強(qiáng)心膠囊對(duì)慢性心力衰竭大鼠心臟超聲及血清BNP水平的影響

楊建紅等

摘要：目的探討強(qiáng)心膠囊對(duì)慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）大鼠心臟超聲及血清BNP水平的影響，為臨床用藥提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法將100只成年SD雄性大鼠，隨機(jī)抽取10只為正常對(duì)照組，余90只采用鹽酸阿霉素腹腔注射制作CHF大鼠模型，將造模成功后的50只CHF大鼠隨機(jī)分為模型組、卡托普利組、強(qiáng)心膠囊低、中、高劑量組，分別連續(xù)給藥4周，各組大鼠進(jìn)行心臟超聲檢查和BNP檢測(cè)。結(jié)果給藥4周后，強(qiáng)心膠囊中、高劑量組和卡托普利組血清BNP含量均下降（P<005），心臟超聲顯示射血分?jǐn)?shù)上升。結(jié)論中高劑量強(qiáng)心膠囊能夠改善CHF大鼠的心功能，與提高心肌舒縮力和降低心室壁張力密切相關(guān)。

關(guān)鍵詞：強(qiáng)心膠囊；慢性心力衰竭；心臟超聲；BNP

中圖分類(lèi)號(hào)：R54文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1007-2349（2014）10-0071-03

心力衰竭為各種心臟病的嚴(yán)重階段，其發(fā)病率高，5年存活率與惡性腫瘤相仿。隨著高血壓、糖尿病等發(fā)病率的不斷上升，慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）的發(fā)病率仍將繼續(xù)增長(zhǎng)，正在成為21世紀(jì)最重要的心血管病[1]。心力衰竭的發(fā)生嚴(yán)重威脅著患者的健康和生命，中醫(yī)藥治療CHF療效確切。本研究探討強(qiáng)心膠囊對(duì)CHF大鼠心臟超聲和BNP（心鈉肽）的影響，為中醫(yī)藥治療CHF提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1材料與儀器

11實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成年清潔級(jí)雄性SD大鼠70只，體重180～220 g，購(gòu)自昆明醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)：SCXK（昆）2011-0004，常規(guī)條件飼養(yǎng)，保持室溫23～25℃，濕度30%～70%。

12實(shí)驗(yàn)藥物與試劑強(qiáng)心膠囊：生黃芪、制附子、生曬參、桂枝、血竭等13味中藥組成，04 g/粒，由云南省中醫(yī)醫(yī)院制劑中心制作，批號(hào)20130429；注射用鹽酸阿霉素，10 mg/支，浙江海正藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)130703；卡托普利：25 mg/片，北京亞寶生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)12080031；BNP試劑盒：南京建成生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。

13實(shí)驗(yàn)儀器與材料AB204-S電子分析天平為Mettler-Toledo公司產(chǎn)品、Centrifuge5415D高速離心機(jī)為德國(guó)Eppendorf公司產(chǎn)品、TECAN多功能酶標(biāo)儀（Infinity 200 pro+）為奧地利TECAN公司產(chǎn)品、MilliPore超純水系統(tǒng)、ALOAK超聲儀、TA52101心臟探頭、空氣振蕩浴、手術(shù)剪、手術(shù)鑷、1ml注射器、15ml離心管、20ul毛細(xì)管、普通采血管等。

2實(shí)驗(yàn)方法

21動(dòng)物模型復(fù)制、分組、給藥100只成年SD雄性大鼠，隨機(jī)抽取10只為正常對(duì)照組，余90只采用鹽酸阿霉素復(fù)制CHF心室重構(gòu)大鼠模型，采用腹腔注射鹽酸阿霉素造成CHF大鼠模型[2]，按第1和2次10 mg/kg·d；第3和4次20 mg/kg·d；第5和6次10 mg/kg·d；第7和8次20 mg/kg·d；累積劑量12 mg/kg，隔天注射，共計(jì)2周。行心臟彩超檢查，左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）值低于45%提示造模成功。篩選造模成功且存活的大鼠隨機(jī)分為模型組（生理鹽水20 mL/kg）、卡托普利組（100 mg/kg溶于生理鹽水）、強(qiáng)心膠囊低（02 g/kg，相當(dāng)于人的臨床劑量的25倍）、中（04 g/kg，相當(dāng)于人的臨床劑量5倍）、高劑量組（08 g/kg，相當(dāng)于人的臨床劑量的10倍）。正常對(duì)照組（20 mL/kg），連續(xù)灌胃給藥4周，連續(xù)觀測(cè)動(dòng)物的一般情況。

22實(shí)驗(yàn)大鼠一般情況觀察整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中大鼠的精神狀態(tài)、體重、活動(dòng)、進(jìn)食飲水、大小便等情況。

