色譜柱對阿莫西林膠囊有關(guān)物質(zhì)檢出的影響考察

吳 群，劉映倩，沈丹丹，胡 幸

（重慶市食品藥品檢驗(yàn)所·重慶市藥物過程與質(zhì)量控制工程技術(shù)研究中心，重慶 401121）

色譜柱對阿莫西林膠囊有關(guān)物質(zhì)檢出的影響考察

吳 群，劉映倩，沈丹丹，胡 幸

（重慶市食品藥品檢驗(yàn)所·重慶市藥物過程與質(zhì)量控制工程技術(shù)研究中心，重慶 401121）

目的考察色譜柱對阿莫西林膠囊有關(guān)物質(zhì)檢出量的影響。方法以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0．05 mol／L磷酸鹽緩沖液（pH=5．0）-乙腈（99∶1）為流動相 A，以 0．05 mol／L磷酸鹽緩沖液（pH=5．0）-乙腈（80∶20）為流動相 B，梯度洗脫，流速為1．0 mL／min，檢測波長為254 nm。結(jié)果與結(jié)論采用不同色譜柱測定各廠家阿莫西林膠囊的有關(guān)物質(zhì)，結(jié)果差異較大。色譜柱對阿莫西林膠囊有關(guān)物質(zhì)的質(zhì)量控制有影響。

阿莫西林膠囊；色譜柱；有關(guān)物質(zhì)

阿莫西林為青霉素類抗生素，對鏈球菌屬、需氧革蘭陽性球菌、沙門菌屬等細(xì)菌都有良好的抗菌作用，作為基本藥物，被廣泛應(yīng)用于臨床。人的個體差異及阿莫西林制劑在生產(chǎn)、貯存和使用過程中引入的雜質(zhì)均可導(dǎo)致藥品不良反應(yīng)。在長期的檢驗(yàn)工作中發(fā)現(xiàn)，不同廠家、不同型號的色譜柱檢出阿莫西林制劑有關(guān)物質(zhì)的量有所不同。筆者通過各種色譜柱考察阿莫西林膠囊有關(guān)物質(zhì)，篩選出了能最大量地檢出有關(guān)物質(zhì)的色譜柱，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Agilent 1260型高效液相色譜儀，紫外檢測器。阿莫西林對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為130409-200810，含量為86．9%）；4個廠家的阿莫西林膠囊分別用 A，B，C，D編號；乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。

2 方法和結(jié)果

2．1 色譜條件[1]

色譜柱：Agilent Zorbax SB-C18柱（250 mm×4．6 mm，5 μm），Waters Sun Fire柱（150 mm×4．6 mm，5 μm），Thermo ODS Hypersil柱（250 mm×4．6 mm，5 μm），Phenomenex Luna 5μ C18柱（250 mm× 4．6 mm，5 μm），分別編號為色譜柱1，2，3，4；柱溫：30℃；檢測波長：254 nm；流速：1．0 mL／min；流動相：A為0．05 mol／L磷酸鹽緩沖液（取0．05 mol／L磷酸二氫鉀溶液，用2 mol／L氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié) pH至5．0）-乙腈（99∶1），B為0．05 mol／L磷酸鹽緩沖液-乙腈（80∶20），待阿莫西林峰洗脫完畢后立即按表1方法進(jìn)行梯度洗脫。

表1 流動相線性梯度洗脫表

2．2 溶液制備

取阿莫西林對照品約10 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，精密量取5 mL，置25 mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。取供試品內(nèi)容物，精密稱定適量（約相當(dāng)于阿莫西林50 mg），置25 mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2．3 A樣品有關(guān)物質(zhì)檢測

按擬訂色譜條件，對樣品A進(jìn)行檢測。結(jié)果見圖1。

2．4 最大雜質(zhì)檢測

取供試品溶液和對照品溶液，依法進(jìn)樣試驗(yàn)。結(jié)果表明，色譜柱3在4個廠家樣品中最大雜質(zhì)的檢出量均最大，而在色譜柱1，2，4中A，C，D 3個廠家中最大雜質(zhì)的檢出量很接近；其中B廠家樣品的最大雜質(zhì)在色譜柱2中檢出量較小，在色譜柱1，4中的檢出量也很接近。詳見表2。

2．5 總雜質(zhì)檢測

取供試品溶液和對照品溶液，依法試驗(yàn)。結(jié)果表明，總雜質(zhì)的檢出情況與最大雜質(zhì)的檢出情況基本一致。4個廠家樣品在色譜柱3中總雜質(zhì)的檢出量均最大，檢出雜質(zhì)峰也最多；4個廠家樣品在色譜柱2中總雜質(zhì)的檢出量均最小，A廠家在色譜柱1，2，4中的檢出量很接近，C，D廠家在色譜柱1，2，4中的檢出量較接近，B廠家的總雜質(zhì)在色譜柱2中檢出量較小，在色譜柱1，4中的檢出量也很接近。詳見表3。

圖1 不同廠家色譜柱檢測樣品A高效液相色譜圖

表2 最大雜質(zhì)檢出結(jié)果(%)

表3 總雜質(zhì)檢出結(jié)果(%)

3 討論

目前各國藥典都廣泛采用以硅烷鍵合硅膠色譜柱為基礎(chǔ)的反相高效液相色譜法作為藥品質(zhì)量控制的一個重要手段。《中國藥典》對高效液相色譜法的流動相及溶液配制方面的描述較詳盡，但對于色譜柱通常僅指明填料大類[2]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，不同色譜柱對阿莫西林膠囊最大雜質(zhì)和總雜質(zhì)的檢出量均有很大差異，故在檢測阿莫西林膠囊有關(guān)物質(zhì)時，色譜柱的選擇至關(guān)重要。

[1]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典（二部）[M]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：401-402．

[2]劉 釤，高丹玲．抗生素質(zhì)控分析中HPLC色譜柱的選擇[J]．海峽藥學(xué)，2011，23（1）：33-37．

Influence of Chromatographic Column on Determination of Related Substances of Amoxicillin Capsules

Wu Qun，Liu Yingqian，Shen Dandan，Hu Xing
（Chongqing Municipal Institute for Food and Drug Control·Chongqing Municipal Research Center for Drug Process and Quality Control Engineering Technique，Chongqing，China 401121）

Objective To investigate the influence of chromatographic column on the detectable amount of related substances of Amoxicillin Capsules．M ethods With octadecylsilyl-bonded silica gel as the chromatographic column，0．05 mol／L phosphate buffer（pH= 5．0）-acetonitrile（99∶1）as the mobile phase A and 0．05 mol／L phosphate buffer（pH=5．0）-acetonitrile（80∶20）as the mobile phase B，the gradient elution was adopted at a flow rate of 1．0 mL／min，and the detection wavelength was 254 nm．Results and Conclusion Adopting different chromatographic columns for determining the related substances of Amoxicillin Capsules from diffetent manufacturers has large differences in the detection results，which indicating that the chromatographic column has the influence on the quality control of the related substances of Amoxicillin Capsules．

Amoxicillin Capsules；chromatographic column；related substances

R927.11；R978.1+1

A

1006-4931(2015)04-0039-02

2014－06－12)