鎖陽中熊果酸的超聲提取及高效液相色譜法測定

危晴+楊國偉+蘇東海+陳亮

摘要：采用超聲波輔助萃取法提取，高效液相色譜法測定了鎖陽（Cynomorium songaricum）中的熊果酸含量。在單因素試驗基礎上，以乙醇體積分數、料液比、超聲時間、超聲功率為研究對象，進行了4因素3水平正交試驗。結果表明，熊果酸在4.0～16.0 μg/μL范圍內呈良好線性關系，回歸方程為y=622.7x-85.517，r=0.999 8，加樣回收率為98.08%。鎖陽中熊果酸最佳提取工藝為：超聲功率150 W，料液比1∶25，85%（V/V，下同）乙醇超聲提取30 min，在此條件下，鎖陽中熊果酸含量為1.53%。該工藝能有效提取鎖陽中熊果酸，為評價中藥材中的熊果酸水平提供參考。

關鍵詞：鎖陽（Cynomorium songaricum）;熊果酸;超聲提取;高效液相色譜

中圖分類號：TS201.2 ? ? ? ?文獻標識碼：A ? ? ? ?文章編號：0439-8114（2014）12-2894-04

Ultrasonic Extraction and HPLC Determination of Ursolic Acid in Cynomorium songaricun

WEI Qing，YANG Guo-wei，SU Dong-hai，CHEN Liang

（Beijing Polytechnic，Beijing 100029，China）

Abstract：Ursolic acid in Cynomorium songaricum was ultrasonically extracted and detected by HPLC. According to single-factor experiments，three levels of four factors including ethanol concentration，material-liquid ratio，ultrasonic time， and ultrasonic power were selected for the orthogonal design.The results showed that the calibration curve of ursolic acid was linear （r=0.999 8） in the range of 4.0～16.0 μg/μL.The equation was y=622.7x-85.517，r=0.999 8，and recovery was 98.08%.The optimum extraction was carried out in 85%（V/V） ethanol for 30 min with the ultrasonic power of 150 W，and the material-liquid ratio 1∶25.Under the optimal conditions，the content of ursolic acid was 1.53%.The method can extract ursolic acid efficiently，and provide a reference for evaluation ursolic acid in medicinal materials.

Key words：Cynomorium songaricum;ursolic acid;ultrasonic extraction; HPLC

鎖陽（Cynomorium songaricum）是一種稀有名貴中草藥，俗稱“不老藥”，是鎖陽科鎖陽屬的單科單屬單種植物[1，2]，含有多種藥用成分，例如：有機酸、黃酮類、氨基酸等[3-6]，具有抗腫瘤、降低血糖等作用[7]。鎖陽中的熊果酸（ursolic acid）又名烏索酸、烏蘇酸，是存在于天然植物中的一種三萜類化合物[8]，具有保肝、抗腫瘤、降血脂等作用[9]。熊果酸主要通過酶法輔助法[10]、有機溶劑萃取法[11]、大孔樹脂吸附法[12]、超臨界萃取法[13]、超聲輔助[14]等方法提取;采用分光光度法[15，16]、高效液相色譜法[17]、近紅外光譜測定法[18]、薄層掃描[19]等方法測定。

本試驗以鎖陽為原料，采用超聲輔助醇法提取鎖陽中熊果酸，以乙醇體積分數、料液比、超聲時間、超聲功率為因素，通過單因素和正交試驗確定最佳提取工藝，旨在為鎖陽中熊果酸的進一步開發利用提供試驗基礎和科學依據。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

鎖陽產自甘肅省張掖平西湖地區。

1.2 ?儀器與試劑

1100型高效液相色譜儀（Agilent，美國）;AR2140型電子分析天平（上海奧豪斯國際貿易有限公司）;4000型旋轉蒸發器（海道爾夫，德國）;SHB-II循環式真空泵（鄭州長城科工貿有限公司）;恒溫水浴鍋HH-S（江蘇省金壇市醫療儀器廠）;粉碎機（瑞安市百信藥機器械廠）;電熱恒溫鼓風干燥箱（上海蘇達實驗儀器有限公司）;標準篩（新鄉市三圓堂機械有限公司）;KQ250DE數控超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。熊果酸標準品（中國藥品生物制品檢定所）;甲醇為色譜純，無水乙醇為分析純，去離子水。

