特色南藥牛大力多糖含量的比較

翟勇進　黃浩　白隆華　姚紹嫦

摘 要：為了比較牛大力多糖在不同地理種源、不同類型、不同植株部位和不同采收季節時間差異，對廣西欽州市、隆安縣、上林縣、天峨縣4個野生種源進行多糖含量測定，以篩選出最佳牛大力種源、用藥部位和采收季節。結果表明，上林縣蔓生型牛大力多糖含量明顯多于其他3個縣直立型牛大力，其次為隆安縣直立型牛大力，天峨縣的多糖含量最少；多糖含量最高的部位為根部，莖次之，葉的含量最少；牛大力在冬季采收，多糖含量顯著高于夏季采收。

關鍵詞：牛大力 種源 化學成分 多糖

牛大力（Millettia speciosa Champ.）為豆科（Leguminosae）崖豆藤屬（Millettia Wight et Arn.）美麗崖豆藤的塊根，又稱山蓮藕、牛古大力、大蓮藕、倒吊金鐘等。為嶺南地區著名的藥食兩用植物 [1]，主要成分為牛大力多糖，具有補肺滋腎、清熱止咳、舒筋活絡、提高免疫、抗炎、抗氧化和清除自由基作用和抗疲勞的作用[2-4]，主治肺虛咳嗽、咳血、腎虛、腰膝酸痛、遺精、白帶、風濕痹痛、跌打損傷、慢性肝炎等[6-9]，同時毒副作用小，性質穩定、不易變性失活[10]，主要分布于廣西、海南和廣東等省區 [11]，有直立和蔓生2種類型 [12]。隨著市場需求的不斷增大，種植面積成倍增加，選育優良牛大力種源和類型成為當前急需解決的關鍵問題，但相關研究報道極少。牛大力多糖是評價牛大力品質的一個重要指標，因此，擬研究通過對不同種源的牛大力多糖含量測定，為牛大力的選育和人工栽培提供科學依據。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

試驗材料分別為廣西欽州市、隆安縣、上林縣、天峨縣4個市（縣）5年生及以上的野生牛大力，其中上林縣種源有蔓生和直立型2種類型，其他3個市（縣）均為直立型牛大力。采收時間為2014年8月和12月。洗凈臟物和泥土，自然曬干后用高速粉碎機將植株的根、莖、葉分別打粉，選取過40目標準篩后的粉末作為提取材料。

試驗材料經廣西壯族自治區藥用植物園白隆華研究員鑒定，為豆科崖豆藤屬牛大力（Millettia speciosa Champ.）。

1.2 主要儀器與試劑

主要儀器：北京博醫康實驗儀器有限公司FD-1A-50冷凍干燥器；北京醫用離心機廠LG16-W離心機；Perkin Elmer Lamb-da35紫外光譜儀；Mettler Toledo AL204分析天平。

主要試劑：乙酸乙酯、正丁醇、苯酚、濃硫酸和葡萄糖，均為天津大茂化學試劑廠生產，純度為分析純；蒸餾水。

1.3 試驗方法

1.3.1 多糖提取和待測液制備

精確稱取牛大力根、莖、葉粉末樣品500 g，在60℃水浴條件下，用85 %乙醇溶液提取5次，每次0.6 L。合并提取液，減壓濃縮至80 mL，依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取，冷凍干燥，最后獲得棕紅色浸膏即為牛大力多糖，置于干燥器中備用。

精確稱取上述制得的牛大力多糖各20.8 mg，溶解并分別定容至250 mL，待測量。

1.3.2 標準曲線的繪制

參照文獻方法[2] ，精確稱取葡萄糖10.0 mg，溶解后定容至250 mL作為標準液。分別吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mL標準液，再分別用蒸餾水補足至2 mL。再加入6 %苯酚溶液1.0 mL和濃硫酸5.0 mL，靜止10 min，搖勻，室溫下靜置20 min，然后在490 nm波長處測量吸光度。

以濃度為橫坐標、吸光度為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程：

Y=0.0080X+0.005 （r=0.997）

1.3.3 牛大力多糖測量

分別吸取0.2、0.6、1.2 mL牛大力樣品溶液，用蒸餾水補足至2 mL（對照用2 mL蒸餾水），再加入6 %苯酚溶液1.0 mL和濃硫酸5.0 mL，靜止10 min，搖勻，室溫下靜置20 min，然后在490 nm波長處測量吸光度。按標準曲線計算平均濃度值，再按以下公式計算多糖含量：

