淚腺腫瘤組織中GPX3基因mRNA和蛋白的表達及其相關性

趙凱

淚腺腫瘤是眼眶較為常見的腫瘤之一。淚腺腫瘤的發生發展與多種基因功能的改變密切相關，是一個復雜的多步驟的過程，包括癌基因的激活和抑癌基因的失活［1-3］。谷胱甘肽過氧化物酶3(glutathione peroxidase 3，GPX3)是GPXs家族中的成員之一，是近年來發現的具有抑癌作用的基因［4］。在人類的許多惡性腫瘤中低表達，而在淚腺腫瘤組織中，GPX3基因mRNA和蛋白的表達及其相關性的有關報道尚少［5-8］。本研究分別從mRNA及蛋白水平檢測GPX3基因在32例淚腺多形性腺瘤、28例淚腺腺樣囊性癌及9例正常淚腺組織中的表達，并探討其表達和淚腺腫瘤發生發展的關系。

1 材料與方法

1.1 材料 本研究隨機選取2011年1月至2014年2月鄭州大學附屬鄭州中心醫院眼科手術標本。根據患者的病理組織學檢查結果，將所取標本進行分組。淚腺良性腫瘤組患者的標本32例，為淚腺多形性腺瘤;淚腺惡性腫瘤組患者的標本28例，為淚腺腺樣囊性癌;開放性眼眶損傷患者所切除的損傷部位淚腺共9例，為正常淚腺組織組。其中男33例，女36例，年齡21～77歲，中位年齡 49歲。所有病例術前均未接受化學治療、放射治療。所取標本即刻用液氮凍存并在－80℃條件下保存。

1.2 主要試劑 RNA試劑及RT-PCR反應試劑盒購自大連TakaRa生物技術公司?？笹PX3兔抗人單克隆抗體購自美國Santa Cruz公司。辣根過氧化物酶標記的山羊抗兔二抗購自北京中杉金橋生物技術有限公司。鼠抗人內參β-actin一抗購自北京康為世紀公司。

1.3 RT-PCR檢測 GPX3的 mRNA表達 取50 mg組織應用 Trizol法提取組織中的 RNA，經 Nanodrop分光光度計檢測其純度和濃度?！?br>