高血壓伴抑郁癥與外周血干細胞因子及其受體表達水平的關系研究

鐘海蘭，盧新政，孫 海，潘信明，白金陵

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·論著·

高血壓伴抑郁癥與外周血干細胞因子及其受體表達水平的關系研究

鐘海蘭，盧新政，孫 海，潘信明，白金陵

目的 探討高血壓伴抑郁癥與外周血干細胞因子(SCF)及其受體(c-kit)表達水平的關系。方法 選擇2013年2—12月江寧區第二人民醫院精神科病區、內科與神經精神科門診初診的高血壓患者147例，其中高血壓伴抑郁癥患者77例為試驗組，高血壓不伴抑郁癥患者70例為對照組。從試驗組中抽取37例患者進行12周抗抑郁治療，為治療組。采用酶聯免疫吸附法檢測外周血SCF、c-kit水平，放射免疫法檢測內皮素1及白介素(IL)6水平，采用Logistic回歸分析高血壓伴抑郁的影響因素。結果 試驗組與對照組比較，SCF〔(848±22)、(917±32)ng/L〕、c-kit〔(11.9±3.7)、(13.1±4.1)μg/L〕 水平降低，差異均有統計學意義(P<0.05)；內皮素1〔(165±21)、(151±17)ng/L〕、IL-6〔(97.3±12.1)、(86.2±9.8)ng/L〕水平升高，差異均有統計學意義(P<0.05)；治療組治療后與治療前比較，SCF〔(873±25)、(852±19)ng/L〕、c-kit〔(12.7±3.1)、(11.4±3.5)μg/L〕 水平升高，差異均有統計學意義(P<0.05)，內皮素1〔(140±15)、(166±20)ng/L〕、IL-6〔(46.5±9.7)、(97.9±11.4)ng/L〕 水平降低，差異均有統計學意義(P<0.05)。Logistic回歸分析顯示，低SCF(OR=24.779，P=0.002)，低c-kit(OR=79.998，P=0.001)，高內皮素1(OR=27.688，P=0.013)和高IL-6(OR=198.343，P<0.001)是高血壓伴抑郁癥的影響因素。結論 高血壓伴有抑郁癥患者外周血中SCF、c-kit表達水平較單純高血壓患者低，外周血中低SCF、c-kit與高血壓伴抑郁癥相關；抗抑郁治療可使外周血中SCF、c-kit表達水平升高。

抑郁癥；高血壓；干細胞因子；原癌基因蛋白質c-kit

抑郁癥是心血管疾病的獨立危險因素[1-3]，同時也是高血壓的促發因素和預后不良指標[4]。抑郁癥不是單純的心理疾病，其血管內皮損傷與免疫炎性激活共同存在并聯合作用。抑郁癥患者交感神經系統被激活后刺激炎性因子合成[5]，炎性因子在內皮功能損傷中發揮重要作用[6]。而血管內皮功能障礙在高血壓發生、發展過程中又起到重要作用[7]。干細胞因子(SCF)是一種多功能細胞因子，通過與其受體c-kit結合促進骨髓、內皮祖細胞及外周血造血干細胞動員增加，促進血管內皮修復[8-9]。有研究發現，抑郁癥患者外周血內皮祖細胞數量減少和細胞增殖功能減弱[10]。本團隊既往研究發現，外周血中SCF及其受體c-kit表達水平隨收縮壓及舒張壓升高而增高[11]。本研究旨在探討SCF、c-kit在高血壓伴抑郁癥患者中的表達水平。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2013年2—12月江寧區第二人民醫院(二級甲等精神專科醫院)精神科病區、內科與神經精神科門診高血壓患者，按照性別、年齡段、抑郁評分情況、血壓水平分層進行抽樣，入選147例研究對象，其中漢密爾頓抑郁量表(Hamilton Depression Scale，HAMD)評分<20分70例，20分≤HAMD評分≤35分67例，HAMD評分>35分10例。排除各種感染、慢性消耗性疾病、糖尿病、蛋白尿及微量清蛋白尿、血管炎性改變、惡性腫瘤、腦卒中、免疫系統疾病、神經系統疾病以及服用血管緊張素轉換酶抑制劑和血管緊張素受體拮抗劑降壓者。入組時僅有少數患者服用小劑量氨氯地平降壓，患者均未服用其他降壓和抗抑郁藥物。患者均簽署知情同意書。

