電化學(xué)發(fā)光免疫分析及其在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用分析

蘇東梅

[摘要] 目的 探討電化學(xué)發(fā)光免疫分析及在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果。 方法 指定一名具有專業(yè)知識(shí)及豐富經(jīng)驗(yàn)的臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員分別利用ECLIA、ELISA等方法完成100例乙肝患者血樣中乙型肝炎病毒核心抗體（抗-HBc）檢驗(yàn)。記錄兩種方法檢測(cè)抗-HBc陽(yáng)性率，給予統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后得出結(jié)論。 結(jié)果 ECLIA法檢測(cè)100例乙肝患者血樣中抗-HBc陽(yáng)性率高達(dá)98.00%，顯著高于ELISA法檢測(cè)陽(yáng)性率81.00%，對(duì)比結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 電化學(xué)發(fā)光免疫分析方法可顯著提高臨床檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性，為臨床醫(yī)生提供真實(shí)可靠的診斷依據(jù)，使患者及時(shí)確診病情并獲得正確治療，保障其臨床療效及預(yù)后。

[關(guān)鍵詞] 電化學(xué)發(fā)光免疫分析；臨床檢驗(yàn)；應(yīng)用效果

[中圖分類號(hào)] R446.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616（2014）23-102-03

電化學(xué)發(fā)光免疫分析（electro-chemiluminescence immunoassay，ECLIA）是近年來(lái)于臨床推廣使用的新型標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)，特點(diǎn)為檢測(cè)速度快、易于控制、靈敏度較高等[1-3]。本研究選取2013年1～12月前來(lái)就診的100例乙肝患者給予臨床分析，從而探討電化學(xué)發(fā)光免疫分析及在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果，為提高臨床檢驗(yàn)準(zhǔn)確率提供可靠依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

100例乙肝患者中男56例、女44例，年齡18～72歲，平均（45.67±2.91）歲，病程6個(gè)月～21年，平均（7.82±1.34）年。

1.2 方法

1.2.1 儀器及試劑 （1）儀器：北京普朗公司提供DNM-9602酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀，瑞士羅氏公司（Roche）提供E601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀；（2）試劑：沈陽(yáng)惠民公司提供ELISA檢驗(yàn)試劑，瑞士羅氏公司提供ECLIA檢驗(yàn)試劑。

1.2.2 研究方法 于清晨空腹抽取100例乙肝患者靜脈血液作為檢驗(yàn)樣本，指定一名具有專業(yè)知識(shí)及豐富經(jīng)驗(yàn)的臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員分別利用ECLIA、ELISA等方法完成血樣中乙型肝炎病毒核心抗體（抗-HBc）檢驗(yàn)。檢驗(yàn)方法如下：（1）ELISA：加入待檢血樣及經(jīng)HRP標(biāo)記的抗-HBc酶結(jié)合物并恒溫培育，酶標(biāo)抗體與血樣中抗-HBc經(jīng)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合微孔板上固相抗原的結(jié)合位點(diǎn)，洗滌并加入底物顯色后，待檢標(biāo)本抗-HBc量與結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗體量呈反相關(guān)，即待檢標(biāo)本抗-HBc量越大則結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗體量越??；（2）ECLIA：待測(cè)標(biāo)本使用還原試劑預(yù)處理后加入HBcAg恒溫培育，待其與抗HBc形成抗原抗體復(fù)合物后加入經(jīng)生物素標(biāo)記的抗-HBc及經(jīng)釕標(biāo)記的抗-HBc，使其與HBcAg結(jié)合，之后加入磁珠（由鏈霉素包被）形成固相復(fù)合物（生物素與鏈霉素親和作用），待電極表面吸附磁珠后沖洗（三丙胺），使電極表面結(jié)合物發(fā)生發(fā)光反應(yīng)，檢出光信號(hào)與待檢標(biāo)本抗-HBc量呈反相關(guān)，即光信號(hào)越強(qiáng)，則待檢標(biāo)本抗-HBc量越少[4-7]。記錄兩種方法檢測(cè)抗-HBc陽(yáng)性率，給予統(tǒng)計(jì)學(xué)分析后得出結(jié)論。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS13.0軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料由（）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

100例乙肝患者血樣中乙型肝炎病毒核心抗體ELISA、ECLIA檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率對(duì)比分析，ECLIA法檢測(cè)100例乙肝患者血樣中抗-HBc陽(yáng)性率高達(dá)98.00%，顯著高于ELISA法檢測(cè)陽(yáng)性率81.00%，對(duì)比結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

