類風濕關節炎患者血清C?X?C配體10與疾病的相關性

教婷，張寧

（中國醫科大學附屬盛京醫院第二風濕免疫科，沈陽 110004）

類風濕關節炎患者血清C?X?C配體10與疾病的相關性

教婷，張寧

（中國醫科大學附屬盛京醫院第二風濕免疫科，沈陽 110004）

目的檢測并分析類風濕關節炎（RA）患者血清中C-X-C配體10（CXCL10）水平與RA疾病活動度的相關性，探討CXCL10對于RA的臨床意義。方法采用ELISA方法測定50例RA患者和35例健康對照者血清CXCL10水平。結果RA組血清CXCL10水平［（23.53±8.92）ng/mL］高于健康對照組［（10.43±4.34）ng/mL，P＜0.01］。高疾病活動度組血清CXCL10水平［（27.13±7.50）ng/mL］高于中低疾病活動度組［（17.12±7.67）ng/mL，P＜0.01］。RA患者血清CXCL10水平與疾病活動度評分28（DAS28）呈正相關（P＜0.05）。結論CXCL10參與了RA的炎癥過程，CXCL10升高可能提示RA高疾病活動。

類風濕關節炎；趨化因子C-X-C配體10；酶聯免疫吸附試驗

類風濕關節炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以侵蝕性、對稱性多關節炎為主要臨床表現的慢性自身免疫性疾病，基本病理改變為滑膜炎和血管翳形成。目前RA的確切發病機制尚不明確。大量研究表明，趨化因子在炎性細胞向滑膜遷移及活化過程中發揮了關鍵作用。C-X-C配體10（C-X-C ligands 10，CXCL10）是趨化因子家族中的一員，研究發現，CXCL10在Ⅱ型膠原誘導性關節炎（collageninduced arthritis，CIA）鼠的滑膜、關節液和血清中表達增加，腹膜內注射中和抗CXCL10抗體可以抑制CIA鼠關節炎的臨床進展［1］。本研究擬檢測RA患者外周血清中CXCL10的表達水平，旨在探討其表達水平與RA的發病機制和疾病活動的相關性及其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選擇2011年于中國醫科大學附屬盛京醫院住院的RA患者50例作為RA組。其中，女41例，男9例；年齡24～76歲，平均年齡（53.98±11.11）歲。所有患者均符合1987年美國風濕病學會（American College of Rheumatology，ACR）制定的RA診斷標準。所有入選病例均除外其他風濕性疾病、感染、腫瘤、心腦血管疾病等。選擇健康志愿者35例作為健康對照組。其中，女29例，男6例；年齡28～75歲，平均年齡（54.03±12.22）歲；既往無RA及自身免疫病史。2組年齡及性別無統計學差異。

收集所有RA組患者的相關臨床資料，包括：病程［（19.27±11.44）個月］，關節腫脹數［（14.05±3.77）個］，關節壓痛數［（9.95±2.96）個］，血沉［（42.49± 19.40）mm/h］，C反應蛋白［（49.94±39.37）mg/L］，類風濕因子［（284.71±443.54）IU/mL］，以及既往用藥情況等。采用疾病活動度評分28（disease activity score 28，DAS28）對RA組進行疾病活動度評分，根據評分結果將RA組分為2組：DAS28評分＞5.1者為高疾病活動組（n=32），DAS28評分≤5.1者為中低疾病活動組（n=18）。本研究獲得所有研究對象知情同意。

1.2 方法

采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測血清CXCL10。抽取RA組及健康對照組清晨空腹肘前靜脈血5 mL，3 000 r/min離心5 min，取上層血清置于-80℃冰箱保存。嚴格按照ELISA試劑盒（美國R＆D公司）說明書進行操作。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 血清CXCL10的表達

RA組及健康對照組血清中均存在CXCL10的表達，RA患者血清CXCL10水平高于健康對照組，差異有統計學意義［（23.53±8.92）ng/mL vs（10.43± 4.34）ng/mL，P＜0.01］。見圖1。

圖1 RA組與健康對照組血清CXCL10水平的比較Fig.1 Levels of CXCL10 in RA patients and healthy controls

2.2 不同疾病活動度RA患者血清CXCL10的表達

RA患者中，高疾病活動組血清CXCL10水平較中低疾病活動組高，差異有統計學意義［（27.13± 7.50）ng/mL vs（17.12±7.67）ng/mL，P＜0.01］。見圖2。

圖2 高疾病活動度組與中低疾病活動組血清CXCL10水平的比較Fig.2 Levels of CXCL10 in high disease activity group and moderate and low disease activiy group

2.3 RA患者DAS28評分與血清CXCL10水平的相關性

Spearman相關分析結果顯示：RA組患者血清CXCL10水平與DAS28評分呈正相關（P＜0.05），見圖3。

圖3 RA組血清CXCL10水平與DAS28評分的相關性Fig.3 Correlation between RA serum concentration of CXCL10 and DAS28

