寧心寶膠囊的X 射線衍射Fourier 指紋圖譜分析

柳江紅，劉巖峰，張 鑫

(1. 河北省張家口市第一醫院，河北 張家口 075000; 2. 河北省張家口陽原縣醫院，河北 張家口 075000)

寧心寶膠囊為從新鮮冬蟲夏草中分離得到的麥角菌科真菌頭孢Cephalospovium sinensis Chen.Sp.nov. 經液體發酵后得到的菌絲體干燥粉末制成的膠囊，是一種抗心律失常的中成藥，商品名為安可新。該藥適用于老年器質性心臟病合并心律失常患者，尤其是伴有竇性心動過緩或(和)傳導阻滯的室上性心律失常患者，具有一定的臨床優勢。但以往多對寧心寶膠囊臨床療效及作用機制研究，對其藥物成分的研究甚少。本研究中采用X 射線衍射Fourier 指紋圖譜法分析寧心寶膠囊的主要成分，并提供圖譜與數值化的信息。為確證寧心寶主要成分，筆者以天然冬蟲夏草和金水寶膠囊作為對照[1-2]，結果寧心寶膠囊的主成分與金水寶一致，局部差異源于工藝條件的不同。

1 儀器與試藥

日本理光(Rigaku)D/max-2550 型粉末X 射線衍射儀。寧心寶膠囊(沈陽東新藥業有限公司，國藥準字Z21021024，批號為080401 -001)、百令膠囊(杭州中美華東制藥有限公司，國藥準字Z10910036，批號為120239)、金水寶膠囊(江西金水寶制藥有限公司，國藥準字Z10890003，批號為130339)。

2 方法和結果

2.1 試驗條件

CuKα 輻射，石墨單色器，40 kV，250 mA，2 θ 掃描范圍3°～60°，掃描速度每分鐘8°，步長0.02°，發散狹縫1.0°，接受狹縫0.30 mm，防散射狹縫1°。

2.2 方法

隨機抽取上述3 個樣品6 粒，除去膠囊，倒入瑪瑙研缽，經研磨過100 目篩得粉末樣品，稱取3 組100 mg 樣品進行平行衍射試驗。獲得寧心寶膠囊樣品的X 射線衍射圖譜。相關衍射信息見表1。

采用粉末X 射線衍射法獲取寧心寶膠囊的微觀衍射圖譜。應用光學衍射中的Fourier 變換原理，可將傳統的宏觀性狀顯微鑒別所得的真實空間中的樣品結構信息，轉換為在衍射空間再現的對應于樣品所含全體組分的衍射圖像。依據衍射圖像幾何拓撲(形狀)異同和衍射峰值(d/ I/ I0)的一致性，來確定其相同或不同，達到鑒定目的。因為本研究的物質為中藥，屬多組分復雜體系，而且由于產地、物候、光照、工藝等條件的差異，在同一種中藥中所含組分的含量存在相對變化。這是復雜體系有別于簡單物質(如單一化學成分)的重要差別。在微觀衍射圖像上就表現為圖形拓撲形狀的異同，故以圖形拓撲的異同作為一種定性分類的方法，同時對比衍射峰值的異同實現數值化鑒定目的。衍射試驗數據以晶面間距d(A)與衍射峰相對強度(I/ I0)表示，并記為d/ I/ I0。X 衍射Fourier 指紋圖譜是由衍射圖形的拓撲形狀與諸衍射峰值構成。

2.3 結果

寧心寶、百令膠囊與金水寶膠囊的衍射圖形拓撲是一致的(圖1)，衍射特征峰間的符合度Σ 高(表1)。由此確認三者為含有共同主成分的物質。本方法可應用于中藥材和中成藥的鑒定，它將把延續千年的宏觀性狀顯微的定性鑒定方法轉換為在微觀衍射圖像中，以圖形、數值重現其整體結構之異同，從而實現了復雜體系的微觀鑒定。結果表明，寧心寶膠囊與金水寶膠囊均是以CS-4 發酵蟲草粉為原料的制劑，二者的主成分一致。表1 中所列的3 個樣品的衍射特征峰符合度Σ(即每種成分的特征峰加和)高于0.82。

