內(nèi)皮素受體對食管下括約肌的作用

張珂 劉俊峰

作者簡介： 張珂（1977-），男，河北省保定市人，主治醫(yī)師，博士， 【摘要】目的 研究內(nèi)皮素受體對人食管下括約肌所發(fā)揮作用。方法 將30例食管癌患者手術(shù)標本制備肌條，浸于浴槽中。分別加入內(nèi)皮素受體A、B亞型的拮抗劑（10-7mol/L）后，再加不同濃度的內(nèi)皮素-1，觀察張力變化。結(jié)果 BQ-123(F=31.3 P=0.0000)、BQ-788(F=5.6 P=0.02511)在內(nèi)皮素-1（10-9、10-8、10-7、10-6mol/L）濃度下可部分拮抗收縮作用。BQ-123拮抗作用較大(F=11.5 P=0.0021)。兩種肌條上拮抗效應(yīng)無顯著性區(qū)別(F=0.25 P=0.62)。 結(jié)論BQ-123和BQ-788均可以部分拮抗內(nèi)皮素-1的收縮作用。說明內(nèi)皮素受體A、B激動后肌條收縮。A亞型收縮效應(yīng)大于B。兩種肌條上效應(yīng)無顯著性區(qū)別。

【關(guān)鍵詞】 內(nèi)皮素；受體；食管下括約肌；人

【中圖分類號】R722.12 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949(2014)07-0533-02

1 研究背景

人食管下括約肌(LES)由胃大彎側(cè)套索纖維(sling fibres)和胃小彎側(cè)鉤狀纖維(clasp fibres)組成，靜息狀態(tài)下收縮，生理功能受體液、肌源性、神經(jīng)源性因素影響。當LES出現(xiàn)異常導(dǎo)致食管運動性疾病的發(fā)生，如：賁門失馳緩癥、胃食管返流病等［2］ 。

內(nèi)皮素(Endothelin，ET) 被發(fā)現(xiàn)能收縮血管、收縮平滑肌作用，且其通過內(nèi)皮素受體（ETR）發(fā)揮作用［3］。因此，探討ETR在LES上功能可能為治療食管疾病發(fā)現(xiàn)更有效的治療方法。

2 臨床資料

1．1一般資料 選2011年12月到2013年8月在河北大學(xué)附屬醫(yī)院食管癌手術(shù)患者40例。男性21例，女性19例，平均63歲。病理證實為食管鱗癌。未發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移。

1．2納入標準 標本新鮮完整，肉眼及鏡下無腫瘤，殘端陰性。

1．3排除標準 術(shù)前均無返酸、燒心，也無導(dǎo)致LES功能障礙的疾病。過敏體質(zhì)者；合并心血管、肝、腎、腦疾病的患者排除。

2 材料與方法

2．1肌條制備：標本剪下食管胃結(jié)合部。剝除粘膜、粘膜下層，定位胃小彎側(cè)的鉤狀纖維與位于胃大彎側(cè)的套索纖維。沿兩種肌纖維走行方向剪成2 mm× 10mm肌條。

2．2 實驗方法：肌條置于含Krebs液的浴槽中（95%O2和5%CO2混合氣通氣）下端固定，上端系換能器上。調(diào)整張力于400mg，長度為初長度L0，再多次牽拉至L0的200％，記為最適初長度。隨后實驗均在此長度下進行。穩(wěn)定40分鐘后，先加入10-6 mol/L的卡巴膽堿(Carbachol)，產(chǎn)生的收縮力為參照，再洗脫。先加入拮抗劑，30分鐘后再以濃度累積方式加入ET-1 (10-10、10-9、10-8、10-7、10-6 mol/L) ，加藥間隔為5分鐘。記錄肌張力變化繪制濃度-反應(yīng)曲線。

2．3統(tǒng)計學(xué)方法：SPSS13進行方差分析，P ＜0．05判斷為有統(tǒng)計學(xué)意義。

3結(jié)果

表1 單獨應(yīng)用內(nèi)皮素-1和經(jīng)選擇性內(nèi)皮素處理后應(yīng)用內(nèi)皮素-1的肌條產(chǎn)生的收縮效應(yīng)（ X±s）

組別 收縮力占卡巴膽堿1×10-9mol/L 產(chǎn)生的收縮力的百分比(%) 10-10 10-9 10-8 10-7 10-6單獨應(yīng)用ET-1 0±0 9.90±2.2 29.45±3.35 58.3±4.5 54.75±5.45+BQ-788 0±0 4.65±1.55 21.6±2.8 43.4±3.5 48.3±5.52+BQ-123 0±0 1.90±0.31 10.35±2.75 20.95±2.85 34.05±4.65圖1 BQ-788和BQ-123對內(nèi)皮素-1的拮抗效應(yīng)有統(tǒng)計學(xué)差異(F=67.9 P=0.000)。

ETR選擇性拮抗劑能部分拮抗激動劑的收縮效應(yīng)。(F=67.9 P=0.000)。應(yīng)用內(nèi)皮素受體A（ETA）選擇性阻滯劑BQ-123 (F=31.3 P=0.0000)和內(nèi)皮素受體B（ETB）選擇性阻滯劑BQ-788(F=5.6 P=0.02511)在ET-1（10-9、10-8、10-7、10-6mol/L）濃度下均可部分拮抗收縮。BQ-123拮抗作用較大(F=11.5 P=0.0021)。兩種肌條上拮抗效應(yīng)無顯著性區(qū)別(F=0.25 P=0.62)（圖表未顯示）。

5討論

ET有縮血管、收縮平滑肌的作用。ET與ETR結(jié)合發(fā)揮作用，人體內(nèi)只發(fā)現(xiàn)ETA和B ［3］。他們有共同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路：G蛋白受體與內(nèi)皮素內(nèi)多肽結(jié)合后激活磷脂酶C，水解4，5雙磷酸脂酰肌醇。

通過對人LES的研究發(fā)現(xiàn)：ET-1可使人LES收縮。隨濃度的升高達到最大收縮，兩種肌條張力變化無統(tǒng)計學(xué)差異。ET-1的收縮效應(yīng)能被BQ-123和BQ-788部分拮抗，且BQ123的拮抗作用大于BQ-788。證明ETA和ETB均誘導(dǎo)人LES收縮。另外ETA參與收縮效應(yīng)大于ETB。兩種肌條上效應(yīng)無顯著性區(qū)別。如根據(jù)這一研究結(jié)果，可開發(fā)出藥物治療食管動力性疾病。

參考文獻

［1］ RYAN JP, SNAPE WJ JR, COHEN S. Influence of vagal cooling on esophageal function ［J］. Am J Physiol Endocrinol Metab Gastrointest Physiol, 1977, 232(3):E159-E164

［2］ 譚浩翔，李良慶，張聲，等．內(nèi)皮素-1與腫瘤血管生成的關(guān)系［J］．世界腫瘤雜志, 2004, 3(1):100-103

［3］ SIMONSON MS, DUNN MJ. The molecular mechanisms of cardiovascular and renal regulation by endothelin peptides ［J］. J Lab Clin Med, 1992, 11 9(1):622-639