劉美玲 曾穎
廣州醫學院荔灣醫院,廣東廣州 510170
現階段,隨著醫療技術的不斷發展完善,同時也促進了醫學檢驗學的進步,對臨床上諸多疾病的診斷提供了準確的借鑒[1]。血小板由于其特殊性,檢測結果容易受到血小板聚集、紅細胞等因素的影響,然而應用全自動血液分析儀對血小板進行檢測有較高的準確性,具有較好的臨床應用價值。本文選擇在我院進行血常規檢查的患者120例作為研究對象,旨在探討血小板采用XT-4000i血液分析儀兩種測定方法與血涂片復檢對比,具體信息如下。
本組共選擇研究對象120例,男72例,女48例,年齡6~80歲,平均(63.5±2.7)歲。均為門診和住院行血常規檢測的病例。
準備EDTA-K2抗凝管,Sysmcx XT 4000i全自動血液分析儀,雙目光學顯微鏡。應用原裝配套試劑,嚴格參照儀器說明書操作,定期校準、質控。儀器在檢測前狀態良好,應用瑞氏染色法染色血涂片。
遵循不重復原則,從Sysemx XT-4000i檢測血常規標本中選擇研究對象,其中無提示有血小板直方圖異常,電阻抗法(PLTI)計數正常者40例(觀察組A),提示有血小板直方圖異常,PLT-I計數>100×109/L40例 (觀察組B),提示有血小板直方圖異常,PLT-I計劃數<100×109/L 40例(觀察組C),涂片鏡檢對血小板形態分布和數量進行觀察,間接計數血小板,并用光學(PLT-0)行血小板計數。依據《臨床檢驗基礎》相關要求制作血涂片,需達邊緣整齊,頭體尾分明,厚薄適宜。待血液片干燥后,選擇瑞氏染色液進行染色鏡檢,從50%紅細胞互相重疊區域觀察,逐漸至紅細胞完全散開區域,使用油鏡觀察血小板形態與數量。通常情況下,有10~15個血小板分布于油鏡視野之下。<8個,可對血小板減少初步證實,>30個為血小板增加。細胞形態異常在油鏡下標準為:紅細胞碎片:有不完整的各種形狀的細胞碎片存在;小紅細胞:<6um直徑;血小板聚集:>5個血小板成堆;大、巨大血小板:直徑4~6μm或直徑>6μm。血小板顯微鏡下計數:應用城垛式計數方法,在血片體尾交界處區,對N目測血小板數即100個血小板無重復計數,并記錄N目測白細胞數即所有涉及視野的白細胞總數,患者血小板嚴重減少,計數血小板不少于50個;參考儀器計數的白細胞數,對血小板總數進行計算,N儀器×(N目測血小板數/N目測白細胞數)×109/L=血小板數量N。
統計學軟件采用SPSS 13.0版,組間計量數據采用(x±s)表示,計量資料行t檢驗,P<0.05差異有統計學意義。
采用電阻抗法、光學法、鏡檢法測得的血小板計數見表1。
表 1 不同方法血小權計數結果[(s)×109/L]

表 1 不同方法血小權計數結果[(s)×109/L]
組別 例數 電阻抗法 光學法 鏡檢法觀察組A觀察組B觀察組C 40 40 40 192±48.3 249±82.7 66.7±13.5 195±48.2 200±82.1 92.4±15.8 197±49.7 203±85.6 94.8±16.2
觀察組A中無干預因素存在,觀察組B小紅細胞干擾12例,紅細胞碎片干擾28例,觀察組C中大血小板干預24例,血小板聚集16例。以鏡檢為參考,在觀察組A中與電阻抗法、光學法比較,P>0.05,故大部分儀器應用電阻抗法。
在大血小板、紅細胞碎片、小紅細胞組中,鏡檢和電阻抗法計數有差異(P<0.05),鏡檢和光學法無差異(P>0.05),就準確性而方,光學法優于電阻抗法。但在血小板聚集組織中,鏡檢法和電阻抗法有差異(P<0.05),鏡檢法和光學法計數結果有差異(P<0.05)。光學法有一定局限性存在。見表2。
表 2 干擾因素對計數結果影響分析[(±s),×109/L]

表 2 干擾因素對計數結果影響分析[(±s),×109/L]
注:與鏡檢法比較,*P<0.05。
組別 小紅細胞 紅細胞碎片 大血小板 血小板聚集電阻抗法光學法鏡檢法229±99.1*203±97.4 200±99.5 257±102*237±102 240±105 75.3±8.2*94.5±7.8 96.1±8.4 53.8±8.0*58.3±8.3*102±8.5
在臨床止血凝血的檢查中,血小板計數是較為重要的觀察指標之一。電阻抗檢測屬于傳統的檢測技術,然而其檢測參數僅為細胞體積,無法將干擾物質進行完全的區分,例如病理樣本中的細胞碎片、小紅細胞、大血小板,因此不能提供準確的檢測結果。所以為確保血小板計數結果的可靠性,通過應用全自動血液分析儀能夠很大程度彌補上述的不足[2-3]。
本次研究顯示,光學法可使大血小板、紅細胞碎片、小紅細胞對計數血小板的影響較好消除,但血小板計數受血小板聚集的影響無法消除。相較儀器自動血小板,血小板采用血涂片觀察優點較明顯[4-5]。通常肉眼在顯微鏡下,可對細胞碎片、紅細胞、血小板區分,在對血小板聚集情況進行觀察時,可將血小板凝集、大血小板、細胞碎片、小紅細胞對血小板的干預排除,并對各種細胞比例直接計數,為顯微鏡檢對血小板間接計數運用基礎[6]。可用PLT-I法作臨床實際工作的常規標本檢測,若標本特殊時,需行PLT-0法再檢,以獲取可靠的血小板結果,降低復查例數,節約成本,特殊病例可用顯微鏡法復查,為臨床診斷提供準確參考依據。
綜上,血小板檢測中,應用光學法可較好消除大血小板、小紅細胞等對計數的影響,但血小板聚集時產生的計數干擾無法消除,需結合鏡檢,以提高檢測準確性。
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