Microtest 1自動血沉儀性能評價及生物參考區間調查＊

張 云，楊 明，高 興，劉諾涵，白巨明，李世紅，趙強元（中國人民解放軍海軍總醫院檢驗科，北京 100048）

紅細胞沉降率（ESR）簡稱血沉，指在規定條件下，離體抗凝全血中的紅細胞自然下沉的速率。ESR是惡性腫瘤、組織損傷、自身免疫疾病、高球蛋白血癥、高膽固醇血癥、炎癥急性反應階段等可靠的間接指標，具有動態觀察病情療效的實用價值，操作簡便，但缺乏疾病特異性［1］。近年來，各種自動化血沉儀不斷涌現，為實驗室測定ESR自動化、微量化、快速化、標準化提供了基礎。本文對意大利Alifax公司生產的Microtest 1全自動血沉儀性能進行評估，與國際血液標準化委員會（ICSH）推薦的魏氏法進行比較，并通過調查健康體檢人群ESR值建立正常參考區間。

1 材料與方法

1.1 材料 意大利Alifax公司生產的Microtest 1自動血沉儀、國產標準化血沉管及血沉架、美國BD公司生產的乙二胺四乙酸二鉀（EDTA－K2）真空抗凝采血管。

1.2 調查人群 源自本院健康體檢中心，共894例，其中男486例；年齡21～75歲，平均45歲；女408例，年齡21～75歲，平均44歲。

1.3 方法

1.3.1 量值溯源性 國際血液學標準委員會（ICSH）推薦檢測ESR使用魏氏法，首先根據Microtest 1血沉儀與ICSH推薦的魏氏法比對結果調整儀器參數，校準血沉儀，再用30例標本對兩種方法檢測結果進行相關性分析。

1.3.2 試驗操作 魏氏法取全血1.6mL加入0.4mL濃度為109mmol／L的枸櫞酸鈉抗凝劑，使抗凝劑與全血的比例為1∶4，具體操作參考文獻［2］，自動血沉儀按照儀器標準操作規程進行操作，所有標本于4h內完成檢測。

1.3.3 精密度 選取高、中、低3份標本，分別重復測定10次，計算均值、標準差和變異系數（CV）。

1.3.4 生物參考區間分組的建立 894例標本按性別分為男、女兩組，按年齡段分為21～30歲、＞30～40歲、＞40～50歲、＞50～60歲和大于60歲組。

1.4 統計學處理 應用SPSS16.0統計學軟件和Excel 2007數據處理軟件，方法學比較采用線性回歸分析，配對樣本采用均數t檢驗，生物參考區間正態分布采用計算，非正態分布使用百分位數分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 量值溯源性 30例標本檢測結果經線性回歸分析，Microtest 1法與魏氏法具有良好的相關性（r2＝0.985），回歸方程為Y＝0.987 X＋0.682，見圖1。

圖1 Microtest 1與魏氏法檢測結果的相關性

2.2 精密度 3份標本經重復測定10次，計算得出CV為2.83%～5.02%，見表1。

表1 Microtest 1檢測ESR精密度

2.3 建立生物參考區間 用Microtest 1血沉儀檢測894例表面健康人群ESR檢測結果見表2。不同性別組分別經F和q檢驗，男組F檢驗總體均數方差不齊（P＜0.05），其中21～30歲、＞30～40歲、＞40～50歲組間比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；＞50～60歲組與大于60歲組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；≤50歲的前三組和大于50歲的后二組之間比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。女組F檢驗總體方差齊（P＞0.05），各組間差異無統計學意義（P＞0.05）。因此，將生物參考區間分為男21～50歲、男大于50歲、女組三組，各組ESR檢測數據呈偏態分布，采用百分位數法統計生物參考區間。見表3。

表2 894例表面健康人群ESR檢測結果（mm／h）

表3 Microtest 1血沉儀ESR生物參考區間（mm／h）

3 討 論

魏氏法檢測ESR受抗凝劑稀釋、血沉管內徑、長度、垂直度、溫度、紅細胞壓積和不易標準化等潛在因素影響，臨床應用價值存在爭議。Microtest 1血沉儀采用光學毛細管停留法，將EDTA抗凝血180r／min充分混勻3min后吸入毛細管內，37℃條件下運用紅外線光度計（950nm）進行檢測，光電二極管將光信號轉變為毛細管內紅細胞的濃度相關電信號，單位時間（1 000 次／20秒）掃描得到的若干電信號描繪出一個沉降曲線，通過線性回歸，將每個單位時間檢測得到信號下降的均值稱為“中位信號”，將這些信號積分后（“積分信號”）的平方根即可換算成與魏氏法相應值。第1個標本檢測時間需3min 20 s，以后20秒檢測1個樣本，每個標本用血量約150μL，適宜于標本量較大的實驗室。其核心要點是對毛細管中紅細胞緡錢狀結構形成過程進行動態分析，在20s內收集1 000 個光密度數據，在紅細胞沉降過程中緡錢狀形成起關鍵性作用［3］。

Microtest 1自動血沉儀沒有相應具有溯源性校準品，依據CNAS要求應用ICSH推薦的參考方法魏氏法進行校準，試驗結果顯示Microtest 1自動血沉儀檢測ESR與參考方法魏氏法有良好的相關性（r2＝0.985，P＞0.05），其檢測不精密度（CV介于2.83%～5.02%）能夠達到實驗室要求，與文獻［4］報道結果相似。建立正常參考區間時抽取表面健康人群894例，按照性別和年齡進行分組，結果呈偏態分布，因此，以第95%點作為正常參考區間上限，男組與女組比較，差異有統計學意義（P＜0.05），女性高于男性。男21～50歲組與大于50組之間差異有統計學意義（P＜0.05），可能與年齡因素相關。本研究結果顯示，男性大于50歲時，ESR隨年齡增長加快，有待進一步研究。

綜上所述，Microtest 1自動血沉儀與魏氏法有良好的相關性，精密度高，用血量少，生物安全危害低，操作簡便，檢測速度快，值得臨床推廣。通過建立本實驗室生物參考區間可為臨床提供參考依據，更好地發揮其臨床診斷和療效監測的價值。

［1］叢玉隆，尹一兵，陳瑜.檢驗醫學高等教程［M］.人民軍醫出版社，2012：110－112.

［2］De Jonge N，Sewkaransing I，Slinger J，et al.Erythrocyte sedimentation rate by test－1analyzer［J］.Clin Chem，2000，46（6）：881－882.

［3］Plebani M，De Toni S，Sanzari MC，et al.The TEST 1 Automated System：A new method for measuring the erythrocyte sedimentation rate ［J］.Am J Clin Pathol，1998，110（3）：334－340.

［4］Plebani M，Piva E.Erythrocyte Sedimentation Rate：Use of Fresh Blood for Quality Control ［J］.Am J Clin Pathol，2002，117（4）：621－626.