1.2 分組 將77例高血壓伴抑郁癥患者歸為試驗組，70例高血壓不伴抑郁癥患者歸為對照組。試驗組患者在抽血及基本檢查后，按照HAMD評分抽取37例患者歸為治療組，其中20分≤HAMD評分≤35分32例，HAMD評分>35分5例，給予文拉法辛75 mg/d。

1.3 研究方法

1.3.1 一般調查 采用統一調查表進行調查。內容包括：(1)一般情況：性別、年齡、吸煙、飲酒狀況；(2)既往史:糖尿病、高脂血癥、冠心病、心肌梗死、心功能不全、腦卒中及其他疾病病史，并詢問相關疾病用藥情況；(3)家族史:高血壓、糖尿病及其他家族遺傳病史；(4)測量身高、體質量、腰圍和臀圍。腰圍測量方法為清晨未進食時直立，用力呼氣后屏氣，兩側取肋弓下緣與髂骨嵴中點水平，腹側取劍突與臍中點，用皮尺測量水平周徑；臀圍測量方法為恥骨聯合和背后臀大肌最凸處水平周徑;(5)體質指數(BMI)=體質量(kg)/〔身高(m)〕2。

1.3.2 高血壓和抑郁癥判定標準 (1)血壓測量采用臺式水銀血壓計，右臂坐位為準，用聽診法，以Korotkoff第1音作為收縮壓，以第5音為舒張壓，特殊人群(包括老年人、孕妊)以第4音為舒張壓。血壓測量前排空膀胱，并至少休息5 min，連續測量3次，每次間隔2 min以上，取其均值。(2)高血壓判定標準：參照《中國高血壓防治指南2010》[12]，未使用抗高血壓藥物的情況下，收縮壓≥140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和/或舒張壓≥90 mm Hg；既往有高血壓病史目前正在使用抗高血壓藥物者，現血壓雖未達到上述水平，亦應診斷為高血壓。(3)抑郁癥：符合中國精神障礙分類與診斷標準(第3版)(CCMD-3)[13]，HAMD評分總分96分，<8分為無抑郁癥狀，8～19分為可能抑郁癥狀，20～35分為輕中度抑郁癥狀，>35分為重度抑郁癥狀。抑郁癥診斷結果由專業的精神科主治醫師以上職稱的醫生審核。

1.3.3 外周血SCF、c-kit、內皮素1、白介素(IL)6、血糖、血脂、肌酐、尿酸檢測 用真空負壓干燥管取空腹未服藥物時靜脈血5 ml，立即取3 ml平均分至肝素和EDTA抗凝的兩個試管中。離心后將血漿分裝于3個Eppendorf管中，并在EDTA抗凝血漿中加入抑肽酶，-20 ℃保存備用。(1)取EDTA抗凝血漿，用放射免疫法檢測內皮素1、IL-6，試劑盒購自北京北方生物技術研究所。操作過程嚴格按照試劑盒說明書進行。(2)取干燥管中血清，用美國杜邦DimensionRxL型多功能全自動生化分析儀檢測空腹血糖、血脂、肌酐、尿酸水平。(3)取肝素抗凝血漿，用酶聯免疫吸附法檢測SCF、c-kit表達水平。試劑盒購自美國R&D systems 公司。取出酶標板，向所有板孔中加入指定稀釋液100 μl，然后向標準孔和樣本孔分別加入標準品和樣本100 μl，常溫下孵育2 h，洗板3次，加入200 μl指定酶結合物，常溫孵育2 h，再次洗板3次，加入200 μl指定酶結合物，常溫避光保存20 min，加入50 μl終止液，終止反應。在30 min內，由BIORADEVOLIS全自動酶標儀在450 nm波長讀出各孔吸光度值，根據標準品制作標準曲線，計算各樣本SCF、c-kit表達水平。治療組患者經過抗抑郁治療12周后，再次抽血3 ml，檢測外周血SCF、c-kit、內皮素1及IL-6。

