金蕎麥片溶出度測定方法研究

虢紅梅，王中彥，孫 煌，白政忠

(1．陜西新藥技術開發中心，陜西 西安 710075; 2．沈陽藥科大學，遼寧 沈陽 110016; 3．黑龍江省食品藥品檢驗檢測所，黑龍江 哈爾濱 150001)

2010年版《中國藥典(一部)》收載有1 096個中成藥品種，僅275種測定了制劑的溶出度，因此進行中藥固體制劑溶出度測定研究，已成當務之急。筆者參考文獻[1－2]，以金蕎麥片為模型藥物，進行了中藥固體制劑溶出度測定方法研究，旨在供金蕎麥片的質量控制評價、指導工業化生產以及其固體口服制劑的進一步研發時參考。

1 儀器與試藥

天大天發溶出度測定儀;島津2550型紫外可見分光光度儀;AE163型電子天平。試劑磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、鹽酸、冰醋酸、醋酸銨、異丙醇、十二烷基硫酸鈉均為分析純。金蕎麥片(樣品A，批號為 110803，110807，110815，100713，100608;樣品 B，批號為20101205，20101212，20111009，20111016，20111124);聚合原矢車菊苷元B2對照品(日本Nakahara科技有限公司);表兒茶素對照品(批號為 878－200102)，兒茶素(批號 110877－2001)，均由中國藥品生物制品檢定所提供。

2 方法與結果

2．1 溶出度試驗條件選擇

溶出方法與轉速:取金蕎麥片6片，以水作為溶出介質，選用轉籃法和槳法，分別測定在100 r/min及75 r/min轉速條件下的藥物溶出度，并測定兩種方法1 h和2 h所取溶液在280 nm波長處的吸光度[3]。結果顯示，槳法的溶出效果明顯好于轉籃法，75 r/min轉速條件下溶出過程的分辨率好，因此選定槳法、75 r/min。

溶出介質:分別以水、pH=3．8醋酸鹽緩沖液、pH=6．8磷酸鹽緩沖液(PBS)及 pH=7．2 ～7．4 PBS、5%異丙醇溶液、0．25%十二烷基硫酸鈉溶液(SDS)、0．1%SDS 溶液、0．25 SDS+0．1 mol/L鹽酸(HCl)溶液、0．25%吐溫－80溶液、0．1%吐溫－80溶液作為溶出介質，在轉速為75 r/min、溫度為(37．0±0．5)℃條件下對樣品進行溶出，取溶出液，以0．45 μm微孔濾膜過濾，取續濾液，依法測定，按方程分別計算出每片在不同時間的累積溶出率。結果見圖1及圖2。可見，0．25%SDS能滿足單劑量為0．4 g及以下金蕎麥片的漏槽條件，可獲得很好的釋放曲線。

圖1 金蕎麥片pH－時間－溶出度三維圖

圖2 金蕎麥片溶出介質的選擇(批號為110803)

含量測定方法:金蕎麥提取物的活性成分是聚合原矢車菊苷元B2，故金蕎麥片的含量多控制表兒茶素或蘆丁[4－5]。進行高效液相色譜(HPLC)、紫外顯色法、紫外分光光度自身對照法比較試驗，結果表明，紫外分光光度自身對照法較滿意，可用于溶出度測定。

測定波長:取金蕎麥片，研成細粉，稱取0．16 g，精密稱定，用溶劑超聲提取，并定容至100 mL，濾過，精密量取濾液2 mL，置25 mL容量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，在230～800 nm波長范圍內掃描測定，以溶劑作空白。結果不同批次的樣品均在277～280 nm波長處有最大吸收(見圖3)，掃描圖譜基本一致。由于275～295 nm波長處的吸收峰與其主要成分黃烷酮和雙氫黃酮醇類的特征吸收峰基本相符[6]，故選定280 nm為檢測波長。

圖3 金蕎麥片提取液用0．25%SDS稀釋后的紫外吸收光譜

自身對照法提取溶劑:考察了水、乙腈－水(1∶9)、乙醇－水(50∶50)作為溶劑提取金蕎麥片，而投料的金蕎麥提取物就是以乙醇－水系統提取。試驗結果表明，乙醇－水(50∶50)的提取率最好，相當于提取物0．2 g的樣品在100 mL乙醇－水(50∶50)中即能完全溶解，故選擇其作為提取溶劑。

提取方式:取金蕎麥片，研為細粉，取約0．16 g，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加乙醇－水(50∶50)90 mL，充分振搖使分散，超聲提取30 min，放冷至室溫，用乙醇－水(50∶50)稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續濾液2 mL，置25 mL容量瓶中，用溶出介質稀釋至刻度，搖勻。