3 討論

CXCL10于1985年由Luster等［2］發現，由干擾素γ（interferon-γ，IFN-γ）、腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）誘導并受其影響［3］，可由單核細胞、巨噬細胞、嗜中性粒細胞、內皮細胞、角質細胞、成纖維細胞、間充質細胞、樹突細胞及星形膠質細胞等多種類型細胞分泌［1］。滑膜炎為RA的基本病理改變，CXCL10可選擇性招募、活化單核細胞及淋巴細胞至滑膜組織中，介導炎性反應［3］。

研究表明，Th1/Th2細胞的失衡參與了RA發病機制，Th1細胞的優勢表達在RA的發生發展中占重要地位［4］。RA的病變滑膜以Th1細胞浸潤為主，而趨化和激活Th1細胞的趨化因子主要為CXCL10［5］，組織中受招募的Th1細胞又可增強IFN-γ和TNF-α的產生，反過來進一步刺激CXCL10的分泌，由此產生一個放大的反饋回路和永存的自身免疫過程［6］。其次，破骨細胞在RA的骨侵蝕中起重要作用。破骨細胞大量形成和激活與RA關節和骨破壞密切相關，核因子κB受體活化因子配體（receptor activator of NF-κB ligand，RANKL）與受體結合后，啟動一系列細胞內信號傳導通路，引起破骨細胞激活與分化［7］。動物實驗發現，CXCL10可以上調RANKL在RA病變滑膜CD4+T細胞中的表達，同時，RANKL可以介導CXCL10在破骨細胞前體的表達，兩者相互作用，進而加重骨破壞［1，6］。此外，成纖維細胞樣滑膜細胞（fibroblast-like synoviocytes，FLS）在RA的滑膜血管翳形成和關節破壞中起核心作用［8］。研究表明，CXCL10可以增加RA患者的FLS侵襲性［9］。以上研究結果提示CXCL10可能是RA發病過程中的一個正相關因子。

本研究采用ELISA方法檢測了RA患者血清中的CXCL10水平，分析了其與RA疾病活動度的相關性。結果表明，RA組血清CXCL10水平顯著高于健康對照組，且高疾病活動度組RA患者血清CXCL10水平高于中低疾病活動度組，差異有統計學意義（P＜0.01），說明CXCL10在RA患者血清中呈高表達水平。結果還顯示，RA組血清CXCL10水平與DAS28評分呈正相關，而DAS28評分可反映疾病的活動程度，因此，血清CXCL10高水平可能提示RA病情較重，預后不良。

綜上所述，CXCL10參與了RA的發病機制，且在一定程度上與疾病活動度呈正相關。本研究結果為今后將血清CXCL10檢測作為RA的一種輔助診斷、鑒別診斷及疾病評估手段提供了初步的實驗基礎。同時，也提示了針對CXCL10藥物的研究在RA治療方面存在潛在價值。

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［5］Lee EY，Lee ZH，Song YW.CXCL10 and autoimmune diseases［J］.Autoimmun Rev，2009，8（5）：379-383.

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［7］劉文，劉童，徐勝前，等.外周血核因子κB受體激活劑配體、護骨素比值在類風濕關節炎患者骨質疏松性骨折中的意義［J］.中華全科醫師雜志，2015，14（2）：121-126.

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（編輯 王又冬）

Serum LevelofC-X-CLigands10 in Patients with Rheumatoid Arthritis and Its Clinical Significance

JIAOTing，ZHANGNing

（The Second Department of Rheumatology and Immunology，Shengjing Hospital，China Medical University，Shenyang 110004，China）

Objective To investigate the serum level of C-X-C ligands 10（CXCL10）in patients with rheumatoid arthritis（RA）and analyze its correlation with diseas activity.MethodsFifty patients with RA were recruited forthe study，and 35 healthy controls were selected as controls.The serum CXCL10 levelsof the two groups were determined by enzyme-linked immunosorbentassay（ELISA）.ResultsThe serum levelofCXCL10 in RA patients（23.53±8.92 pg/mL）was significantly higher than that of the healthy controls（10.43±4.34 pg/mL，P＜0.01），the serum level of CXCL10 in high disease activity group（27.13±7.50 pg/mL）was significantly higher than that of moderate and low disease activity group（17.12±7.67 pg/mL，P＜0.01）.The serum level of CXCL10 was correlated with the disease activity score 28（DAS28）（P＜0.05）.ConclusionCXCL10 is involved in the inflammatory process of RA，and CXCL10 could be used to predictthe disease activity for RApatients.

rheumatoid arthritis；C-X-C ligands 10；enzyme-linked immunosorbent assay

R593.22；R392.114

A

0258-4646（2015）11-0992-03

遼寧省自然科學基金（2014021081）

教婷（1987-），女，助教，碩士.

張寧，E-mail：zhangning@sj-hospital.org

2015-04-03

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