COX—2與Fax、Ki—67在宮頸癌中表達的臨床意義

董靜茹　李麗　潘龍

【摘要】 目的 探討環氧化酶-2（COX-2）、Fax、Ki-67在宮頸癌中的表達及其臨床病理意義。方法 采用免疫組織化學染色的方法， 檢測宮頸癌（cervical cancer， CC）40例， 宮頸上皮內瘤變（cervical intraepithelial neoplasm， CIN）10例及正常宮頸組織（normal cervical epithelium， NCE）9例中COX-2、Fax、Ki-67的抗體表達的情況。結果 COX-2在宮頸癌中的表達率為70%～90%， 而在正常宮頸組織及宮頸上皮內瘤變中表達率比較差異無統計學意義（P>0.05）。Fax在宮頸癌中的陽性表達率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）；Ki-67在宮頸癌、CIN與正常宮頸組織中表達差異有統計學意義（P<0.05）。結論 COX-2、Fax、Ki-67在宮頸癌的發生、發展及淋巴結轉移中有著重要作用 ， 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結轉移的生物學指標。

【關鍵詞】 環氧化酶-2；Fax；Ki-67；宮頸癌；免疫組織化學；淋巴結轉移

作者采用免疫組化方法檢測COX-2與Fax、Ki-67在宮頸癌、宮頸上皮內瘤變（CIN）及正常宮頸組織中的表達， 探討它們異常表達與宮頸癌的增殖、分化、浸潤和轉移的關系。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集南陽地區2008～2013年手術切除標本， 所有標本均經病理證實， 且術前未經過任何治療。宮頸癌40例， 宮頸上皮內瘤變10例；正常宮頸組織9例。患者發病年齡28～72歲， 平均年齡（47.6±10.6）歲， 40例宮頸癌中鱗狀細胞癌35例， 腺癌5例；高分化13例， 中分化20例， 低分化7例；臨床分期：Ⅰ期11例， Ⅱ期21例， Ⅲ期8例；淋巴結轉移18例。

1. 2 方法 標本經4%甲醛固定， 石蠟包埋， 連續切片， 厚度0.4 ?m， 免疫組化方法參照試劑盒說明書。試劑均購自福建邁新生物技術開發公司。

1. 3 結果判定 COX-2染色陽性為在細胞質中出現棕黃色顆粒， Fax染色陽性為在細胞膜上出現棕黃色顆粒， Ki-67染色陽性為在細胞核出現棕黃色顆粒。按切片中陽性細胞數的比例劃分， 無明確陽性為“-”；陽性細胞<10%為“+”；陽性細胞數10%～50%為“++”；陽性細胞數>50%為“+++”。

1. 4 統計學方法 采用SPSS13.0軟件和Spearmen相關分析進行統計學處理。計數資料采用χ2檢驗。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

COX-2在宮頸癌中的陽性表達率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）， 而在正常宮頸組織與CIN組織之間表達差異無統計學意義（P>0.05）；COX-2陽性表達與病理分級、臨床分期及淋巴結轉移呈正相關（P<0.05）， 與年齡及病理類型無關（P>0.05）， 見表1。

Fax在宮頸癌中的陽性表達率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）， 在正常宮頸組織與CIN組織之間表達差異無統計學意義（P>0.05）；Fax陽性表達與年齡及病理類型、病理分級、臨床分期及淋巴結轉移無關（P>0.05）。