23心功能檢查各組于造模后、給藥4周后行心臟彩超檢查，參照文獻(xiàn)報(bào)道[3]，用乙醚吸入麻醉大鼠，心前區(qū)備皮，仰臥位固定。心前區(qū)涂抹耦合劑，用ALOAK超聲儀TA52101心臟探頭，頻率12MHz，在二維超聲引導(dǎo)下運(yùn)用M型超聲經(jīng)胸骨左心長(zhǎng)軸切面，測(cè)量左室舒張末期內(nèi)徑（LVIDd）、左室收縮末內(nèi)徑（LVIDs）、左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左室短軸縮短率（HVFS），求3個(gè)心動(dòng)周期的平均值，并按照Teiehholtz公式計(jì)算LVEF值。

24血清BNP檢測(cè)各組大鼠在用藥4周后行血清BNP檢測(cè)，20 uL毛細(xì)管扎大鼠眼內(nèi)眥靜脈叢采血，收集大鼠血液到15 mL離心管，室溫血液自然凝固30 min，1000 rpm離心15 min，收集上清，分裝后置于-80°C保存待測(cè)，運(yùn)用酶標(biāo)儀檢測(cè)血清BNP含量。

25統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多樣本均數(shù)比較用one-way ANOVA法，數(shù)據(jù)先進(jìn)行方差齊性的Levene檢驗(yàn)，方差齊時(shí)用組間比較的LSD法，符合正態(tài)分布但方差不齊時(shí)用TamhaneS T2檢驗(yàn)。

3結(jié)果

31實(shí)驗(yàn)大鼠一般情況注射阿霉素造模的100只大鼠，造模5天后因阿霉素注射死亡4只，第8天死亡13只；造模2周后做心臟彩超因乙醚麻醉意外死亡2只。造模2周后，大鼠出現(xiàn)反應(yīng)遲緩，毛發(fā)枯黃，進(jìn)食飲水減少，大小便減少。正常對(duì)照組均生長(zhǎng)良好，反應(yīng)靈敏，進(jìn)食飲水正常，大小便正常。剔除造模未成功大鼠21只，篩選造模成功且存活的50只大鼠隨機(jī)分組。給藥1周內(nèi)，正常對(duì)照組死亡1只，陽(yáng)性對(duì)照組、強(qiáng)心膠囊低、中、高劑量組均死亡4只，其他剩余組別動(dòng)物較模型對(duì)照組精神較好，進(jìn)食飲水及大小便尚可。

32心功能檢查變化情況

4討論

CHF在臨床上以心悸、喘促、水腫、肝大為主要癥狀體征，是心血管疾病的終末階段，病情常惡化迅速[4]。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查顯示，全世界CHF的患病率在不斷增加中，我國(guó)心力衰竭發(fā)病率為09%，按照這個(gè)比率，我國(guó)目前35～74歲成年人中仍約有400多萬(wàn)心衰患者。美國(guó)大約有500萬(wàn)患者，并且每年新診斷的心衰超過(guò)55萬(wàn)，呈上升趨勢(shì)，已成為全球公共衛(wèi)生的主要難題[1]。因此，加強(qiáng)對(duì)CHF疾病的發(fā)病機(jī)制及治療的研究具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。endprint

隨著對(duì)心力衰竭病生理機(jī)制的探索以及對(duì)神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)說(shuō)、心室重塑學(xué)說(shuō)的廣泛認(rèn)識(shí)，CHF治療模式發(fā)生了根本性的轉(zhuǎn)變。因此，基于神經(jīng)內(nèi)分泌激活和心室重構(gòu)綜合調(diào)控的治療模式日益受到重視[5]。祖國(guó)醫(yī)學(xué)沒(méi)有CHF之病名，但CHF在喘證、心悸、水腫等病范疇，中醫(yī)前賢對(duì)CHF的治療多從心肺氣虛、心陰不足、陰虛火旺、心腎陽(yáng)虛、陽(yáng)虛水泛、氣虛血瘀、痰飲阻肺等論治，取得了較好療效[6]。

強(qiáng)心膠囊由生黃芪、制附子、生曬參、澤瀉、血竭等13味中藥組成，其功效為益氣活血，溫陽(yáng)利水，在臨床應(yīng)用治療CHF療效確切[7]。本研究通過(guò)阿霉素干預(yù)大鼠復(fù)制CHF模型，檢測(cè)BNP和超聲心動(dòng)圖來(lái)相互印證藥物療效機(jī)理。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，連續(xù)干預(yù)4周，與模型組相比，心臟超聲各項(xiàng)指標(biāo)顯著改善，同時(shí)發(fā)現(xiàn)血漿 BNP水平與LVEF呈正相關(guān)性。總之，本研究說(shuō)明強(qiáng)心膠囊能夠有效地降低CHF大鼠的血清BNP的活性，BNP與心臟超聲的相關(guān)指標(biāo)呈明顯的正相關(guān)，提示強(qiáng)心膠囊改善心功能的作用可能與其增加左室收縮功能和降低心室壁張力有關(guān)，抑制血清BNP的釋放，從而抑制心室重構(gòu)，改善心肌收縮力，達(dá)到干預(yù)CHF的目的。