3 討論

乙型肝炎病毒核心抗體是機(jī)體發(fā)生乙型肝炎病毒感染后最易產(chǎn)生的檢測(cè)指標(biāo)，也是臨床檢出率最高的生物指標(biāo)，急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎及乙型肝炎病毒攜帶者血樣中高效價(jià)乙型肝炎病毒核心抗體檢出率可達(dá)90%，而低效價(jià)乙型肝炎病毒核心抗體主要由具有HBV感染史人群血樣中檢出，且大多無(wú)傳染性[8-9]。提示對(duì)目標(biāo)人群進(jìn)行乙型肝炎病毒核心抗體檢測(cè)對(duì)診斷、治療及預(yù)防乙型肝炎疾病具有重要的臨床意義。

研究顯示，酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunsorbent assay，ELISA）特點(diǎn)為操作簡(jiǎn)單、使用方便、成本低廉等，是目前臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)乙型肝炎病毒核心抗體的主要方法[10-11]。但有研究表明，ELISA在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中多種因素均可影響其檢測(cè)結(jié)果，如操作時(shí)間差、標(biāo)本溶血、未徹底洗滌、加樣誤差等，使用ELISA檢測(cè)乙型肝炎病毒核心抗體準(zhǔn)確性較低，無(wú)法為臨床醫(yī)生提供可靠的診斷及治療依據(jù)，易造成誤診、漏診等情況貽誤患者治療時(shí)機(jī)造成嚴(yán)重后果，已引起廣大醫(yī)務(wù)工作者高度重視[12-13]。

隨著近年來(lái)臨床檢驗(yàn)技術(shù)不斷發(fā)展，電化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)以廣泛應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)過(guò)程中并取得顯著效果。電化學(xué)發(fā)光免疫分析是將免疫測(cè)定及電化學(xué)發(fā)光相結(jié)合，通過(guò)電化學(xué)在電極表面引發(fā)特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，從而在電極表面由電啟動(dòng)發(fā)光過(guò)程循環(huán)進(jìn)行，由于該方法所得檢測(cè)結(jié)果靈敏度及穩(wěn)定性較高，因此更加適用于臨床測(cè)定微量物質(zhì)。電化學(xué)發(fā)光免疫分析方法主要包括直接法、競(jìng)爭(zhēng)法及雙抗夾心法：直接法主要用于對(duì)抗體檢測(cè)在磁珠上固定抗原；雙抗夾心法及競(jìng)爭(zhēng)法則主要用于抗原檢測(cè)，將磁珠上固定抗體，其中雙抗夾心法適用于檢測(cè)大分子抗原，而競(jìng)爭(zhēng)法則適用于檢測(cè)小分子抗原[14]。本研究可知，100例乙肝患者血樣經(jīng)ELISA及ECLIA兩種方法檢驗(yàn)后，ECLIA檢驗(yàn)陽(yáng)性率顯著高于ELISA，提示ECLIA檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性較高，與國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究結(jié)果相符[15]。

綜上所述，電化學(xué)發(fā)光免疫分析方法可顯著提高臨床檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性，為臨床醫(yī)生提供真實(shí)可靠的診斷依據(jù)，使患者及時(shí)確診病情并獲得正確治療，保障其臨床療效及預(yù)后，值得今后實(shí)際工作中推廣應(yīng)用。endprint

[參考文獻(xiàn)]

[1] 肖美蓮.臨床檢驗(yàn)中化學(xué)發(fā)光免疫分析的應(yīng)用研究[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2013，11（9）：623-624.

[2] 劉愛(ài)國(guó).化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用分析[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2013，32（14）：75-76.

[3] 馬紅霞，曹偉娟，張雪梅，等.羅氏E170全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀剩余試劑再利用結(jié)果分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27（3）：206-209.

[4] 譚曉輝，王勇.羅氏COBAS6000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀性能驗(yàn)證[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，42（1）：52-55.

[5] 方光輝.放射免疫分析與電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清HCG效果分析[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2010，（27）：74.

[6] 梁大立，李介華，藍(lán)永樂(lè)，等.電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀殘余試劑的再利用[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2013，20（16）：107-108.

[7] 王凡，蔣紅君.電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)甲胎蛋白的性能驗(yàn)證[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（10）：1047-1049.

[8] 李紅兵.乙型肝炎病毒標(biāo)志物免疫學(xué)檢驗(yàn)室間質(zhì)量調(diào)查分析[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘（電子版），2013，13（7）：273-274.

[9] 李慧玲，鄔劍，李克田，等.免疫血清的制備及效價(jià)測(cè)定在臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（10）：1336-1337.

[10] 朱中梁，汪宏良，馬娟.免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制分析與研究[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（10）：1332-1333.

[11] 尹志軍，隋洪，黃雪珍.電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)TSH的性能驗(yàn)證[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（21）：2521-2523.

[12] 趙斌勝，殷增運(yùn).人類免疫缺陷病毒檢驗(yàn)技術(shù)研究進(jìn)展[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（16）：2177-2178.

[13] 廖奔兵.影響臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量的因素與對(duì)策[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9（19）：2514-2515.

