應用CLSI EP10-A2文件對DXI800化學發(fā)光儀性能評價的結果分析

楊方華，楊寶瑞，馬東禮，鄧芳梅，孫莉芳（廣東省深圳市兒童醫(yī)院檢驗科 518026）

根據ISO15189：2007《醫(yī)學實驗室——質量和能力的專用要求》及國內衛(wèi)生行業(yè)標準《定量臨床檢驗方法的初步評價》（WS／T 228-2002）的要求，臨床實驗室在用于體外診斷前，必須對檢測系統(tǒng)進行必要的性能驗證，以滿足臨床和科研的需求。本研究應用美國臨床和實驗室標準化協(xié)會（CLSI）制定的EP10-A2文件《定量臨床檢驗方法的初步評價：批準指南》（第2版）［1］，對Beckman Coulter DXI800型化學發(fā)光儀檢測人生長激素（hGH）的性能進行初步評價，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料來源低、中、高值樣品均采用美國Bio-RAD公司生產的Lyphochek免疫分析質控液，低值樣品批號：40251，靶值為2.15mmol／L；中值樣品批號：40252，靶值為5.47mmol／L；高值樣品批號：40253，靶值為10.8mmol／L。

1.2 儀器與試劑Beckman Coulter DXI 800型化學發(fā)光儀由美國Beckman Coulter公司生產；hGH試劑盒及定標液均由美國Beckman Coulter公司提供。

1.3 實驗方法嚴格按照CLSI EP10-A2文件要求，每天按中、高、低、中、中、低、低、高、高、中的順序測定各濃度樣本，其中第1個中值作為測定起始用，不作統(tǒng)計，后9個數據中的任何一個出現離群值，都須棄掉該批全部數據，并重新測定，共連續(xù)測定5d。

1.4 判斷標準（1）目測離群點及線性，無明顯離群點，測定結果基本呈線性。（2）絕對偏差的接受范圍，以廠家說明書要求（小于靶值的8%）為標準。（3）總不精密度的接受范圍，以廠家說明書要求（CV%＜10%）為標準。

1.5 統(tǒng)計學處理依照EP10-A2文件要求，運用Excel軟件計算每天的多元回歸分析參數（即截距、斜率、非線性、互染率及線性漂移），計量資料采用±s表示，并采用單樣本t檢驗對每個參數進行統(tǒng)計分析［2］，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 目測離群點及線性hGH測定結果目測無離群點，實測值與靶值間線性良好（Y=0.992 X+0.083，r2=0.978），見圖1、2。

圖1 hGH偏差圖

圖2 hGH線性圖

2.2 hGH偏差分析以各濃度5d的測定結果均值與其對應靶值之差計算偏差，均小于廠家說明書制定要求（小于靶值的8%），臨床均可接受，結果見表1。

表1 hGH偏差分析(±s，mol／L）

表1 hGH偏差分析(±s，mol／L）

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2.3 hGH總不精密度評價按照CLSI EP10-A2文件提供的方法，計算總不精密度（CV%），各濃度總不精密度均未超過廠家說明書要求（CV%＜10%），臨床均可接受，見表2。

表2 hGH總不精密度分析

2.4 hGH所有測定結果的多元回歸分析按照EP-10A2文件方法，計算每天測定結果的5個分析參數（即斜率、截距、攜帶污染、非線性及漂移度）值及t值；采用單樣本t檢驗，每個參數5d的值與預期值之間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表3。

表3 hGH所有測定的多元回歸分析

3 討 論

臨床實驗室在將新檢測系統(tǒng)用于體外診斷前，有必要對其可接受性能作出初步評價，而選擇良好的檢測系統(tǒng)是保證患者檢測結果可靠的前提［3］。檢測系統(tǒng)主要評價性能包括準確度、精密度、測量線性范圍及攜帶污染等［4-6］。CLSI EP10-A2文件主要用于評價臨床實驗室定量分析方法的初步性能，以偏差、截距及斜率指標來評價分析方法的準確度；以非線性度來評價方法的線性；以總不精密度和漂移度來評價其精密度；以攜帶污染率評價儀器的互染性。該指南具有簡便、用時短、可操作性強等優(yōu)點［7-9］。但是，EP10-A2文件只能對檢測系統(tǒng)的分析性能進行初步評價，如果要對其全面評價，需按CLSI的EP5-A、EP6-P、EP7-P、EP9-A等文件對其精密度、非線性、抗干擾力、方法學比較等進行全面試驗［10-11］。

通過偏差圖及線性圖可以目測離群點和線性，有1個離群點的某一批分析數據均應棄去，用另一次分析來替代，并查找離群原因。本研究的偏差圖中未發(fā)現離群點，而且實測值與靶值間線性很好（r2＞0.95）。按照EP-10A2文件要求，實驗的允許總誤差及允許總不精密度均可由各實驗室自行設定。本文采用廠家說明書要求作為評判標準，結果表明允許總誤差和總不精密度均符合廠家要求。同時，在多元回歸分析中，斜率、截距、線性及漂移的單樣本t檢驗，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），也表明偏差的初步評價符合應用要求。EP10-A2文件指出，當允許總誤差及總不精密度均可接受時，無需進行多元回歸分析。本文為了評估樣本攜帶污染率的大小，按照EP10-A2文件的方法計算每天5個多元回歸分析參數（即斜率、截距、攜帶污染率、非線性及漂移度）的值及t值，并采用單樣本t檢驗進行統(tǒng)計分析，結果每個參數5d的值與預期值間，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），表明DXI800化學發(fā)光分析儀測定hGH的攜帶污染率較低，其抗互染力符合使用要求。

綜上所述，DXI800化學發(fā)光儀對hGH定量測定經用CLSI EP10-A2文件所提供的方法進行初步評價，其偏差及總不精密度均在廠家允許范圍內，線性較好，攜帶污染率較低，穩(wěn)定性較好，能滿足臨床常規(guī)檢測及科研需求。

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