1.3 ?方法

1.3.1 ?色譜條件 ?Atlantis C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），流動相為水-甲醇（10∶90，V/V），流速為0.8 mL/min，檢測波長205 nm，柱溫25 ℃，進樣量10 μL。

1.3.2 ?熊果酸標準曲線的繪制 ?稱取105 ℃干燥至恒重的熊果酸標準品20.0 mg，用甲醇溶解并定容至25 mL，配制0.80 μg/μL的標準溶液。分別吸取不同體積的標準溶液5～20 μL，甲醇定容至10 mL，進樣并測定峰面積。以峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，計算線性回歸方程。endprint

1.3.3 ?熊果酸的提取與分析 ?稱取5 g鎖陽粉末樣品（粉碎機粉碎，過40目篩），按照1∶40（m/V，下同）加入氯仿回流3 h脫脂，回收溶劑，殘渣揮干。用85%乙醇（V/V，下同）按20∶1液固比浸泡殘渣24 h后，超聲波提取45 min，離心得提取液，濾渣重復提取1次，合并提取液減壓濃縮，取出殘留液，甲醇定容至25 mL。取樣品過0.45 μm微孔濾膜后，在上述色譜條件下測定熊果酸的含量

1.3.4 ?鎖陽中熊果酸提取的單因素試驗 ?①乙醇體積分數。稱取1 g脫脂鎖陽樣品，按照料液比1∶20準確加入70%～95%乙醇溶液，超聲功率150 W，超聲45 min后，參照“1.3.1”和“1.3.3”分析;②料液比。稱取1 g脫脂鎖陽樣品，按不同料液比（1∶5～1∶30）加入85%乙醇溶液，超聲功率150 W，超聲時間45 min，后續步驟同①;③超聲時間。稱取1 g脫脂鎖陽樣品，料液比1∶20，乙醇濃度85%，超聲功率150 W，選取超聲波輔助提取的時間為10～60 min，離心取上清液，后續步驟同①;④超聲功率。稱取1 g脫脂鎖陽樣品，乙醇體積分數為85%，料液比1∶20，超聲時間40 min，超聲波功率選擇50～300 W，后續步驟同①。

1.3.5 ?正交試驗 ?在單因素試驗基礎上，綜合考慮多因素相互作用對鎖陽熊果酸提取的影響，根據單因素試驗結果，采用L9（34）正交設計。

2 ?結果與討論

2.1 ?色譜分析結果

標準品和樣品提取液中熊果酸色譜圖分別見圖1和圖2。在該條件下，熊果酸可有效分離。

2.2 ?單因素試驗

單因素試驗結果見圖3～圖6。

由圖3可知，乙醇體積分數為85%時，熊果酸含量最大;隨著乙醇體積分數增大，含量呈下降趨勢。主要原因是乙醇體積分數增大會導致過多的醇溶物質與熊果酸競爭，導致提取的熊果酸含量下降。

由圖4可知，隨著料液比增大，熊果酸含量逐漸增大，當料液比為1∶20時，熊果酸含量最大;隨著料液比增大，熊果酸含量呈下降趨勢。主要原因是隨著料液比增大，鎖陽中其他成分溶解的幾率增大，同時延長了后續的濃縮過程，造成熊果酸的損失。

由圖5可知，當超聲40 min時，熊果酸含量最大。隨著超聲時間的延長，過多的醇溶物質與熊果酸競爭，影響了熊果酸的提取率，造成含量下降。

由圖6可知，超聲功率為150 W時，熊果酸含量達到最大;但過強的超聲波機械剪切力，破壞了熊果酸的結構，導致熊果酸含量下降。

2.3 ?正交試驗

在單因素試驗基礎上，設計乙醇體積分數、料液比、超聲時間、超聲功率的4因素3水平正交試驗，因素水平見表1，正交試驗結果見表2。

由表2極差分析可知，影響熊果酸提取效率的主次因素分別為料液比、乙醇體積分數、超聲功率、超聲時間。最佳提取工藝為A2B3C1D2，即乙醇體積分數為85%、料液比1∶25、超聲時間30 min、超聲功率150 W，在此組合下，獲得樣品中的熊果酸可達1.53%。