Ki-67在正常宮頸組織中的表達明顯低于CIN組織和宮頸癌組織（P<0.05）， 在宮頸癌組織中的表達與COX-2相同。

3 討論

COX-2是前列腺素合成過程中的重要酶， 也是花生四烯酸代謝的關鍵限速酶。COX-2的高表達與腫瘤的分化程度、淋巴結轉移及預后有關。Masferre 等[1]研究顯示， 在胃癌中COX-2高表達者比低表達者更易發生淋巴結轉移。本研究結果顯示， COX-2在宮頸癌中的陽性表達率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織， 且染色逐漸加深， 說明隨著癌變的發生COX-2的表達逐漸增強， 這與Liu等[2]的研究結果一致。同時， COX-2在低分化癌中、Ⅲ期及有淋巴結轉移的病例中表達明顯增強， 說明COX-2的高表達與腫瘤的發生、發展關系密切。研究也發現部分標本的腫瘤區域內， 血管內皮細胞也呈陽性染色， 提示COX-2的表達可能與腫瘤的轉移有關。所以， COX-2與腫瘤的發生、發展及轉移關系密切， 對于早期發現腫瘤及預測腫瘤預后有一定的意義， 可以作為一種參考指標。

Fax被稱為凋亡蛋白1， 與其配體組成Fas系統， 再將凋亡信號轉導入細胞內通過凋亡途徑使靶細胞死亡。惡性腫瘤的Fax表達明顯下降或丟失， 說明腫瘤的發生發展可能與Fax丟失有關。曲利娟等[3]研究發現Fax在結腸癌中的表達明顯下降。本研究結果表明隨著正常宮頸→CIN→宮頸癌的轉化， Fax的陽性表達呈下降趨勢， 說明Fax系統在細胞凋亡中的作用減低， 使得腫瘤逃避機體的免疫監視。而在宮頸癌的臨床分期和病理分級中Fax的陽性表達率差異無統計學意義（P>0.05）。且Fax與COX-2的表達呈負相關， 說明Fax在宮頸癌的發生、發展中不是一個早期事件， 其發生可能是宮頸癌已經形成的后期事件。COX-2可能通過調節抗細胞凋亡基因bcl-2的表達抑制凋亡基因Fax的表達， 深入研究相關機制， 對宮頸癌病情監測、轉移潛能等有潛在價值。

Ki-67是一種DNA結合蛋白， 它存在于增殖細胞中， 參與驅動細胞周期的調控， 在除G0期之外的有絲分裂細胞周期中表達， 它可以識別生長中的正常和腫瘤細胞， 而對靜止期的細胞無作用。本實驗中， Ki-67的陽性表達從宮頸CIN階段就已開始， 并且隨著進一步發展為宮頸癌， Ki-67的陽性表達率逐漸上升， 且核染色呈棕色。提示細胞增殖活性的改變與癌變的過程相關。Ki-67的陽性表達也與臨床分期、病理分級呈正相關， 與靳玉蘭等[4]的研究結果相一致。在有淋巴結轉移的病例中， Ki-67的陽性表達明顯增高， 差異有統計學意義， 說明腫瘤細胞增殖水平可能反映了腫瘤的惡性程度[5]。

綜上所述， 根據COX-2與Fax、Ki-67三者的聯合應用， 在宮頸癌的發生、發展及淋巴結轉移中有著重要作用 ， 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結轉移的生物學指標。

參考文獻

[1] Masferre JL ， Leahy KM， Koki AT， et al. Antiangiogenic and antitumor activities of cyclooxygenase-2 inhibitors. Cancer Res， 2000， 60（5）：1306.

[2] Liu CH， Chang SH， Narko K， et al. Overexpression of cyc looxygenase -2 is sufficient to induce tumorigenesis in transgenic mice. J Biol Chem， 2001， 276（21）：18563-18569.

[3] 曲利娟， 余英豪， 談景旺， 等.大腸癌組織中Fas/FasL系統、nm23表達與轉移的關系.臨床與實驗病理學雜志， 2002， 18（2）： 153-155.

[4] 靳玉蘭， 張偉， 劉伯齊， 等. 食管癌前病變及原位癌組織中Ki-67、P53、iNOS的異常表達.中華腫瘤雜志， 2001， 23（2）： 129.

[5] 謝麗， 安瑞芳. Ki-67在婦科腫瘤中的研究與應用.國外醫學：婦幼保健分冊， 2004， 15（6）：391-392.

