者占1/2～1/3, 自然疫源廣泛, 常由被污染的水, 牛奶和食物經口感染。本研究中志賀菌檢出8株, 占總陽性菌株的1.52%, 其中痢疾志賀菌未檢出, 福氏志賀菌檢出7株, 鮑氏志賀菌1株。本組調查提示2013年青島市細菌性腹瀉中沙門菌的感染占絕對優勢,而由志賀菌感染引起的腹瀉較少見。福氏志賀菌共檢出7株,而鮑氏志賀菌只有1株, 這與國內其他城市的報道不一致［3,4］。福氏志賀菌群侵襲力強, 對抗生素易產生耐藥性, 流行菌型的不斷變遷是腹瀉病難以控制的原因之一, 菌型的變化趨勢及規律值得關注。

本研究顯示A群RV抗原檢測陽性107份(107/526), A群輪狀病毒是秋冬季小兒腹瀉最常見的病原。本病多見于6～24個月的嬰幼兒, ＞4歲者少見, 起病急, 常伴有發熱和上呼吸道感染癥狀, 一般無明顯中毒癥狀。患兒大便次數增多,大便呈水樣或蛋花樣, 無腥臭味。與細菌性腹瀉癥狀明顯不同。可作為臨床鑒別診斷的依據。病毒致瀉和細菌致瀉的治療方案也有所不同, 因此查明病原尤為重要, 這同時也提示大便常規檢查已不能滿足病原學變遷趨勢的需求, 本院臨床上近幾年除明顯的水樣便和蛋花樣便外, 其余含水分較多的黏液便或膿血便標本, 也已開始同時檢測A群RV抗原, 特別是在RV流行季節已將RV抗原作為常規檢查項目。

另外, 本研究中報道有銅綠假單胞菌19株, 金黃色葡萄球菌4株, 白假絲酵母菌3株。

此類患兒的腹瀉多是由于長期應用廣譜抗生素, 導致的腸道菌群失調, 使腸道內耐藥的金黃色葡萄球菌, 綠膿桿菌,變形桿菌以及白色念珠菌等大量繁殖引起腸炎。停用抗生素后可很快痊愈。

由于抗菌藥物的使用日益增多, 細菌耐藥已成為世界性問題, 對人體健康的威脅越來越嚴重。沙門菌是公認的食源性疾病最常見的細菌, 食物是沙門菌的傳染源［5］。本組的藥敏結果表明, 志賀菌屬對氨芐西林、復方新諾明的耐藥率較高, 對頭孢三代和亞胺培南, 哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率低。沙門菌對氨芐西林、復方新諾明、頭孢三代和喹諾酮類藥的耐藥率均明顯低于志賀菌屬, 這與國外報道相同［6］,對亞胺培南, 厄他培南和哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率為0。目前認為志賀菌與沙門菌的耐藥性主要是由耐藥質粒所控制, 質粒介導耐藥性使耐藥菌株迅速擴散蔓延［7］, 導致對其防治困難, 因此細菌的高耐藥率亟待解決。及時監測病原菌、遏制盲目濫用抗生素、加強用藥的嚴謹性和科學性, 無疑是減少細菌多重耐藥的方法。

［1］ Woodward DL, Rodgers BFG, PhD.Surveillance of antimicrobial resistance in salmonella, shigella and Vibrio cholerae in Latin America and the Caribbean: A collaborative project.Can J Infect D is, 2000, 11(4):181-186.

［2］ Su LH, Chiu CH.Salmonella: clinical importance and evolution of nomenclature.Chang Gung Med J, 2007, 30(3):210-219.

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Distribution characteristics of pathogens associated with infectious diarrhea in children from Qingdao district in 2012 and its sensitivity analysis

XUE Ai-guo, LI Hai-yan, SONG Dong, et al.
Department of Clinical Laboratory, Qingdao Women and Children Hospital, Qingdao 266012, China

ObjectiveTo investigate the distribution of pathogens causing infectious diarrhea in children from Qingdao district in 2013 and analyze epidemiological characteristics and corresponding drugsensitivity, in order to guide clinical prevention and treatment.MethodsPathogens were isolated and identified from fresh faeces of children preliminarily diagnosed with infectious diarrhea from January 2013 to December 2013.Drug-sensitivity testing was performed using paper disc diffusion method, and rotaviruses of A group were identified qualitatively with double antibody sandwich method to detect viral antigen.Results80 strains of pathogens belonging to six species were isolated from 526 samples of faeces with the detection rate of 15.2% (80／526), including 38 strains of Salmonella (47.5%), 8 strains of Shigella (10.0%), 8 strains of diarrheogenic Escherichia coli (10.0%), 4 strains of Staphylococcus aureus (5.0%), 19 strains of Pseudomonas aeruginosa (23.7%) and 3 strains of Candidid albicans (3.75%).7 strains of Shigella belonged to S.flexneri, 1 strain of Shigella belonged to S.boydii.Drug-sensitivity testing showed that for Salmonella and Shigella, the rates of drug resistance are as follows, to ampicillin, 60.5% and 87.5%, to SMZ-TMP, 21.1% and 37.5%, to Ciprofloxacin, 15.8% and 25%, to Ceftriaxone, 21.1% and 25%, respectively.A total of 107 samples were positive for rotavirus of group A.ConclusionThe main pathogens causing bacterial diarrhea in children from Qingdao distrinct in 2012 are Shigella, mainly infecting infants below two years old, while Staphylococcus aureus prefer to infect infants below one year old.And bacterial diarrhea caused by Pseudomonas aeruginosa and Candidid albicans are induced mostly by enteric dysbacteriosis owing to long-term use of broad-spectrum antibiotics.Rotavirus of group A is the most common pathogen causing diarrhea of infants in autumn and winter.Therefore, clinical usage of antibotics should be regulated towards standardization and drug resistance should be monitored regularly.

Children; Infectious diarrhea; Pathogens; Drug-resistance; Rotavirus

266012 青島市婦女兒童醫院檢驗科(薛愛國 丁偉),呼吸科( 李海燕), 中心注射室(宋冬)

丁偉