2.4 方法評價

吸取標準品10 μL，重復進樣6次，求得峰面積RSD為1.39%，表明儀器精密度良好。

吸取標準品10 μL，進樣，分別于0～6 h，每間隔0.5 h重復上述操作，求得峰面積RSD為1.9%，結果表明標準品溶液在6 h內基本穩定。

吸取已知濃度的供試品溶液500 μL，加入0.80 mg/mL的熊果酸標準品溶液500 μL，混勻，進樣10 μL，平行測定3次，求得熊果酸平均回收率為98.08%。

稱取已知濃度的同一樣品6份，依次分別制得樣品溶液，精密吸取樣品溶液10 μL，進樣，求得峰面積RSD為1.9%。

3 ?結論

鎖陽中熊果酸在4.0～16.0 μg/μL范圍內線性關系良好（r=0.999 8），其回歸方程為y=622.7x-85.517，r=0.999 8。精密度RSD為1.39%，加樣回收率平均為98.08%，RSD為1.9%。熊果酸提取的最佳工藝條件是：乙醇體積分數為85%、料液比1∶25、超聲時間30 min、超聲功率150 W，鎖陽中熊果酸的含量約為1.53%。該方法提取鎖陽中的熊果酸含量較高，可為開發利用相關藥材提供參考。

參考文獻：

[1] 陳圓華，謝志兵，董靜洲.鎖陽綜合研究概況[J].經濟林研究，2005，23（4）：114-117.

[2] 王 ?勤，孫 ?蕓.HPLC法測定鎖陽中沒食子酸和原兒茶酸的含量[J].西北藥學雜志，2010，25（3）：190-192.

[3] 薛國慶，劉 ?青，任雪峰，等.火焰原子吸收光譜法測定鎖陽中15種金屬元素含量[J].光譜學與光譜分析，2004，24（11）：345-347

[4] 姚 ?健，牛世全，達文燕，等.鎖陽釀酒成分分析[J].西北師范大學學報（自然科學版），2001，37（2）：73-75.

[5] 蘇格爾，常艷旭.鎖陽中的化學成分及藥理作用研究概況[J].中國民族醫藥雜志，2005，12（6）：46-49.

[6] 韓多紅，孟紅梅，張 ?勇.“沙漠人參”鎖陽植物資源的研究和開發利用[J].中國野生植物資源，2003，22（4）：45-46.

[7] 齊艷華，蘇格爾.鎖陽的研究進展[J].中草藥，2000，31（2）：146-148.

[8] 李華榮，孫 ?鑫.熊果酸含量測定方法研究進展[J].時珍國醫國藥，2010，21（6）：1564-1565.

[9] 孟艷秋，陳 ?瑜，王 ?趲，等.熊果酸的研究進展[J].中國新藥雜志，2007，16（1）：25-28.

[10] 張 ?利，何林芯，馮喜文，等.酶法提取車前草中熊果酸的工藝研究[J].安徽農業科學，2010，38（11）：5846-5847.

[11] 梁振益，王 ?軍，陳祎平，等.迷迭香中熊果酸的提取工藝研究[J].時珍國醫國藥，2010，21（11）：2806-2808.

[12] 姚 ?干，何宗玉，閆光凡，等.大孔吸附樹脂純化女貞子中齊墩果酸和熊果酸的研究[J].中草藥，2007，38（10）：1498-1501.

[13] 袁 ?珂，孫 ?偉，張曉明.超臨界二氧化碳萃取冬凌草中熊果酸的研究[J].林產化學與工業，2006，26（2）：131-134.

[14] 袁 ?珂，楊中漢.車前草中熊果酸的超聲提取及高效液相色譜法測定[J].時珍國醫國藥，2006，17（12）：2466-2467.

[15] 李國章，于華忠，卜曉英，等.分光光度法測定湘產苦丁茶中熊果酸含量[J].光譜實驗室，2006，23（2）：401-404.

[16] 莫崢嶸，王安偉，莫燕琴，等.青梅莖中總三萜酸的含量測定[J].時珍國醫國藥，2008，19（11）：2580-2581.