參考文獻(xiàn)：

[1]中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)，中華心血管病雜志編輯委員會(huì)慢性心力衰竭診斷治療指南[J].中華心血管病雜志，2007，35（12）：1076-1095

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[7]萬(wàn)啟南，張俐，陳金素，等強(qiáng)心膠囊治療充血性心力衰竭96例臨床觀察[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2003，10（11）：8-10

（收稿日期：收稿日期：2014-07-23）endprint

隨著對(duì)心力衰竭病生理機(jī)制的探索以及對(duì)神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)說(shuō)、心室重塑學(xué)說(shuō)的廣泛認(rèn)識(shí)，CHF治療模式發(fā)生了根本性的轉(zhuǎn)變。因此，基于神經(jīng)內(nèi)分泌激活和心室重構(gòu)綜合調(diào)控的治療模式日益受到重視[5]。祖國(guó)醫(yī)學(xué)沒(méi)有CHF之病名，但CHF在喘證、心悸、水腫等病范疇，中醫(yī)前賢對(duì)CHF的治療多從心肺氣虛、心陰不足、陰虛火旺、心腎陽(yáng)虛、陽(yáng)虛水泛、氣虛血瘀、痰飲阻肺等論治，取得了較好療效[6]。

強(qiáng)心膠囊由生黃芪、制附子、生曬參、澤瀉、血竭等13味中藥組成，其功效為益氣活血，溫陽(yáng)利水，在臨床應(yīng)用治療CHF療效確切[7]。本研究通過(guò)阿霉素干預(yù)大鼠復(fù)制CHF模型，檢測(cè)BNP和超聲心動(dòng)圖來(lái)相互印證藥物療效機(jī)理。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，連續(xù)干預(yù)4周，與模型組相比，心臟超聲各項(xiàng)指標(biāo)顯著改善，同時(shí)發(fā)現(xiàn)血漿 BNP水平與LVEF呈正相關(guān)性。總之，本研究說(shuō)明強(qiáng)心膠囊能夠有效地降低CHF大鼠的血清BNP的活性，BNP與心臟超聲的相關(guān)指標(biāo)呈明顯的正相關(guān)，提示強(qiáng)心膠囊改善心功能的作用可能與其增加左室收縮功能和降低心室壁張力有關(guān)，抑制血清BNP的釋放，從而抑制心室重構(gòu)，改善心肌收縮力，達(dá)到干預(yù)CHF的目的。

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強(qiáng)心膠囊由生黃芪、制附子、生曬參、澤瀉、血竭等13味中藥組成，其功效為益氣活血，溫陽(yáng)利水，在臨床應(yīng)用治療CHF療效確切[7]。本研究通過(guò)阿霉素干預(yù)大鼠復(fù)制CHF模型，檢測(cè)BNP和超聲心動(dòng)圖來(lái)相互印證藥物療效機(jī)理。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，連續(xù)干預(yù)4周，與模型組相比，心臟超聲各項(xiàng)指標(biāo)顯著改善，同時(shí)發(fā)現(xiàn)血漿 BNP水平與LVEF呈正相關(guān)性。總之，本研究說(shuō)明強(qiáng)心膠囊能夠有效地降低CHF大鼠的血清BNP的活性，BNP與心臟超聲的相關(guān)指標(biāo)呈明顯的正相關(guān)，提示強(qiáng)心膠囊改善心功能的作用可能與其增加左室收縮功能和降低心室壁張力有關(guān)，抑制血清BNP的釋放，從而抑制心室重構(gòu)，改善心肌收縮力，達(dá)到干預(yù)CHF的目的。

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[5]林建民，宮麗鴻，于波中醫(yī)藥對(duì)舒張性心力衰竭患者的BNP和6 min步行試驗(yàn)的影響[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2013，8（3）：258-260

[6]霍根紅試論充血性心力衰竭的中醫(yī)病理實(shí)質(zhì)[J].河南中醫(yī)，1996，16（05）：274-276

[7]萬(wàn)啟南，張俐，陳金素，等強(qiáng)心膠囊治療充血性心力衰竭96例臨床觀察[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2003，10（11）：8-10

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