2 結果

2.1 對照組和試驗組臨床資料 對照組和試驗組臨床資料間差異無統計學意義(P>0.05，見表1)。

2.2 對照組和試驗組SCF、c-kit、內皮素1、IL-6水平比較 試驗組外周血SCF、c-kit表達水平低于對照組(P<0.05)，試驗組外周血內皮素1和IL-6水平高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05，見表2)。將試驗組按照抑郁水平分為輕中度抑郁亞組(20分≤HAMD評分≤35分)和重度抑郁亞組(HAMD評分>35分)，兩組間SCF、c-kit、內皮素1和IL-6比較差異有統計學意義(P<0.05，見表3)。

Table 2 Comparison of the levels of SCF，c-kit，IL-6 and ET-1 between experimental and control group

組別例數SCF(ng/L)c-kit(μg/L)內皮素1(ng/L)IL-6(ng/L)對照組70917±32131±41151±17862±98試驗組77848±22119±37165±21973±121t值2351202424512159P值0021003900190024

注：SCF=干細胞因子，c-kit=干細胞因子受體，IL-6=白介素6

Table 3 Comparison of SCF，c-kit，IL-6 and ET-1 levels between patients with different depression levels in experimental group

組別例數SCF(ng/L)c-kit(μg/L)內皮素1(ng/L)IL-6(ng/L)輕中度抑郁亞組67853±16120±36161±17932±80重度抑郁亞組10842±16107±25170±16993±101t值2035200721482001P值0037004200290044

2.3 治療組治療前后SCF、c-kit、內皮素1、IL-6水平比較 與治療前比較，治療組治療后SCF、c-kit表達水平增高，內皮素1和IL-6水平降低，差異有統計學意義(P<0.05，見表4)。

表1 對照組和試驗組臨床資料比較

注：BMI=體質指數，LDL-C=低密度脂蛋白膽固醇，HDL-C=高密度脂蛋白膽固醇；a為χ2值

Table 4 Comparison of SCF，c-kit，IL-6 and ET-1 levels in treatment group before and after treatment

治療組SCF(ng/L)c-kit(μg/L)內皮素1(ng/L)IL-6(ng/L)治療前852±19114±35166±20979±114治療后873±25127±31140±15465±97t值2168203137903810P值00250036<0001<0001

2.4 SCF、c-kit、IL-6及內皮素1的相關分析 SCF與c-kit、IL-6及內皮素1呈正相關(P<0.05)，c-kit與IL-6、內皮素1呈正相關(P<0.05)，內皮素1與IL-6呈正相關(P<0.05，見表5)。

表5 SCF、c-kit、IL-6及內皮素1的相關性(r值)

注：aP<0.05；-代表數據重復未列出

2.5 多因素Logistic回歸分析 以高血壓是否伴抑郁癥(是=1，否=0)為因變量，性別(男性=0，女性=1)、年齡、BMI、SCF(≤790 ng/L=1，>790 ng/L=0)、c-kit(≤10 μg/L=1，>10 μg/L=0)、內皮素1(≥140 ng/L=1，<140 ng/L=0)及IL-6(≥86 ng/L=1，<86 ng/L=0)為自變量進行Logistic回歸分析，結果顯示：低SCF、低c-kit、高內皮素1和高IL-6是高血壓伴抑郁癥的影響因素(P<0.05，見表6)。

表6 高血壓伴抑郁癥影響因素的多因素Logistic回歸分析

Table 6 Multivariate Logistic regression analysis of influencing factors for hypertension complicated with depression