[17] 危華玲，李 ?徽，盧文勝.高效液相色譜法測定復方黃酮膠囊中熊果酸的含量[J].時珍國醫國藥，2007，18（10）：2395-2396.

[18] 宋麗麗，范丙義，徐曉杰，等.近紅外光譜法用于六味地黃丸模擬樣品中熊果酸的含量測定[J].中國中藥雜志，2006，31（19）：1590-1593.

[19] 邱 ?震，周家才.薄層掃描法測定左歸丸中熊果酸含量[J].安徽醫藥，2008，12（8）：698-699.endprint

1.3.3 ?熊果酸的提取與分析 ?稱取5 g鎖陽粉末樣品（粉碎機粉碎，過40目篩），按照1∶40（m/V，下同）加入氯仿回流3 h脫脂，回收溶劑，殘渣揮干。用85%乙醇（V/V，下同）按20∶1液固比浸泡殘渣24 h后，超聲波提取45 min，離心得提取液，濾渣重復提取1次，合并提取液減壓濃縮，取出殘留液，甲醇定容至25 mL。取樣品過0.45 μm微孔濾膜后，在上述色譜條件下測定熊果酸的含量

1.3.4 ?鎖陽中熊果酸提取的單因素試驗 ?①乙醇體積分數。稱取1 g脫脂鎖陽樣品，按照料液比1∶20準確加入70%～95%乙醇溶液，超聲功率150 W，超聲45 min后，參照“1.3.1”和“1.3.3”分析;②料液比。稱取1 g脫脂鎖陽樣品，按不同料液比（1∶5～1∶30）加入85%乙醇溶液，超聲功率150 W，超聲時間45 min，后續步驟同①;③超聲時間。稱取1 g脫脂鎖陽樣品，料液比1∶20，乙醇濃度85%，超聲功率150 W，選取超聲波輔助提取的時間為10～60 min，離心取上清液，后續步驟同①;④超聲功率。稱取1 g脫脂鎖陽樣品，乙醇體積分數為85%，料液比1∶20，超聲時間40 min，超聲波功率選擇50～300 W，后續步驟同①。

1.3.5 ?正交試驗 ?在單因素試驗基礎上，綜合考慮多因素相互作用對鎖陽熊果酸提取的影響，根據單因素試驗結果，采用L9（34）正交設計。

2 ?結果與討論

2.1 ?色譜分析結果

標準品和樣品提取液中熊果酸色譜圖分別見圖1和圖2。在該條件下，熊果酸可有效分離。

2.2 ?單因素試驗

單因素試驗結果見圖3～圖6。

由圖3可知，乙醇體積分數為85%時，熊果酸含量最大;隨著乙醇體積分數增大，含量呈下降趨勢。主要原因是乙醇體積分數增大會導致過多的醇溶物質與熊果酸競爭，導致提取的熊果酸含量下降。

由圖4可知，隨著料液比增大，熊果酸含量逐漸增大，當料液比為1∶20時，熊果酸含量最大;隨著料液比增大，熊果酸含量呈下降趨勢。主要原因是隨著料液比增大，鎖陽中其他成分溶解的幾率增大，同時延長了后續的濃縮過程，造成熊果酸的損失。

由圖5可知，當超聲40 min時，熊果酸含量最大。隨著超聲時間的延長，過多的醇溶物質與熊果酸競爭，影響了熊果酸的提取率，造成含量下降。

由圖6可知，超聲功率為150 W時，熊果酸含量達到最大;但過強的超聲波機械剪切力，破壞了熊果酸的結構，導致熊果酸含量下降。

2.3 ?正交試驗

在單因素試驗基礎上，設計乙醇體積分數、料液比、超聲時間、超聲功率的4因素3水平正交試驗，因素水平見表1，正交試驗結果見表2。

由表2極差分析可知，影響熊果酸提取效率的主次因素分別為料液比、乙醇體積分數、超聲功率、超聲時間。最佳提取工藝為A2B3C1D2，即乙醇體積分數為85%、料液比1∶25、超聲時間30 min、超聲功率150 W，在此組合下，獲得樣品中的熊果酸可達1.53%。