[14] 呂學(xué)琴，馬雅靜.電化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附、膠體金測(cè)定低濃度HBsAg的效果評(píng)價(jià)[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（9）：1133-1135.

[15] Vogeser M，Shipkova M，Rigobonnin R，et al.Multi-center analytical evaluation of the automated electrochemiluminescence immunoassay for Cyclosporine[J]. Ther Drug Monit，2014，36（5）：640-650.

（收稿日期：2014-08-28）endprint

[參考文獻(xiàn)]

[1] 肖美蓮.臨床檢驗(yàn)中化學(xué)發(fā)光免疫分析的應(yīng)用研究[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2013，11（9）：623-624.

[2] 劉愛(ài)國(guó).化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用分析[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2013，32（14）：75-76.

[3] 馬紅霞，曹偉娟，張雪梅，等.羅氏E170全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀剩余試劑再利用結(jié)果分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27（3）：206-209.

[4] 譚曉輝，王勇.羅氏COBAS6000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀性能驗(yàn)證[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，42（1）：52-55.

[5] 方光輝.放射免疫分析與電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清HCG效果分析[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2010，（27）：74.

[6] 梁大立，李介華，藍(lán)永樂(lè)，等.電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀殘余試劑的再利用[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2013，20（16）：107-108.

[7] 王凡，蔣紅君.電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)甲胎蛋白的性能驗(yàn)證[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（10）：1047-1049.

[8] 李紅兵.乙型肝炎病毒標(biāo)志物免疫學(xué)檢驗(yàn)室間質(zhì)量調(diào)查分析[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘（電子版），2013，13（7）：273-274.

[9] 李慧玲，鄔劍，李克田，等.免疫血清的制備及效價(jià)測(cè)定在臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（10）：1336-1337.

[10] 朱中梁，汪宏良，馬娟.免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制分析與研究[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（10）：1332-1333.

[11] 尹志軍，隋洪，黃雪珍.電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)TSH的性能驗(yàn)證[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（21）：2521-2523.

[12] 趙斌勝，殷增運(yùn).人類免疫缺陷病毒檢驗(yàn)技術(shù)研究進(jìn)展[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（16）：2177-2178.

[13] 廖奔兵.影響臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量的因素與對(duì)策[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9（19）：2514-2515.

[14] 呂學(xué)琴，馬雅靜.電化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附、膠體金測(cè)定低濃度HBsAg的效果評(píng)價(jià)[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（9）：1133-1135.

[15] Vogeser M，Shipkova M，Rigobonnin R，et al.Multi-center analytical evaluation of the automated electrochemiluminescence immunoassay for Cyclosporine[J]. Ther Drug Monit，2014，36（5）：640-650.

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[參考文獻(xiàn)]

[1] 肖美蓮.臨床檢驗(yàn)中化學(xué)發(fā)光免疫分析的應(yīng)用研究[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2013，11（9）：623-624.

[2] 劉愛(ài)國(guó).化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用分析[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2013，32（14）：75-76.

[3] 馬紅霞，曹偉娟，張雪梅，等.羅氏E170全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀剩余試劑再利用結(jié)果分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27（3）：206-209.

[4] 譚曉輝，王勇.羅氏COBAS6000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀性能驗(yàn)證[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，42（1）：52-55.

[5] 方光輝.放射免疫分析與電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清HCG效果分析[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2010，（27）：74.

[6] 梁大立，李介華，藍(lán)永樂(lè)，等.電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀殘余試劑的再利用[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2013，20（16）：107-108.

[7] 王凡，蔣紅君.電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)甲胎蛋白的性能驗(yàn)證[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（10）：1047-1049.

[8] 李紅兵.乙型肝炎病毒標(biāo)志物免疫學(xué)檢驗(yàn)室間質(zhì)量調(diào)查分析[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘（電子版），2013，13（7）：273-274.

[9] 李慧玲，鄔劍，李克田，等.免疫血清的制備及效價(jià)測(cè)定在臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（10）：1336-1337.

[10] 朱中梁，汪宏良，馬娟.免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制分析與研究[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（10）：1332-1333.

[11] 尹志軍，隋洪，黃雪珍.電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)TSH的性能驗(yàn)證[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（21）：2521-2523.

[12] 趙斌勝，殷增運(yùn).人類免疫缺陷病毒檢驗(yàn)技術(shù)研究進(jìn)展[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（16）：2177-2178.

[13] 廖奔兵.影響臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量的因素與對(duì)策[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2012，9（19）：2514-2515.

[14] 呂學(xué)琴，馬雅靜.電化學(xué)發(fā)光免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附、膠體金測(cè)定低濃度HBsAg的效果評(píng)價(jià)[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（9）：1133-1135.

[15] Vogeser M，Shipkova M，Rigobonnin R，et al.Multi-center analytical evaluation of the automated electrochemiluminescence immunoassay for Cyclosporine[J]. Ther Drug Monit，2014，36（5）：640-650.

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