影響因素βSEWaldχ2值OR值(95%CI)P值性別(女)1361203904663900(0072，212180)0504年齡0062005911041064(0948，1194)0293BMI(kg/m2)0020008300581020(0867，1200)0810低SCF(≤790ng/L)32101038956324779(3240，189517)0002低c-kit(≤10μg/L)438213301085579998(5901，1084420)0001高內皮素1(≥140ng/L)33211344610627688(1987，385769)0013高IL-6(≥86ng/L)5290138614567198343(13110，3000580)<0001

3 討論

3.1 抑郁癥致病機制復雜，且有一定程度的遺傳性，至今未有突破性的研究進展。SCF是一種由骨髓微環境中的基質細胞產生的酸性糖蛋白，具有骨髓動員作用。SCF通過與其受體c-kit結合發揮生物學作用，對c-kit表達陽性的細胞有促進其增殖、分化、遷移、存活和血管形成作用。SCF、c-kit參與了許多心腦血管疾病的發生發展[14]。本研究有少數患者使用了氨氯地平降壓，試驗組和對照組使用該藥的比例無明顯差異；有研究發現，該藥對內皮素1無影響，對IL-6有影響[15]，尚無研究顯示其對SCF、c-kit及抑郁癥有影響。

3.2 本研究發現，試驗組外周血中SCF、c-kit表達水平較對照組降低；試驗組外周血內皮素1和IL-6水平高于對照組；試驗組按照抑郁水平分為輕中度抑郁亞組(20分≤HAMD評分≤35分)和重度抑郁亞組(HAMD評分>35分)，兩亞組間SCF、c-kit，內皮素1和IL-6有明顯差異。可能的機制為：高血壓和抑郁癥均可導致血管內皮功能的損傷[7，16]。循環血中內皮祖細胞的水平是預測缺血性損傷預后的獨立因子[17]，為加強血管內皮修復，干細胞動員增加，作為干細胞動員的促進因子SCF、c-kit水平也應相應增加。外周血中SCF、c-kit表達水平隨收縮壓及舒張壓升高而增加[11]。但有研究證實，抑郁癥患者外周血內皮祖細胞數量減少和細胞增殖功能減弱有關[10]。內皮祖細胞的數量與抑郁狀態的嚴重程度呈負相關[18]。而作為干細胞的動員劑，SCF、c-kit的表達水平下降可能是導致內皮祖細胞數量下降的原因。腦內海馬區神經的發生假說是目前抑郁癥致病機制的重要組成部分[19-20]，SCF、c-kit信號通路以互補形式在海馬區高劑量表達[21]。SCF、c-kit信號通路的缺陷會導致小鼠類似抑郁癥的表型，SCF、c-kit在外周血中低表達，可能是抑郁癥患者腦內神經調節不當導致。抑郁癥患者交感神經系統激活，刺激致炎性因子合成[5]。抑郁癥導致的精神緊張，激活腎素-血管緊張素-醛固酮系統，血管緊張素Ⅱ分泌增加，產生大量的超氧陰離子，引起血管內皮損傷。內皮細胞損傷后內皮素1、IL-6合成增多[22-23]。SCF是骨髓干細胞強有力的動員劑[24]，骨髓干細胞衍生的間充質細胞能減少炎性因子的產生，但是抑郁癥患者SCF因子功能受到抑制，可能也間接導致炎性因子水平的上升。

3.3 本研究還發現，試驗組中按照抑郁程度分層抽取部分患者作為治療組，與治療前比較，治療后SCF、c-kit表達水平增高、內皮素1和IL-6水平降低?？挂钟糁委熀?，SCF、c-kit的表達水平有所上升，也間接說明抑郁導致了SCF、c-kit的降低。抗抑郁治療后，血管內皮損傷減輕，內皮素1和IL-6明顯下降。多因素Logistic回歸分析也顯示低SCF、低c-kit、高內皮素1和高IL-6與高血壓伴抑郁癥相關。