2.4 方法評價

吸取標準品10 μL，重復進樣6次，求得峰面積RSD為1.39%，表明儀器精密度良好。

吸取標準品10 μL，進樣，分別于0～6 h，每間隔0.5 h重復上述操作，求得峰面積RSD為1.9%，結果表明標準品溶液在6 h內基本穩定。

吸取已知濃度的供試品溶液500 μL，加入0.80 mg/mL的熊果酸標準品溶液500 μL，混勻，進樣10 μL，平行測定3次，求得熊果酸平均回收率為98.08%。

稱取已知濃度的同一樣品6份，依次分別制得樣品溶液，精密吸取樣品溶液10 μL，進樣，求得峰面積RSD為1.9%。

3 ?結論

鎖陽中熊果酸在4.0～16.0 μg/μL范圍內線性關系良好（r=0.999 8），其回歸方程為y=622.7x-85.517，r=0.999 8。精密度RSD為1.39%，加樣回收率平均為98.08%，RSD為1.9%。熊果酸提取的最佳工藝條件是：乙醇體積分數為85%、料液比1∶25、超聲時間30 min、超聲功率150 W，鎖陽中熊果酸的含量約為1.53%。該方法提取鎖陽中的熊果酸含量較高，可為開發利用相關藥材提供參考。

參考文獻：

[1] 陳圓華，謝志兵，董靜洲.鎖陽綜合研究概況[J].經濟林研究，2005，23（4）：114-117.

[2] 王 ?勤，孫 ?蕓.HPLC法測定鎖陽中沒食子酸和原兒茶酸的含量[J].西北藥學雜志，2010，25（3）：190-192.

[3] 薛國慶，劉 ?青，任雪峰，等.火焰原子吸收光譜法測定鎖陽中15種金屬元素含量[J].光譜學與光譜分析，2004，24（11）：345-347

[4] 姚 ?健，牛世全，達文燕，等.鎖陽釀酒成分分析[J].西北師范大學學報（自然科學版），2001，37（2）：73-75.

[5] 蘇格爾，常艷旭.鎖陽中的化學成分及藥理作用研究概況[J].中國民族醫藥雜志，2005，12（6）：46-49.

[6] 韓多紅，孟紅梅，張 ?勇.“沙漠人參”鎖陽植物資源的研究和開發利用[J].中國野生植物資源，2003，22（4）：45-46.

[7] 齊艷華，蘇格爾.鎖陽的研究進展[J].中草藥，2000，31（2）：146-148.

[8] 李華榮，孫 ?鑫.熊果酸含量測定方法研究進展[J].時珍國醫國藥，2010，21（6）：1564-1565.

[9] 孟艷秋，陳 ?瑜，王 ?趲，等.熊果酸的研究進展[J].中國新藥雜志，2007，16（1）：25-28.

[10] 張 ?利，何林芯，馮喜文，等.酶法提取車前草中熊果酸的工藝研究[J].安徽農業科學，2010，38（11）：5846-5847.

[11] 梁振益，王 ?軍，陳祎平，等.迷迭香中熊果酸的提取工藝研究[J].時珍國醫國藥，2010，21（11）：2806-2808.

[12] 姚 ?干，何宗玉，閆光凡，等.大孔吸附樹脂純化女貞子中齊墩果酸和熊果酸的研究[J].中草藥，2007，38（10）：1498-1501.

[13] 袁 ?珂，孫 ?偉，張曉明.超臨界二氧化碳萃取冬凌草中熊果酸的研究[J].林產化學與工業，2006，26（2）：131-134.

[14] 袁 ?珂，楊中漢.車前草中熊果酸的超聲提取及高效液相色譜法測定[J].時珍國醫國藥，2006，17（12）：2466-2467.

[15] 李國章，于華忠，卜曉英，等.分光光度法測定湘產苦丁茶中熊果酸含量[J].光譜實驗室，2006，23（2）：401-404.

[16] 莫崢嶸，王安偉，莫燕琴，等.青梅莖中總三萜酸的含量測定[J].時珍國醫國藥，2008，19（11）：2580-2581.

[17] 危華玲，李 ?徽，盧文勝.高效液相色譜法測定復方黃酮膠囊中熊果酸的含量[J].時珍國醫國藥，2007，18（10）：2395-2396.

[18] 宋麗麗，范丙義，徐曉杰，等.近紅外光譜法用于六味地黃丸模擬樣品中熊果酸的含量測定[J].中國中藥雜志，2006，31（19）：1590-1593.