[收稿日期：2014-08-26]

【摘要】 目的 探討環氧化酶-2（COX-2）、Fax、Ki-67在宮頸癌中的表達及其臨床病理意義。方法 采用免疫組織化學染色的方法， 檢測宮頸癌（cervical cancer， CC）40例， 宮頸上皮內瘤變（cervical intraepithelial neoplasm， CIN）10例及正常宮頸組織（normal cervical epithelium， NCE）9例中COX-2、Fax、Ki-67的抗體表達的情況。結果 COX-2在宮頸癌中的表達率為70%～90%， 而在正常宮頸組織及宮頸上皮內瘤變中表達率比較差異無統計學意義（P>0.05）。Fax在宮頸癌中的陽性表達率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）；Ki-67在宮頸癌、CIN與正常宮頸組織中表達差異有統計學意義（P<0.05）。結論 COX-2、Fax、Ki-67在宮頸癌的發生、發展及淋巴結轉移中有著重要作用 ， 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結轉移的生物學指標。

【關鍵詞】 環氧化酶-2；Fax；Ki-67；宮頸癌；免疫組織化學；淋巴結轉移

作者采用免疫組化方法檢測COX-2與Fax、Ki-67在宮頸癌、宮頸上皮內瘤變（CIN）及正常宮頸組織中的表達， 探討它們異常表達與宮頸癌的增殖、分化、浸潤和轉移的關系。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集南陽地區2008～2013年手術切除標本， 所有標本均經病理證實， 且術前未經過任何治療。宮頸癌40例， 宮頸上皮內瘤變10例；正常宮頸組織9例。患者發病年齡28～72歲， 平均年齡（47.6±10.6）歲， 40例宮頸癌中鱗狀細胞癌35例， 腺癌5例；高分化13例， 中分化20例， 低分化7例；臨床分期：Ⅰ期11例， Ⅱ期21例， Ⅲ期8例；淋巴結轉移18例。

1. 2 方法 標本經4%甲醛固定， 石蠟包埋， 連續切片， 厚度0.4 ?m， 免疫組化方法參照試劑盒說明書。試劑均購自福建邁新生物技術開發公司。

1. 3 結果判定 COX-2染色陽性為在細胞質中出現棕黃色顆粒， Fax染色陽性為在細胞膜上出現棕黃色顆粒， Ki-67染色陽性為在細胞核出現棕黃色顆粒。按切片中陽性細胞數的比例劃分， 無明確陽性為“-”；陽性細胞<10%為“+”；陽性細胞數10%～50%為“++”；陽性細胞數>50%為“+++”。

1. 4 統計學方法 采用SPSS13.0軟件和Spearmen相關分析進行統計學處理。計數資料采用χ2檢驗。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

COX-2在宮頸癌中的陽性表達率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）， 而在正常宮頸組織與CIN組織之間表達差異無統計學意義（P>0.05）；COX-2陽性表達與病理分級、臨床分期及淋巴結轉移呈正相關（P<0.05）， 與年齡及病理類型無關（P>0.05）， 見表1。

Fax在宮頸癌中的陽性表達率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）， 在正常宮頸組織與CIN組織之間表達差異無統計學意義（P>0.05）；Fax陽性表達與年齡及病理類型、病理分級、臨床分期及淋巴結轉移無關（P>0.05）。