2．2 方法學考察

溶出液穩定性試驗:取金蕎麥片120 min的溶出液，分別在室溫下放置 0，15，30，60，90，120，150，180 min 后依法測定。結果見表1，表明溶出液在3 h內測定結果穩定，RSD為1．0%(n=8)。

表1 溶出液穩定性試驗結果

線性關系考察:稱取樣品細粉0．174 8 g，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加乙醇－水(50∶50)溶液90 mL，超聲提取 30 min，放冷至室溫，加乙醇－水(50∶50)溶液至刻度，搖勻，濾過，精密量取 0．75，1．00，1．25，2．00，2．50 mL，分別置 25 mL 量瓶中，加0．25%SDS溶液至刻度，搖勻，制成質量濃度分別為 0．052 4，0．069 9，0．087 4，0．139 8，0．174 8 g/L 的溶液，于 280 nm 波長處測定吸光度，結果吸光度分別為 0．222，0．300，0．385，0．613，0．761。以質量濃度對吸光度進行線性回歸，回歸方程為 A=4．461C －0．011，r=0．999 5(n=5)。結果表明，溶液質量濃度在0．017 5～0．350 g/L范圍內與吸光度呈良好的線性關系。

溶出均勻性試驗:試驗結果表明，金蕎麥片在0．25%SDS溶液中的溶出均勻性較好。

2．3 樣品溶出度測定方法確定

取樣品適量，照2010年版《中國藥典(二部)》附錄ⅩC溶出度測定第二法，加以脫氣水制成的0．25%SDS溶液1 000 mL，轉速為75 r/min，依法操作。經60 min時取樣，濾過，取續濾液，于280 nm 波長處測定吸光度，計算溶出量。溶出 10，20，40，60，90，120 min時各取樣5 mL，同時補充溶出介質5 mL，濾過，取續濾液，于280 nm波長處測定吸光度，計算不同時間點的溶出度，繪制溶出曲線。

2．4 樣品溶出度測定結果與分析

對2個廠家的10批樣品進行了考察，結果見表2。初步試驗結果顯示，同一廠家同年生產的樣品批間溶出曲線差別很大，不同廠家不同批號樣品的溶出曲線差異更大，表明金蕎麥片在制劑方面存在一定問題。建議相關企業對此進行深入研究，以進一步提高產品的質量水平和臨床效果。

3 討論

溶出度測定結果表明，各廠家采用的制劑工藝生產的產品均能達到企業現行質量標準要求，但溶出曲線顯示出制劑工藝的不穩定性，且產品久置后溶出度明顯下降。這說明現有的產品質量標準不能有效控制產品質量，尚待進一步完善。

表2 不同廠家不同批次樣品溶出度測定結果

金蕎麥原用藥方式為湯劑，經過現代制劑工藝制備的片劑應為速釋藥物，因此必須控制其溶出度。金蕎麥片主藥為金蕎麥乙醇水提取物，其主要成分以聚合原矢車菊苷元單體及多聚體為主，在醇水混合溶劑中溶解性好。因此，在設計溶出度試驗時，應該考慮到是否能夠達到漏槽條件。

目前，中藥固體制劑溶出度測定方法的建立還面臨著很多難題，西藥制劑經典的溶出度測定方法具有很高的參考價值，但要科學地認識中藥制劑固有的特點。中藥固體制劑的溶出度測定方法的建立，將豐富其產品質量標準整體專屬性的內涵。

筆者認為，從制劑用料的方式可將中藥固體制劑分成原粉、原粉加提取物、提取物3類，再根據3類制劑的特點來擬訂溶出度測定方法。對于中藥固體制劑溶出度測定的設立，起點不要期望太高，可定位于配方的優化、產品的一致性和貨架期的穩定性這3個方面，應回避體內外溶出度相關的問題。

產品自身的性質也影響著藥物的溶出度。本試驗中對金蕎麥提取物的酸性多糖進行分析[6]，不能排除金蕎麥提取物中的酸性多糖對片劑溶出度的不利影響，此影響還需進一步的試驗證實。

[1]秦春怡．復方黃連素片的溶出度試驗[J]．中國藥業，2014，23(7):35．

[2]杜 亮．克拉霉素顆粒溶出度測定[J]．中國藥業，2014，23(5):27．

[3]胡 靜．玫瑰花總原花青素的分離、純化以及分析[D]．杭州:浙江大學，2006．

[4]WS－305(Z－045)－96，金蕎麥片[S]．

[5]WS3－B－3612－98，衛生部頒藥品標準·中藥成方制劑(第十九冊)·金蕎麥片[S]．

[6]石 碧，狄 瑩．植物多酚[M]．北京:科學出版社，2000:134－138．