[19] 邱 ?震，周家才.薄層掃描法測定左歸丸中熊果酸含量[J].安徽醫藥，2008，12（8）：698-699.endprint

1.3.3 ?熊果酸的提取與分析 ?稱取5 g鎖陽粉末樣品（粉碎機粉碎，過40目篩），按照1∶40（m/V，下同）加入氯仿回流3 h脫脂，回收溶劑，殘渣揮干。用85%乙醇（V/V，下同）按20∶1液固比浸泡殘渣24 h后，超聲波提取45 min，離心得提取液，濾渣重復提取1次，合并提取液減壓濃縮，取出殘留液，甲醇定容至25 mL。取樣品過0.45 μm微孔濾膜后，在上述色譜條件下測定熊果酸的含量

1.3.4 ?鎖陽中熊果酸提取的單因素試驗 ?①乙醇體積分數。稱取1 g脫脂鎖陽樣品，按照料液比1∶20準確加入70%～95%乙醇溶液，超聲功率150 W，超聲45 min后，參照“1.3.1”和“1.3.3”分析;②料液比。稱取1 g脫脂鎖陽樣品，按不同料液比（1∶5～1∶30）加入85%乙醇溶液，超聲功率150 W，超聲時間45 min，后續步驟同①;③超聲時間。稱取1 g脫脂鎖陽樣品，料液比1∶20，乙醇濃度85%，超聲功率150 W，選取超聲波輔助提取的時間為10～60 min，離心取上清液，后續步驟同①;④超聲功率。稱取1 g脫脂鎖陽樣品，乙醇體積分數為85%，料液比1∶20，超聲時間40 min，超聲波功率選擇50～300 W，后續步驟同①。

1.3.5 ?正交試驗 ?在單因素試驗基礎上，綜合考慮多因素相互作用對鎖陽熊果酸提取的影響，根據單因素試驗結果，采用L9（34）正交設計。

2 ?結果與討論

2.1 ?色譜分析結果

標準品和樣品提取液中熊果酸色譜圖分別見圖1和圖2。在該條件下，熊果酸可有效分離。

2.2 ?單因素試驗

單因素試驗結果見圖3～圖6。

由圖3可知，乙醇體積分數為85%時，熊果酸含量最大;隨著乙醇體積分數增大，含量呈下降趨勢。主要原因是乙醇體積分數增大會導致過多的醇溶物質與熊果酸競爭，導致提取的熊果酸含量下降。

由圖4可知，隨著料液比增大，熊果酸含量逐漸增大，當料液比為1∶20時，熊果酸含量最大;隨著料液比增大，熊果酸含量呈下降趨勢。主要原因是隨著料液比增大，鎖陽中其他成分溶解的幾率增大，同時延長了后續的濃縮過程，造成熊果酸的損失。

由圖5可知，當超聲40 min時，熊果酸含量最大。隨著超聲時間的延長，過多的醇溶物質與熊果酸競爭，影響了熊果酸的提取率，造成含量下降。

由圖6可知，超聲功率為150 W時，熊果酸含量達到最大;但過強的超聲波機械剪切力，破壞了熊果酸的結構，導致熊果酸含量下降。

2.3 ?正交試驗

在單因素試驗基礎上，設計乙醇體積分數、料液比、超聲時間、超聲功率的4因素3水平正交試驗，因素水平見表1，正交試驗結果見表2。

由表2極差分析可知，影響熊果酸提取效率的主次因素分別為料液比、乙醇體積分數、超聲功率、超聲時間。最佳提取工藝為A2B3C1D2，即乙醇體積分數為85%、料液比1∶25、超聲時間30 min、超聲功率150 W，在此組合下，獲得樣品中的熊果酸可達1.53%。

2.4 方法評價

吸取標準品10 μL，重復進樣6次，求得峰面積RSD為1.39%，表明儀器精密度良好。

吸取標準品10 μL，進樣，分別于0～6 h，每間隔0.5 h重復上述操作，求得峰面積RSD為1.9%，結果表明標準品溶液在6 h內基本穩定。

吸取已知濃度的供試品溶液500 μL，加入0.80 mg/mL的熊果酸標準品溶液500 μL，混勻，進樣10 μL，平行測定3次，求得熊果酸平均回收率為98.08%。