Ki-67在正常宮頸組織中的表達明顯低于CIN組織和宮頸癌組織（P<0.05）， 在宮頸癌組織中的表達與COX-2相同。

3 討論

COX-2是前列腺素合成過程中的重要酶， 也是花生四烯酸代謝的關鍵限速酶。COX-2的高表達與腫瘤的分化程度、淋巴結轉移及預后有關。Masferre 等[1]研究顯示， 在胃癌中COX-2高表達者比低表達者更易發生淋巴結轉移。本研究結果顯示， COX-2在宮頸癌中的陽性表達率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織， 且染色逐漸加深， 說明隨著癌變的發生COX-2的表達逐漸增強， 這與Liu等[2]的研究結果一致。同時， COX-2在低分化癌中、Ⅲ期及有淋巴結轉移的病例中表達明顯增強， 說明COX-2的高表達與腫瘤的發生、發展關系密切。研究也發現部分標本的腫瘤區域內， 血管內皮細胞也呈陽性染色， 提示COX-2的表達可能與腫瘤的轉移有關。所以， COX-2與腫瘤的發生、發展及轉移關系密切， 對于早期發現腫瘤及預測腫瘤預后有一定的意義， 可以作為一種參考指標。

Fax被稱為凋亡蛋白1， 與其配體組成Fas系統， 再將凋亡信號轉導入細胞內通過凋亡途徑使靶細胞死亡。惡性腫瘤的Fax表達明顯下降或丟失， 說明腫瘤的發生發展可能與Fax丟失有關。曲利娟等[3]研究發現Fax在結腸癌中的表達明顯下降。本研究結果表明隨著正常宮頸→CIN→宮頸癌的轉化， Fax的陽性表達呈下降趨勢， 說明Fax系統在細胞凋亡中的作用減低， 使得腫瘤逃避機體的免疫監視。而在宮頸癌的臨床分期和病理分級中Fax的陽性表達率差異無統計學意義（P>0.05）。且Fax與COX-2的表達呈負相關， 說明Fax在宮頸癌的發生、發展中不是一個早期事件， 其發生可能是宮頸癌已經形成的后期事件。COX-2可能通過調節抗細胞凋亡基因bcl-2的表達抑制凋亡基因Fax的表達， 深入研究相關機制， 對宮頸癌病情監測、轉移潛能等有潛在價值。

Ki-67是一種DNA結合蛋白， 它存在于增殖細胞中， 參與驅動細胞周期的調控， 在除G0期之外的有絲分裂細胞周期中表達， 它可以識別生長中的正常和腫瘤細胞， 而對靜止期的細胞無作用。本實驗中， Ki-67的陽性表達從宮頸CIN階段就已開始， 并且隨著進一步發展為宮頸癌， Ki-67的陽性表達率逐漸上升， 且核染色呈棕色。提示細胞增殖活性的改變與癌變的過程相關。Ki-67的陽性表達也與臨床分期、病理分級呈正相關， 與靳玉蘭等[4]的研究結果相一致。在有淋巴結轉移的病例中， Ki-67的陽性表達明顯增高， 差異有統計學意義， 說明腫瘤細胞增殖水平可能反映了腫瘤的惡性程度[5]。

綜上所述， 根據COX-2與Fax、Ki-67三者的聯合應用， 在宮頸癌的發生、發展及淋巴結轉移中有著重要作用 ， 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結轉移的生物學指標。

參考文獻

[1] Masferre JL ， Leahy KM， Koki AT， et al. Antiangiogenic and antitumor activities of cyclooxygenase-2 inhibitors. Cancer Res， 2000， 60（5）：1306.

[2] Liu CH， Chang SH， Narko K， et al. Overexpression of cyc looxygenase -2 is sufficient to induce tumorigenesis in transgenic mice. J Biol Chem， 2001， 276（21）：18563-18569.

[3] 曲利娟， 余英豪， 談景旺， 等.大腸癌組織中Fas/FasL系統、nm23表達與轉移的關系.臨床與實驗病理學雜志， 2002， 18（2）： 153-155.

[4] 靳玉蘭， 張偉， 劉伯齊， 等. 食管癌前病變及原位癌組織中Ki-67、P53、iNOS的異常表達.中華腫瘤雜志， 2001， 23（2）： 129.

[5] 謝麗， 安瑞芳. Ki-67在婦科腫瘤中的研究與應用.國外醫學：婦幼保健分冊， 2004， 15（6）：391-392.

