血栓心脈寧對大鼠腦缺血再灌注損傷后血管內(nèi)皮生長因子表達的影響

楊小霞，李國前，陳春雷，王杰華，潘 瑩

2.南安市第二醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，南安 362300

急性缺血性腦血管病是由于腦血流突然中斷而導(dǎo)致腦組織缺血、壞死的一種嚴重危害人類健康的疾病。預(yù)防和治療缺血性腦血管病已成為當前神經(jīng)病學(xué)研究的一個重要課題。血栓心脈寧是治療腦缺血性疾病的中成藥，能降低血黏度、改善血小板聚集率、升高血流量[1]。本研究在建立大鼠腦缺血再灌注損傷模型，從促血管生長因子表達的角度探討血栓心脈寧的腦保護作用機制。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 動物 健康雄性SD大鼠24只，體質(zhì)量250～300g（福建醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心，動物合格證號：SCXK2012－0001）。隨機分為3組：假手術(shù)組、模型組和實驗組，每組8只。

1.1.2 試劑 血栓心脈寧片（吉林華康藥業(yè)股份有限公司），實驗時以無菌生理鹽水配制成所需濃度；兔抗大鼠血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）抗體（美國 Santa Cruz公司）；即用型免疫組織化學(xué)試劑盒（鼠／兔）（福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司）；Trizol試劑（美國Invitrogen公司）；PCR試劑盒及逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（美國MBI Fermentas公司），引物由上海生工生物工程有限公司合成。

1.2 方法

1.2.1 模型制作和給藥方法 實驗組于造模前每日灌胃給藥1次（800mg／kg）[2]，連續(xù)6d；假手術(shù)組和模型組予相同體積的無菌生理鹽水。模型組和實驗組參考改良Zea－Longa線栓法制備大鼠大腦中動脈栓塞模型[3]。血流阻斷1h后拔出線栓，形成再灌注。假手術(shù)組大鼠接受相似手術(shù)處理，但是不插入線栓。再灌注24h后處死動物斷頭取腦，取右側(cè)大腦半球視交叉后6～11mm的腦組織備用。

1.2.2 H－E染色 大鼠腦組織制作5μm厚的石蠟切片，經(jīng)脫臘至水，先后加入蘇木素、伊紅溶液進行染色，經(jīng)脫水透明，中性樹膠封片，在200倍光學(xué)顯微鏡下觀察腦組織?！?br>