鄒秀蘭 王觀峰 皮榮標 李文立 俞永珍 鄒玉平
Bax、Bcl-2在丙烯醛誘導的ARPE-19細胞凋亡中的作用△
鄒秀蘭 王觀峰 皮榮標 李文立 俞永珍 鄒玉平
丙烯醛;ARPE-19細胞;細胞凋亡;Bax;Bcl-2;
目的觀察Bax、Bcl-2蛋白在丙烯醛誘導的體外培養ARPE-19細胞凋亡中的作用。方法將培養的ARPE-19細胞置于含有體積分數10%胎牛血清的完全培養基中,于37 ℃、體積分數5%CO2培養箱孵育;用不同濃度(50 μmol·L-1、100 μmol·L-1)丙烯醛處理對數期培養的ARPE-19細胞24 h,設不加藥的空白對照組,用流式細胞儀檢測丙烯醛誘導ARPE-19細胞的凋亡情況,Western blot檢測ARPE-19細胞中Bax、Bcl-2蛋白的表達情況。結果流式細胞儀顯示,早期在空白對照組中細胞凋亡率為2.97%,50 μmol·L-1丙烯醛處理組中為4.67%,100 μmol·L-1丙烯醛處理組中為50.07%;晚期凋亡細胞在空白對照組中細胞凋亡率為1.66%,50 μmol·L-1丙烯醛處理組中為24.24%,100 μmol·L-1丙烯醛處理組中為6.77%。Western blot顯示空白對照組的Bax/Bcl-2蛋白表達的比值為0.293 9,50 μmol·L-1丙烯醛處理組的Bax/Bcl-2蛋白表達的比值為1.389 2,100 μmol·L-1丙烯醛處理組的Bax/Bcl-2蛋白表達的比值為1.496 1。結論丙烯醛可以通過激活凋亡蛋白Bax及抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表達來導致ARPE-19細胞凋亡。
[眼科新進展,2014,34(7):633-636]
我們和其他研究人員前期研究發現,丙烯醛可以導致人視網膜色素上皮(human retinal pigment epithelial-19,ARPE-19)細胞數量明顯減少、腫脹、壞死或染色體聚集、胞漿收縮、胞膜出芽等,目前的研究尚不能證明是何種路徑介導這一損傷過程[1-7]。近期國內外研究發現丙烯醛可以激活大量活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)、活性氧自由基,促進氧自由基反應干擾細胞內的氧化磷酸化過程,損傷生物膜系統、氨基酸、DNA、RNA等;氧自由基反應作為信號分子參與了凋亡基因的表達與凋亡蛋白的激活[8-12]。……