[收稿日期：2014-08-26]

【摘要】 目的 探討環氧化酶-2（COX-2）、Fax、Ki-67在宮頸癌中的表達及其臨床病理意義。方法 采用免疫組織化學染色的方法， 檢測宮頸癌（cervical cancer， CC）40例， 宮頸上皮內瘤變（cervical intraepithelial neoplasm， CIN）10例及正常宮頸組織（normal cervical epithelium， NCE）9例中COX-2、Fax、Ki-67的抗體表達的情況。結果 COX-2在宮頸癌中的表達率為70%～90%， 而在正常宮頸組織及宮頸上皮內瘤變中表達率比較差異無統計學意義（P>0.05）。Fax在宮頸癌中的陽性表達率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）；Ki-67在宮頸癌、CIN與正常宮頸組織中表達差異有統計學意義（P<0.05）。結論 COX-2、Fax、Ki-67在宮頸癌的發生、發展及淋巴結轉移中有著重要作用 ， 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結轉移的生物學指標。

【關鍵詞】 環氧化酶-2；Fax；Ki-67；宮頸癌；免疫組織化學；淋巴結轉移

作者采用免疫組化方法檢測COX-2與Fax、Ki-67在宮頸癌、宮頸上皮內瘤變（CIN）及正常宮頸組織中的表達， 探討它們異常表達與宮頸癌的增殖、分化、浸潤和轉移的關系。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集南陽地區2008～2013年手術切除標本， 所有標本均經病理證實， 且術前未經過任何治療。宮頸癌40例， 宮頸上皮內瘤變10例；正常宮頸組織9例。患者發病年齡28～72歲， 平均年齡（47.6±10.6）歲， 40例宮頸癌中鱗狀細胞癌35例， 腺癌5例；高分化13例， 中分化20例， 低分化7例；臨床分期：Ⅰ期11例， Ⅱ期21例， Ⅲ期8例；淋巴結轉移18例。

1. 2 方法 標本經4%甲醛固定， 石蠟包埋， 連續切片， 厚度0.4 ?m， 免疫組化方法參照試劑盒說明書。試劑均購自福建邁新生物技術開發公司。

1. 3 結果判定 COX-2染色陽性為在細胞質中出現棕黃色顆粒， Fax染色陽性為在細胞膜上出現棕黃色顆粒， Ki-67染色陽性為在細胞核出現棕黃色顆粒。按切片中陽性細胞數的比例劃分， 無明確陽性為“-”；陽性細胞<10%為“+”；陽性細胞數10%～50%為“++”；陽性細胞數>50%為“+++”。

1. 4 統計學方法 采用SPSS13.0軟件和Spearmen相關分析進行統計學處理。計數資料采用χ2檢驗。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

COX-2在宮頸癌中的陽性表達率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）， 而在正常宮頸組織與CIN組織之間表達差異無統計學意義（P>0.05）；COX-2陽性表達與病理分級、臨床分期及淋巴結轉移呈正相關（P<0.05）， 與年齡及病理類型無關（P>0.05）， 見表1。

Fax在宮頸癌中的陽性表達率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）， 在正常宮頸組織與CIN組織之間表達差異無統計學意義（P>0.05）；Fax陽性表達與年齡及病理類型、病理分級、臨床分期及淋巴結轉移無關（P>0.05）。