多糖含量（%）=[（C×8）/V] ×250÷20.8 ×100

C：根據標準曲線方程算出平均濃度

V：樣品體積

2 結果與分析

2.1 不同牛大力種源根部多糖含量差異

對2014年12月采收的4個種源，進行牛大力多糖含量測定，結果見表1。不同牛大力種源根的多糖含量差異明顯，來源為隆安和上林的含量較高，分別為 17.8 %和17.2 %，天峨縣的最低，只有5.5 %，約為隆安和上林產牛大力塊根多糖含量的1/3左右，差異達顯著水平。

2.2 不同植株類型、部位牛大力多糖含量的差異

直立型牛大力和蔓生型藤本牛大力是目前栽培的2個類型，2014年8月，分別取上林縣直立型和蔓生型2種藥材的根、莖和葉進行多糖含量分析，結果見表2。從表中可看出，不管是直立型還是蔓生型類型，多糖含量高低的部位均依次為根、莖、葉，根部的量均不低于6.00 %，而莖在3.50 %左右，葉較低，均不超過1.60 %。而在不同植株類型中，蔓生型根、莖、葉中牛大力多糖的含量均高于直立型。

2.3 不同采收時期對多糖含量的影響

上林縣直立型和蔓生型2種植株在8月和12月采收的根部多糖含量結果見表3。可見不同采收時間牛大力根部多糖的含量差異明顯（表3）。在冬季12月采收，直立型牛大力和蔓生型藤本牛大力2個類型的多糖含量分別為17.8 %和17.2 %，明顯高于8月份采收的含量（分別為6.08 %和6.58 %），即12月份的牛大力多糖含量顯著高于8月份。這可能與春、夏、秋初季節是植物營養生長時期，而冬季是植物營養成分積累時期有關。這與傳統根莖類藥材在冬季采收是一致的[12]。但在同一季節采集，直立型和蔓生型根部多糖含量差異不顯著。

3 結論

在試驗的4個種源中，隆安縣和上林縣牛大力種源的多糖含量較高，表明原產地的土壤、濕度、光照、溫度、pH值等環境因素對牛大力多糖積累有明顯的影響，這與段左俊等[13]研究結果相同；而蔓生型和直立型的多糖含量差異不明顯。牛大力多糖含量在根、莖、葉均有分布，含量高低依次為根、莖、葉。盡管在莖和葉中，牛大力多糖的含量相對較低，但仍可加以利用 [14-15]。

參考文獻

[1] 徐立，李志英. 牛大力種苗繁育及高產栽培技術[M]. 北京：中國農業出版社，2011：1-2.

[2] 黃江艷，唐專輝，李典鵬，等. 牛大力多糖含量的測定[J]. 安徽農業科學，2013，41（3）：1180，

1195.

[3] 呂世靜， 黃槐蓮， 吳宋廈.牛大力對抗體及IL-2產生的影響[J]. 上海免疫學雜志，1997， 17（1）：56.

[4] 鄭元升. 牛大力多糖的提取及其藥理活性研究[D]. 廣州：暨南大學，2009，3.

[5] 國家中醫藥管理局《中華本草》編委會. 中華本草[M].上海：上?？茖W技術出版社，1999：

571-572.

[6] 劉丹丹，唐立海，王艷，等. 牛大力祛痰、鎮咳和平喘作用的實驗研究[J]. 廣州中醫藥大學學報，2009，26（3）：266-269.

[7] 韋翠萍，劉丹丹，唐立海. 牛大力對小鼠免疫功能的影響[J]. 廣州中醫藥大學學報，2009，26（6）：539-542.

[8] 石焱，弓小雪，那 婕. 牛大力多糖對免疫抑制小鼠的免疫調節作用[J]. 臨床軍醫雜志，

2008，36（4）：530-532.

[9] 周添濃，劉丹丹，唐立海. 牛大力對四氯化碳及酒精所致小鼠急性肝損傷的保護作用[J]. 時珍國醫國藥，2008，20（10）：2585-2587.

[10] 許慧，等. 植物多糖生物活性的研究進展[J]. 福建醫科大學學報，2010，44（1）：79-82.

[11] 徐立，郝宏剛，李志英. 牛大力塊根cDNA文庫的構建及EST分析[J]. 基因組學與應用生物，2013，32（3）： 404-408.

[12] 陸善旦，黃輝，楊福順，等. 野生中藥材采集加工技術[M]. 南寧：廣西科學技術出版社，

1999：3.

[13] 段左俊，曾祥全，陳飛飛，等. 牛大力的生物學特性及其栽培管理[J]. 熱帶林業，2011，39

（4）：22-25.

[14] 賴富麗，王祝年，王建榮，等. 牛大力藤葉脂溶性成分的GC-MS分析[J]. 熱帶作物學報，

2009，30（5）：714-717.

[15] 王茂媛，賴富麗，王建榮，等. 牛大力莖的化學成分研究[J]. 天然產物研究與開發，2013

（25）：53-55.