BioSystems A25全自動特定蛋白分析儀測定血漿CRP的性能評價

曹 波，陳紅兵，郁 飛，楊志誠，高 嶺

(南京醫科大學附屬南京兒童醫院檢驗科，南京 210008)

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·論 著·

BioSystems A25全自動特定蛋白分析儀測定血漿CRP的性能評價

曹 波，陳紅兵△，郁 飛，楊志誠，高 嶺

(南京醫科大學附屬南京兒童醫院檢驗科，南京 210008)

目的 對新引進的BioSystems A25全自動特定蛋白分析儀開展C反應蛋白(CRP)項目進行性能驗證。方法 參考美國臨床和實驗室標準協會系列文件和相關文獻，結合工作實際對血漿CRP項目的精密度、正確度、線性及參考區間進行評價，并與本實驗室原有的快速CRP測試儀(QuikRead go)結果進行比對。結果 批內變異系數(CV)為2.78%，兩個水平的批間CV分別為2.83%和2.11%，均小于廠家聲明的CV≤7.00%；正確度驗證，相對偏差8.83%，小于廠家聲明(≤10.00%)；在線性評價中(1.0～120 mg/L)，回歸方程為Y=1.051 1X-2.730 0，r2=0.991 9，r=0.996；20例健康參考個體CRP檢測結果均在廠家提供的參考區間(0.1～10 mg/L)內；本法與快速CRP測試儀(QuikRead go)結果進行配對t檢驗，按α=0.05水準，2臺儀器檢測結果差異無統計學意義(P>0.05)。結論 用BioSystems A25全自動特定蛋白分析儀測定血漿CRP項目各項性能驗證指標均合格，可用于臨床標本檢測。

性能評價； C反應蛋白； BioSystems A25全自動特定蛋白分析儀； QuikRead go檢測儀

西班牙BioSystems(博士泰)公司的A25全自動特種蛋白分析儀具有快速批量檢測C反應蛋白(CRP)的特點，為引進該儀器，本實驗室依據美國臨床和實驗室標準協會(CLSI)相關文件以及相關文獻，并結合實際工作，對其精密度、正確度、檢測線性范圍以及參考范圍作性能評價，現報道如下[1-3]。

1 材料與方法

1.1 標本來源 本院就診患者或體檢健康人員的EDTA抗凝的新鮮血漿，無溶血、黃疸和脂血，于4 ℃條件下保存。

1.2 儀器與試劑 試驗儀器為西班牙BioSystems(博士泰)公司A25型全自動特種蛋白分析儀及配套CRP檢測試劑、2個質控品(批號分別為046XA、044XA)和校準品(溯源：CRM470，批號：212014001，靶值：62.2 mg/L，非目前儀器使用校準品)。比較儀器為芬蘭Orion Diagnostica Oy公司的QuikRead go(快速CRP測試儀)，試劑與質控品均為其公司配套產品。

1.3 方法

1.3.2 正確度評價 使用A25全自動特種蛋白分析儀連續檢測定值校準品5 d，每批進行2次重復。利用10次測量值計算均值、標準差和標準誤及相對偏差的絕對值。與廠家聲明比較，若質控品的測定均值與其標示值比較，相對偏差小于或等于10.00%，則認為試驗數據可以證實真實度，否則不能夠證實。

1.3.3 線性范圍驗證 參照CLSI的EP6-A方案選擇高值混合血漿樣本(H)、低值混合血漿樣本(L)，水平覆蓋分析測量范圍上、下限(分別為120、1.0 mg/L)[3]。將H、L樣本按照1L、0.8L+0.2H、0.6L+0.4H、0.4L+0.6H、0.2L+0.8H、1H各自配制混合，形成6個系列評價樣本。在保證A25型全自動特種蛋白分析儀校準和質控狀態良好情況下，每個樣本重復測定4次，求其平均值作為測量結果，并以測量結果作為Y值，計算水平為X值，作X-Y坐標圖，并進行回歸分析處理，求出相關系數r，與廠家聲明(r≥0.99)比較來驗證。

1.3.4 參考區間驗證 參照CLSI C28-A2文件中提供的方法，選擇20例能夠合理代表實驗室選擇的健康體檢人員的標本，在保證儀器校準和質控狀態良好情況下用BioSystems A25全自動特種蛋白分析儀隨機測量[4]。結果不超過2例(或10%)的觀察值在原始報告的參考區間外，則可以接受；3例以上超出界限，重新選擇20例參考個體，結果不超過2例(或10%)的觀察值在原始報告參考區間外，則也可以接受。再次有3例及以上超過參考限，重新檢查操作系統，如果操作沒有問題，則認為該參考區間不適合于當地人群，需要重新建立參考區間。

1.3.5 儀器比對 選用20例患者標本，其水平覆蓋方法的可報告范圍，每天用試驗儀器A25型全自動特種蛋白分析儀和比較儀器快速CRP測試儀(QuikRead go，溯源：ERM-DA472)在4 h內各檢測5例樣本，連續檢測4 d。

1.4 統計學處理 將20對檢測數據進行配對t檢驗計算，按α=0.05水準，P<0.05為兩儀器測定結果差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 精密度驗證情況 見表1。批內精密度CV值為2.78%，批間精密度CV值分別為2.83%、2.11%，均小于廠家聲明的CV≤7.00%，故通過驗證。

表1 精密度驗證結果

2.3 線性評價情況 將預期值和實測值進行比較,得到回歸方程：Y=1.051 1X-2.730 0，r2=0.991 9，r=0.996，大于廠家聲明(r≥0.99)，故線性符合要求，見圖1。