Ki-67在正常宮頸組織中的表達明顯低于CIN組織和宮頸癌組織（P<0.05）， 在宮頸癌組織中的表達與COX-2相同。

3 討論

COX-2是前列腺素合成過程中的重要酶， 也是花生四烯酸代謝的關鍵限速酶。COX-2的高表達與腫瘤的分化程度、淋巴結轉移及預后有關。Masferre 等[1]研究顯示， 在胃癌中COX-2高表達者比低表達者更易發生淋巴結轉移。本研究結果顯示， COX-2在宮頸癌中的陽性表達率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織， 且染色逐漸加深， 說明隨著癌變的發生COX-2的表達逐漸增強， 這與Liu等[2]的研究結果一致。同時， COX-2在低分化癌中、Ⅲ期及有淋巴結轉移的病例中表達明顯增強， 說明COX-2的高表達與腫瘤的發生、發展關系密切。研究也發現部分標本的腫瘤區域內， 血管內皮細胞也呈陽性染色， 提示COX-2的表達可能與腫瘤的轉移有關。所以， COX-2與腫瘤的發生、發展及轉移關系密切， 對于早期發現腫瘤及預測腫瘤預后有一定的意義， 可以作為一種參考指標。

Fax被稱為凋亡蛋白1， 與其配體組成Fas系統， 再將凋亡信號轉導入細胞內通過凋亡途徑使靶細胞死亡。惡性腫瘤的Fax表達明顯下降或丟失， 說明腫瘤的發生發展可能與Fax丟失有關。曲利娟等[3]研究發現Fax在結腸癌中的表達明顯下降。本研究結果表明隨著正常宮頸→CIN→宮頸癌的轉化， Fax的陽性表達呈下降趨勢， 說明Fax系統在細胞凋亡中的作用減低， 使得腫瘤逃避機體的免疫監視。而在宮頸癌的臨床分期和病理分級中Fax的陽性表達率差異無統計學意義（P>0.05）。且Fax與COX-2的表達呈負相關， 說明Fax在宮頸癌的發生、發展中不是一個早期事件， 其發生可能是宮頸癌已經形成的后期事件。COX-2可能通過調節抗細胞凋亡基因bcl-2的表達抑制凋亡基因Fax的表達， 深入研究相關機制， 對宮頸癌病情監測、轉移潛能等有潛在價值。

Ki-67是一種DNA結合蛋白， 它存在于增殖細胞中， 參與驅動細胞周期的調控， 在除G0期之外的有絲分裂細胞周期中表達， 它可以識別生長中的正常和腫瘤細胞， 而對靜止期的細胞無作用。本實驗中， Ki-67的陽性表達從宮頸CIN階段就已開始， 并且隨著進一步發展為宮頸癌， Ki-67的陽性表達率逐漸上升， 且核染色呈棕色。提示細胞增殖活性的改變與癌變的過程相關。Ki-67的陽性表達也與臨床分期、病理分級呈正相關， 與靳玉蘭等[4]的研究結果相一致。在有淋巴結轉移的病例中， Ki-67的陽性表達明顯增高， 差異有統計學意義， 說明腫瘤細胞增殖水平可能反映了腫瘤的惡性程度[5]。

綜上所述， 根據COX-2與Fax、Ki-67三者的聯合應用， 在宮頸癌的發生、發展及淋巴結轉移中有著重要作用 ， 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結轉移的生物學指標。

參考文獻

[1] Masferre JL ， Leahy KM， Koki AT， et al. Antiangiogenic and antitumor activities of cyclooxygenase-2 inhibitors. Cancer Res， 2000， 60（5）：1306.

[2] Liu CH， Chang SH， Narko K， et al. Overexpression of cyc looxygenase -2 is sufficient to induce tumorigenesis in transgenic mice. J Biol Chem， 2001， 276（21）：18563-18569.

[3] 曲利娟， 余英豪， 談景旺， 等.大腸癌組織中Fas/FasL系統、nm23表達與轉移的關系.臨床與實驗病理學雜志， 2002， 18（2）： 153-155.

[4] 靳玉蘭， 張偉， 劉伯齊， 等. 食管癌前病變及原位癌組織中Ki-67、P53、iNOS的異常表達.中華腫瘤雜志， 2001， 23（2）： 129.

[5] 謝麗， 安瑞芳. Ki-67在婦科腫瘤中的研究與應用.國外醫學：婦幼保健分冊， 2004， 15（6）：391-392.

[收稿日期：2014-08-26]