石墨爐原子吸收光譜法測定福沙吡坦中痕量鈀

顏琳琦，李櫻紅，郭旺明

(1. 浙江省食品藥品檢驗研究院，浙江 杭州 310004; 2. 杭州九源基因工程有限公司，浙江 杭州 310018)

福沙吡坦主要聯用其他止吐藥靜脈注射，用于防治中等劑量致吐和大劑量致吐的抗腫瘤藥化學治療初始和反復用藥引起的急性和延遲的惡心和嘔吐。福沙吡坦的合成路線中，用到了作為催化劑的鈀，若藥物殘留的鈀含量過高，會對心、肝、腎造成損害，并產生溶血。因此，需對原料藥中的鈀殘留量進行控制，但目前尚未見測定福沙吡坦中鈀殘留量的文獻報道。根據EMEA/CHMP頒布的金屬催化劑或金屬試劑殘留量限度規定的指導文件，鈀的允許日接觸量(PDE)靜脈暴露量為1 μg/d[1]，而福沙吡坦每日最大允許劑量為150 mg/d，按最大劑量折算原料藥中鈀的殘留量限度約為6.67 μg/g。現參照采用原子分光光度法測定藥物中微量金屬含量的文獻[2-3]，建立了石墨爐原子吸收分光光度法測定福沙吡坦中痕量鈀的方法。報道如下。

1 儀器與試藥

AA800 型原子吸收光譜儀(美國PE 公司);MARS 微波消解儀(美國CEM 公司)。鈀標準溶液(Merck 公司，批號為HC098974，含量1 000 mg/L);福沙吡坦樣品[杭州九源基因工程有限公司，批號為20110301(粗品)，20110301(除鈀工藝1)，20110301(除鈀工藝2)，20110401];硝酸(BV-Ⅲ級，北京化學試劑研究所);30%過氧化氫為分析純，水為超純水。

2 方法與結果

2.1 光譜條件

元素:鈀;測定模式:吸收-背景;背景矯正:塞曼效應;瞬間信號類型:峰面積;波長:247.6 nm;狹縫寬度:0.7 nm;進樣體積:20 μL。石墨爐參數見表1。

2.2 樣品制備方法

取供試品約0.15 g，精密稱定，置聚四氟乙烯罐中，加入硝酸6 mL、30%過氧化氫1 mL，于微波消解儀中消化，消解完全后置電熱板上加熱去酸，近干后，用1%HNO3洗入20 mL 容量瓶中。同時做試劑空白。

表1 石墨爐程序

2.3 方法學考察

工作曲線繪制:取1 000 mg/L 的鈀標準溶液，用1%硝酸溶液稀釋成50 μg/L 的標準溶液。在選定的光譜條件下，由儀器自動稀釋成5.0，10.0，20.0，30.0，40.0，50.0 μg/L 的系列質量濃度標準溶液，以吸光度(A)為縱坐標、質量濃度(C)為橫坐標繪制工作曲線，回歸方程為A=0.002 48 C-0.000 47，r=0.999 9(n=6)。結果表明，鈀質量濃度在5 ～50 μg/L 范圍內與吸光度線性關系良好。

檢出限測定:取空白溶液，按設定方法連續測定11 次，計算吸光度的標準偏差(SD)，再利用工作曲線測得的斜率(b)，檢出限(LOD)=3 SD / b，得鈀的檢出限為1.68 μg /L。當取樣量為0.15 g、最終定容體積為20mL 時，樣品的最低檢出濃度為0.22 μg/g，可滿足法規的要求。

重復性試驗:取批號為20110401 的樣品5 份，按2.2 項下方法處理，進樣測定。結果鈀平均殘留量為1.98 μg/g，RSD=2.52%(n=5)，表明方法重復性良好。

穩定性試驗:取同一份供試品溶液，室溫放置0，2，4，6，8，10 h，分別測定吸光度。結果吸光度的RSD=2.16%(n=6)，表明供試品溶液在10 h 內穩定性良好，可滿足實際測定要求。

回收率試驗:稱取樣品(批號為20110401)9 份，各約0.15g，精密稱定，置聚四氟乙烯罐中，分成3 組，每組分別精密加入鈀標準貯備溶液(1 000 μg/L)0.1，0.3，0.6 mL，按2.2 項下方法處理，同時做試劑空白。分別進樣測定，按上述工作曲線計算回收率。結果見表2。

2.4 樣品測定

取4 批樣品，依法測定。結果見表3。

3 討論

文中建立的方法比火焰原子吸收方法測定鈀殘留量，提高了檢測靈敏度，減少了取樣量[2]。同時，采用微波消解前處理方法，塞曼效應扣背景有利于減少測定中的基質效應。該方法樣品取樣量較小，這對貴重原料藥中鈀殘留量的測定提供了參考。將建立的方法應用于除鈀工藝的驗證，從樣品測定結果看，福沙吡坦樣品采用除鈀工藝2 后，鈀殘留量明顯下降。在實際生產過程中，為減少鈀的殘留量，有必要采用除鈀工藝2，以降低成品中的鈀含量。

表2 鈀加樣回收試驗結果(n=9)

表3 樣品含量測定結果

[1] European Uedicines Agency. Guideline on the specification limits for residues of metal catalysts or metal reagents [EB/OL]. [2008-02-21].http:/ /www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/Scientific_guideline/2009 /09 /WC500003586.pdf.

[2] 韓繼勇，李聚江，陳祥峰. 火焰原子吸收分光光度法測定加替環素中的痕量鈀[J]. 華西藥學雜志，2011，26(6):602 -603.

[3] 陳 超，俞 輝. 石墨爐原子吸收法測定鹽酸伐昔洛韋中鈀的殘留量[J]. 中國現代應用藥學，2011，28(3):260 -262.