玻璃體對視網膜色素上皮細胞收縮作用的研究△

黃雄高 魏雁濤 張少沖

玻璃體對視網膜色素上皮細胞收縮作用的研究△

黃雄高 魏雁濤 張少沖

玻璃體；視網膜色素上皮細胞；細胞收縮；細胞骨架蛋白

目的探討人玻璃體體外培養(yǎng)對人視網膜色素上皮細胞收縮性的影響。方法低傳代(3-5代)人視網膜色素上皮細胞分兩組體外培養(yǎng)，一組用普通培養(yǎng)液(含體積分數(shù)10%胎牛血清的DMEM/F12)培養(yǎng)，一組用體積分數(shù)25%玻璃體培養(yǎng)，應用I型膠原凝膠收縮實驗檢測收縮力的變化，應用免疫熒光技術檢測細胞骨架蛋白F-actin、α-SMA和vinculin的定位染色，應用免疫印跡技術檢測α-SMA和vinculin蛋白的表達。結果與普通培養(yǎng)液培養(yǎng)相比，低傳代的人視網膜色素上皮細胞玻璃體中培養(yǎng)48 h，膠原凝膠面積為(22 127±2072)像素，明顯大于在普通培養(yǎng)液中的凝膠面積(16 084±1154)像素，細胞收縮能力顯著下降，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(t=4.412，P=0.012)。在普通培養(yǎng)液中，F(xiàn)-actin、vinculin主要分布于細胞周邊，vinculin形成的粘連斑粗大；而在玻璃體中培養(yǎng)后，F(xiàn)-actin重組，在細胞的一端形成扁平偽足結構，vinculin主要分布于細胞扁平偽足端和細胞中央，形成的粘連斑明顯變小。玻璃體培養(yǎng)后α-SMA蛋白表達顯著下降，與普通培養(yǎng)液相比差異有統(tǒng)計學意義(t=2.845，P=0.047)；vinculin蛋白表達無顯著變化(t=0.198，P=0.852)。結論玻璃體培養(yǎng)可導致視網膜色素上皮細胞收縮性下降，這一作用可能與α-SMA蛋白表達下調及vinculin重新分布有關。

[眼科新進展，2014，34(7):624-627]

增生性玻璃體視網膜病變的特征是沿著玻璃體和視網膜形成增生膜，增生膜的牽引導致視網膜脫離和視力喪失[1]。視網膜色素上皮(retinal pigment epithelium，RPE)細胞被證實經歷了上皮間質轉分化過程，并在增生膜的發(fā)展和收縮中起主要作用[2]。……