表1 3 種樣品衍射信息表

3 討論

目前我國中藥產地眾多，導致了藥物成分的不穩定性，從而影響其臨床療效。此外，蟲草中含有的蟲草素具有抗菌、抗腫瘤和調節免疫力等作用，具有很大的開發價值，因其價格昂貴，故目前市場偽品層出不窮。中藥品種的真偽鑒別是確保中藥制劑質量和臨床用藥安全的基礎，由于中藥材及中藥成分復雜，一般的理化法不能準確地加以鑒別。X 射線衍射分析是研究物質微觀成分結構的一種有效手段，不僅可用于植物、動物、礦物類中藥的鑒定，還可用于菌類中藥和中藥復方的鑒定，為中藥的鑒定提供了準確、有效、快速的鑒別方法，并為臨床用藥提供了安全保障[3]。

圖1 X 射線衍射圖

本研究結果表明，X 射線衍射Fourier 指紋圖譜法可用于復雜體系的識別與鑒定。中藥及其制劑是一種源遠流長的民族瑰寶，由于其成分復雜，并受自然環境的影響出現了許多組分的含量變化，形成具有自身特色的成千上萬個種類。如源自礦物的中藥材會因地球內部在不同區域中具備不同的地質條件，而造成不同礦區的同一種礦物其組分存在差異。這些來自無機物世界的物質，大多數仍屬于由有限組分混合而成的一個不太復雜的體系。X射線粉末衍射分析從上世紀初，便以礦物質成分分析作為一個重要的研究探索領域，在此基礎上，形成了X 射線晶體學中的物相分析，并且延用了簡單物質體系的還原歸一方式，去找出全部組分，形成了認識物質世界的還原論思維方式。然而，當認識源于動植物生命世界中的個體時，面對一個個復雜體系不可能用還原論方式一一剖析，因為它們曾經是生命體系，有別于單一物質，是由幾十、上百種成分在大自然的環境中，隨光照、物候、地域等變化，歷經千萬年的漫長歲月而形成的一種組分復雜、變化各異的復雜體系。中藥中的動植物藥是其中的典型物質，因此在弘揚傳統藥學的認知上，應該從物種的形成去認識其組成，因此在發展創新祖國藥學中，要立足于物質屬性，而不能去“拆零還原”，因為這是絕對不可能做到的事情。本研究所用的衍射Fourier 指紋圖譜法，借鑒了光學衍射原理，立足于復雜體系的認知特點，應用衍射圖形的拓撲相等觀念，將有序與無序、穩定與漲落等概念從簡單物質進入到復雜體系的整體結構研究中，期望能得到解析中藥及其制劑結構中的量與形的模糊識別，最終得到一個通用的分析鑒定方法，形成中藥材及其制劑的標準物質數據庫，建立中藥制劑的計算機輔助設計系統。

綜上所述，X 射線衍射分析技術在新藥及制藥研究中有著廣闊的應用前景，是一種現代物理分析技術，可幫助人類認識和了解未知微觀世界物質存在的形式與狀態，并給出定性與定量分析結果。該方法具有簡便易行、直觀、圖譜信息量大、指紋性強、穩定可靠、所需樣品量少、結果可靠的特點，其分析測試結果重復性好、再現性強，減少了人為因素的影響，是目前世界先進國家普遍接受的一種物理分析技術和測試手段[4-6]。隨著我國加入世界貿易組織(WTO)，進出口貿易的增加，X 射線衍射分析技術將在我國傳統藥物(中藥材、中成藥)和創新藥物(化學藥物)研究中發揮更大的作用。

[1] 呂 揚，張慧燕，蒙 根，等. 金水寶膠囊的X 射線粉末衍射Fourier圖譜分析研究[J]. 中國藥品標準，2000，1(1):47 -51.

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