總之，本研究發現抑郁癥本身可能抑制了SCF、c-kit的表達，抑郁癥患者體內炎性因子的激活也可能是其導致心血管遠期不良預后的一個原因，因此高血壓伴抑郁癥患者更應進行早期抗感染保護內皮功能及抗抑郁治療。本研究的樣本量有限，還需要進一步多層次大樣本研究證實，使其更加具有說服力。

本文鏈接：

國內外已有結論：SCF、c-kit信號通路在抑郁癥患者發病機制中所起的作用越來越受到重視。抑郁癥患者外周血中內皮素1和IL-6表達水平與抑郁程度呈正比，并能影響患者遠期預后。

本研究新發現：試驗組外周血中SCF、c-kit表達水平較對照組低。

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(本文編輯：趙躍翠)

Relationship Between Hypertension Complicated With Depression and the Expression of Peripheral Blood Stem Cell Factor/c-kit

ZHONGHai-lan，LUXin-zheng，SUNHai，etal.

DepartmentofInternalMedicine，theSecondPeople′sHospitalofJiangningDistrict，Nanjing211103，China

Objective To investigate the relationship between hypertension complicated with depression and the expression of peripheral blood stem cell factor(SCF)/c-kit.Methods A total of 147 outpatients with hypertension who paid their first visit to the psychiatric ward，the Department of Internal Medicine and Department of Neuropsychiatry the Second People′s Hospital of Jiangning District from February to December in 2013 were enrolled and divided into two groups according to the presence and absence of depression:contol group(n=70，hypertensive patients without depression) and experimental group(n=77，hypertensive patients with depression).From experimental group，we selected 37 subjects as treatment group，which 12-week anti-depression treatment was conducted.The expression levels of SCF and its receptor c-kit in peripheral blood were measured by enzyme-linked immunosorbent assay method.Endothelin-1(ET-1) and interleukin 6(IL-6) in peripheral blood were determined by radioimmunity assay.Logistic regression analysis was conducted to determine influencing factors for hypertension complicated with depression.Results The experimental group was lower(P<0.05) than the control group in the expression levels of SCF〔(848±22)， (917±32)ng/L〕 and c-kit〔(11.9±3.7)， (13.1±4.1)μg/L〕;the experimental group was higher(P<0.05) than the control group in the expression levels of ET-1〔(165±21)， (151±17)ng/L〕 and IL-6〔(97.3±12.1)， (86.2±9.8)ng/L〕;the treatment group had higher(P<0.05) expression levels of SCF〔(873±25)， (852±19)ng/L〕 and c-kit〔(12.7±3.1)， (11.4±3.5)μg/L〕 after treatment than those before treatment;the treatment group had lower(P<0.05) expression levels of ET-1〔(140±15)， (166±20)ng/L〕 and IL-6〔(46.5±9.7)， (97.9±11.4)ng/L〕 after treatment than those before treatment.Logistic regression analyses indicated that the lower levels of SCF(OR=24.779，P=0.002)and c-kit (OR=79.998，P=0.001)，and higher levels of ET-1(OR=27.688，P=0.013) and IL-6 (OR=198.343，P<0.001)were influencing factors for hypertension complicated with depression.Conclusion Patients with hypertension complicated with depression have higher levels of SCF and c-kit than patients with pure hypertension.Hypertension complicated with depression is associated with lower levels of SCF and c-kit.Raising the levels of SCF and c-kit may help with the anti-depression treatment.

Depressive disorder;Hypertension；Stem cell factor;Proto-oncogene proteins c-kit

南京市江寧區科學技術局國家可持續發展實驗區建設工程(2013Ea17)

211103江蘇省南京市江寧區第二人民醫院內科(鐘海蘭，孫海，潘信明，白金陵)；南京醫科大學第一附屬醫院心內科(盧新政)

盧新政，210029江蘇省南京市，南京醫科大學第一附屬醫院心內科；E-mail：xzlu@njmu.edu.cn

R 749.41

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2015.23.006

2014-12-10；

2015-05-20)

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