槲白合劑體內(nèi)外抗白色念珠菌的作用

姜妍 王妍 金玲 韓淑英

摘要：目的 觀察槲白合劑體外對白色念珠菌抑制作用及體內(nèi)對小鼠念珠菌性陰道炎的治療效果。方法：測定槲白合劑對白色念珠菌的最小抑菌濃度（MIC），構(gòu)建小鼠白念珠菌性陰道炎模型并分為6組，觀察小鼠外陰炎癥反應(yīng)程度和陰道粘膜的病理變化。結(jié)果 槲白合劑 對白色念珠菌的MIC為0.40 mg/mL，槲白合劑與氟康唑的效價比MIC 2:1，與模型組比較，槲白合劑及氟康唑治療組隨著給藥時間增加，小鼠外陰炎癥及小鼠陰道組織病理改變均有減輕，呈劑量依賴性，高劑量組與氟康唑組相近。結(jié)論槲白合劑體外對白色念珠菌具有抑制作用，對小鼠白色念珠菌性陰道炎有較好的治療效果。

關(guān)鍵詞：槲白合劑；白色念珠菌；陰道炎一、材料

SPF級昆明小鼠，18-22g，雌性，無孕，（北京華阜康生物科技股份有限公司）；槲皮素白藜蘆醇、單體粉末（98%，Sigma公司）；白色念珠菌臨床新分離菌株，由河北省唐山市開灤醫(yī)院檢驗科提供。

二、方法

（一）體外MIC測定。每一藥液挑選10支無菌試管，采用二倍連續(xù)稀釋法，不加菌作陰性對照，第10管只加菌液。37℃培養(yǎng)24h。混濁為陽性，澄清為陰性，藥物最低濃度管無菌生長者，即為受試藥的MIC。

（二）動物分組與給藥。白色念珠菌性陰道炎60只小鼠隨機分5組，每組12只，加正常對照共6組：①為正常對照組；②模型對照組；③氟康唑治療組，按0.1ml/10g原液陰道灌注；④-⑥為槲白合劑低、中、高(L-槲白合劑、M-槲白合劑、H-槲白合劑)劑量組，分別按0.1ml/10g經(jīng)陰道灌注給藥，給藥量依次為

40、80、160 mg/kg；上述各組均連續(xù)給藥7天，每天1次。

（三）體內(nèi)指標(biāo)。（1）小鼠外陰觀察。于給藥第0、5、8天觀察各組小鼠外陰情況：正常為“0分”；單純紅腫為“1分”；紅腫并有少量分泌物為“2分”，紅腫并有大量分泌物為“3分”，分值的總和為炎癥反應(yīng)程度。（2）陰道組織病理學(xué)檢查。于給藥第8天處死小鼠，取小鼠陰道組織作常規(guī)石蠟包埋，HE染色，鏡下觀察病理變化。

（四）統(tǒng)計方法。所有結(jié)果比較均采用SPSS16.0 軟件進行，計數(shù)資料采用卡方檢驗。

三、結(jié)果

（一）槲白合劑體外抗白色念珠菌的MIC。表1：隨著各槲白合劑濃度的降低，對白色念珠菌的抑菌作用也降低。槲白合劑對白念珠菌的MIC為0.40mg/mL，氟康唑?qū)Π啄钪榫?/p>

MIC為0.21 mg/mL，槲白合劑與氟康唑的效價比為2:1。

表１ 槲白合劑抗白色念珠菌的MIC mg/mL

注：-無混濁，+略混濁，2+較混濁，3+明顯混濁

（二）體內(nèi)結(jié)果。（1）小鼠外陰觀察。槲白合劑各劑量組及氟康唑組隨著給藥天數(shù)增加，白色念珠菌性陰道炎小鼠外陰紅腫明顯消失，分泌物明顯減少。給藥第五天，對照組、模型組、氟康唑、（L、M、H）- 槲白合劑組小鼠外陰評分總計分別為0、24、10、22、13、12分。給藥第8天，對照組、模型組、氟康唑、（L、M、H）- 槲白合劑組小鼠外陰評分總計分別為0、27、11、19、13、10分。槲白合劑高劑量組多數(shù)小鼠陰道外觀接近正常對照組。（2 ）陰道組織病理檢查結(jié)果。槲白合劑治療組小鼠陰道組織病理改變有不同程度的減輕，高劑量組作用更明顯，治療效果與陽性對照藥氟康唑組相近。

四、討論

白念珠菌性陰道炎是婦女常見的陰道黏膜真菌感染性疾病。近年來，該病發(fā)病率呈上升趨勢，多數(shù)患者表現(xiàn)反復(fù)發(fā)作。目前亟需研發(fā)高效低毒的抗真菌藥物。本研究所用槲皮素與白藜蘆醇均為黃酮類化合物，利用其多酚化合物聚集原理觀察對小鼠白色念珠菌性陰道炎的治療作用，為真菌性疾病的治療提供新的思路及方法。本次研究體外抗菌實驗結(jié)果，表明槲白合劑有較強的抑制真菌作用，與氟康唑相近。體內(nèi)實驗結(jié)果表明，與模型組和給藥前比較，隨著給藥時間的延長，癥狀逐漸好轉(zhuǎn)，隨著劑量的增加，小鼠小鼠外陰情況及陰道組織病理改變明顯減輕，有明顯的量效關(guān)系，高劑量組與氟康唑相似。前期研究發(fā)現(xiàn)，槲白合劑可增強正常小鼠和免疫功能低下小鼠抗應(yīng)激反應(yīng)能力和免疫功能。本研究表明，槲白合劑可能對真菌有抑制作用，具體機制有待進一步研究。

參考文獻：

[1] 劉云,馬克韶. 對家兔陰道粘膜刺激反應(yīng)的評價方法[J].中國藥檢藥理工作通訊,1990, 2 (1): 4-6.

[2] Chai X Y,Zhang J,Hu H G,Yu Ｓ Ｈ,Sun Q Y,Wu Q Y,et al. Design,synthesis,andbiological evaluation of novel triazole derivatives asinhabitors ofcytochrome P450 14 a-demethylase[J].Eur J Med Chen,2009,44:：1913-1920.