圖1 BioSystems A25全自動特種蛋白分析儀測定

2.4 參考區間驗證 廠家提供的CRP參考區間分別為0.1～10 mg/L。通過檢測20例實驗室選擇的健康參考個體得出20例標本CRP檢測結果均在參考區間內，故可以使用廠家提供的參考范圍。

2.5 儀器比對 用快速CRP測試儀(QuikRead go)與A25全自動特種蛋白分析儀分別檢測20例患者血漿CRP，進行配對t檢驗，t=-1.232，P>0.05，按α=0.05水準，2臺儀器檢測結果一致。

3 討 論

CRP是急性時相反應蛋白之一，大部分是由人體的肝臟所合成的，其結構穩定，在血中半衰期大約為19 h，其水平主要依賴于肝臟的生成量[4-5]。一般情況下，健康人群體內CRP水平均比較低，在1～10 mg/L，當人體在理化因素刺激、感染、腫瘤或是受到急性創傷之后的7 h，血水平就會急劇上升，每天合成量可以達到1 g[6]。

隨著CRP測定在臨床的廣泛應用，尤其CRP與白細胞計數聯合檢驗的方法對于兒科醫師制訂治療方案具有重要的參考作用，有利于實現個性化治療的需求，同時，還可以避免使用不必要的抗菌藥物，保證患兒的健康恢復[7]。本實驗室原有快速CRP測試儀(QuikRead go)已不能適應臨床標本量的日益增加，故引進BioSystems A25全自動特種蛋白分析儀來批量檢測CRP。而通常1個檢測系統應用到臨床之前，實驗室必須對其進行性能驗證，最主要的性能指標包括精密度、正確度、檢測線性范圍以及參考范圍是否符合當地人群[8-9]。

而隨著檢驗技術的不斷發展、項目的不斷增加、儀器及試劑品種繁多，檢驗質量的控制變得越來越重要。為確保臨床實驗室檢驗結果的準確與可靠，《美國臨床實驗室改進法案修正案》和美國病理家學會要求參加認可的實驗室，在開展某1項新的檢測項目、更換檢測系統或儀器、改變檢測試劑盒廠商時，實驗室需對其相關方法學分析性能予以驗證，對廠商提供的評價資料中的主要性能予以確認[10]。

本研究參照CLSI文件結合實際工作，經過檢測、計算，BioSystems A25全自動特種蛋白分析儀測定血漿CRP，其批內、批間精密度均達到廠家聲明性能；正確度方面，是使用參考物質正確度驗證方案，在5 d內每批進行2次重復，然后計算均值以及相對偏差，相對偏差在廠家聲明范圍內；線性回歸r=0.996，故認為BioSystems A25全自動特種蛋白分析儀測定CRP在給定的范圍內呈線性；參考范圍的驗證結果顯示，檢測20例能夠合理代表健康總體的樣本，沒有2例超過廠家給定的參考范圍，故認為可以使用廠家的參考范圍；與本實驗室現有的儀器快速CRP測試儀(QuikRead go CRP)進行的配對t檢驗比對，顯示兩者結果一致，差異無統計學意義(P>0.05)。

BioSystemsA25全自動特種蛋白分析儀速度可達200測試/小時，一次進樣72份，能很好地適應批量標本的測定，如能實現不間斷連續上樣，比色盤自動循環，則能更好地發揮其速度優勢。綜上所述，此儀器采用乳膠比濁法檢測CRP的主要分析性能驗證結果符合質量目標要求，可用于臨床標本檢測。同時，對每一檢測系統的性能進行有效地評估和監測，有助于提高實驗室檢測結果的準確性和可靠性。

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Performance evaluation of BioSystems A25 automatic specific protein analyzer in measuring plasma CRP

CAOBo,CHENHong-bing△,YUFei,YANGZhi-cheng,GAOLing

(DepartmentofClinicalLaboratory,AffiliatedNanjingChildren′sHospitalofNanjingMedicalUniversity,Nanjing,Jiangsu210008,China)

Objective To verify the performance of newly introduced BioSystems A25 automatic specific protein analyzer in measuring C-reactive protein(CRP).Methods By referring to the U.S.Clinical and Laboratory Standards Institute(CLSI) series of documents and related literature,combined with actual work,the precision,accuracy,linearity and reference intervals of plasma CRP item were evaluated and compared with the results detected by the rapid CRP test meter(QuikRead go).Results The intra-assay coefficient of variation(CV) was 2.85%,the inter-assay coefficients of variation(CV) in two levels were 2.83% and 2.11% separately,both were less than the manufacturer declaration′s (CV≤ 7.00%);in the accuracy verification,relative deviation was 8.83%,which was less than the manufacturer declaration′s (≤10.00%);in the online evaluation(1.0-120 mg/L),the regression equation wasY=1.051 1X-2.730 0,r2=0.991 9,r=0.996;the CRP test results in 20 healthy reference individuals were within the reference interval provided by the manufacturer (0.1-10 mg/L);the results detected by this instrument and the results detected by the rapid CRP test instrument (QuikRead go) were performed the pairedttest,according to α=0.05 standards,there is no significantly difference in the detection results between the two instruments(P>0.05).Conclusion The various performance verification indexes of the BioSystems A25 automatic specific protein analyzer in testing plasma CRP are qualified and can be used in clinical sample detection.

performance evaluation; C-reactive protein; BioSystems A25 automatic specific protein analyzer; QuikRead go test meter

曹波，男，本科，主管技師，主要從事臨床檢驗工作。△

，E-mail:chenghb1999@126.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.17.037

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1672-9455(2015)17-2577-02

2015-03-20

2015-03-25)