稱取已知濃度的同一樣品6份，依次分別制得樣品溶液，精密吸取樣品溶液10 μL，進樣，求得峰面積RSD為1.9%。

3 ?結論

鎖陽中熊果酸在4.0～16.0 μg/μL范圍內線性關系良好（r=0.999 8），其回歸方程為y=622.7x-85.517，r=0.999 8。精密度RSD為1.39%，加樣回收率平均為98.08%，RSD為1.9%。熊果酸提取的最佳工藝條件是：乙醇體積分數為85%、料液比1∶25、超聲時間30 min、超聲功率150 W，鎖陽中熊果酸的含量約為1.53%。該方法提取鎖陽中的熊果酸含量較高，可為開發利用相關藥材提供參考。

參考文獻：

[1] 陳圓華，謝志兵，董靜洲.鎖陽綜合研究概況[J].經濟林研究，2005，23（4）：114-117.

[2] 王 ?勤，孫 ?蕓.HPLC法測定鎖陽中沒食子酸和原兒茶酸的含量[J].西北藥學雜志，2010，25（3）：190-192.

[3] 薛國慶，劉 ?青，任雪峰，等.火焰原子吸收光譜法測定鎖陽中15種金屬元素含量[J].光譜學與光譜分析，2004，24（11）：345-347

[4] 姚 ?健，牛世全，達文燕，等.鎖陽釀酒成分分析[J].西北師范大學學報（自然科學版），2001，37（2）：73-75.

[5] 蘇格爾，常艷旭.鎖陽中的化學成分及藥理作用研究概況[J].中國民族醫藥雜志，2005，12（6）：46-49.

[6] 韓多紅，孟紅梅，張 ?勇.“沙漠人參”鎖陽植物資源的研究和開發利用[J].中國野生植物資源，2003，22（4）：45-46.

[7] 齊艷華，蘇格爾.鎖陽的研究進展[J].中草藥，2000，31（2）：146-148.

[8] 李華榮，孫 ?鑫.熊果酸含量測定方法研究進展[J].時珍國醫國藥，2010，21（6）：1564-1565.

[9] 孟艷秋，陳 ?瑜，王 ?趲，等.熊果酸的研究進展[J].中國新藥雜志，2007，16（1）：25-28.

[10] 張 ?利，何林芯，馮喜文，等.酶法提取車前草中熊果酸的工藝研究[J].安徽農業科學，2010，38（11）：5846-5847.

[11] 梁振益，王 ?軍，陳祎平，等.迷迭香中熊果酸的提取工藝研究[J].時珍國醫國藥，2010，21（11）：2806-2808.

[12] 姚 ?干，何宗玉，閆光凡，等.大孔吸附樹脂純化女貞子中齊墩果酸和熊果酸的研究[J].中草藥，2007，38（10）：1498-1501.

[13] 袁 ?珂，孫 ?偉，張曉明.超臨界二氧化碳萃取冬凌草中熊果酸的研究[J].林產化學與工業，2006，26（2）：131-134.

[14] 袁 ?珂，楊中漢.車前草中熊果酸的超聲提取及高效液相色譜法測定[J].時珍國醫國藥，2006，17（12）：2466-2467.

[15] 李國章，于華忠，卜曉英，等.分光光度法測定湘產苦丁茶中熊果酸含量[J].光譜實驗室，2006，23（2）：401-404.

[16] 莫崢嶸，王安偉，莫燕琴，等.青梅莖中總三萜酸的含量測定[J].時珍國醫國藥，2008，19（11）：2580-2581.

[17] 危華玲，李 ?徽，盧文勝.高效液相色譜法測定復方黃酮膠囊中熊果酸的含量[J].時珍國醫國藥，2007，18（10）：2395-2396.

[18] 宋麗麗，范丙義，徐曉杰，等.近紅外光譜法用于六味地黃丸模擬樣品中熊果酸的含量測定[J].中國中藥雜志，2006，31（19）：1590-1593.

[19] 邱 ?震，周家才.薄層掃描法測定左歸丸中熊果酸含量[J].安徽醫藥，2008，12（8）：698-699.endprint