鹿腸毒血癥的診斷

趙列平 黑龍江省農墾科學院哈爾濱特產研究所150038 衛喜明 黑龍江省農墾科學院畜牧獸醫研究所150038

韓歡勝 黑龍江省農墾科學院哈爾濱特產研究所150038 張海燕 黑龍江省農墾科學院畜牧獸醫研究所150038

鹿腸毒血癥主要是由C 型、D 型魏氏梭菌毒素引起的以胃腸出血為特征的傳染病，常呈散發流行，在國內養鹿場常有發生。

1 流行病學

該病的發生具有明顯的季節性和條件性，但以6～10月多發，呈散發流行，同群膘肥體壯、食量大的鹿先發，而弱鹿則少發或不發。

2 臨床癥狀

突然發病，一般10 小時內死亡，很少見到明顯癥狀，個別病程2～3天。病鹿精神沉郁，離群獨臥一隅，鼻鏡干燥，反芻停止，腹圍增大，口流涎，呼吸困難，體溫升高至40～41℃。糞便帶血呈醬紅色，含大量黏液，有腥臭味，肛門及后肢常被血液污染。有明顯疝痛癥狀，常呈四肢叉開、腹部向下用力姿勢，個別鹿回頭望腹。死前運動失調，后肢麻痹，口吐白沫，昏迷倒地死亡。

3 病理學診斷

剖檢發現主要病理變化在胃腸道。腹腔有多量紅黃色腹水流出，大網膜、腸系膜、胃腸漿膜明顯充血和出血，呈黑紅色。瘤胃充滿未消化的食物，瓣胃和網胃輕微出血。真胃變化明顯，胃底和幽門部黏膜脫落。小腸變化最為顯著，外觀呈“灌血腸樣”，剖開有大量紅紫色黏液流出，黏膜和肌層剝落。腎臟稍大，變軟。肝稍腫大，個別有出血點和灰白色壞死灶。胸腔有多量淡黃色胸水流出。心臟擴張，冠狀溝膠樣浸潤。心房和心室有紫黑色血塊。心內膜和外膜有點狀出血。肺充血和水腫。顯微鏡下可見胃腸黏膜層血管充血，上皮細胞脫落和淋巴細胞浸潤。最突出的變化是黏膜的腸腺中出現大量杯狀細胞。

4 病原學診斷

無菌條件下剪取肝病料或脾病料，用鉑金耳鉤入厭氧肉肝湯中，剪取碎病料小塊，用鉑金耳在葡萄糖血瓊脂培養皿上劃線接種。置37～38℃溫箱中培養。

魏氏梭菌在厭氧肉肝湯中，培養5～6 小時即呈現均勻渾濁，并產生大量氣體。在葡萄糖血瓊脂上，菌落多為圓形、光滑、隆起、淡灰色，直徑2～4mm，但也可形成圓盤形、邊緣呈鋸齒狀、表面有輻射狀條紋的“勛章”樣大菌落。菌落周圍有棕色溶血區，有時表現為雙環溶血，內環透明、外環淡綠。魏氏梭菌可分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖，產酸產氣，能還原硝酸鹽，不產生靛基質，可產生硫化氫，液化明膠，最突出的生化特性是對牛乳培養基的“暴烈發酵”。涂片可用鉑金耳鉤取該培養物，均勻涂于載玻片上，在酒精燈火焰上輕微干燥固定，用革蘭氏染色方法染色。在800～1000倍顯微鏡下觀察，可見粗大、兩端稍方的正直桿菌，有的單在，有的成雙排列，短鏈較少出現。

5 毒素檢驗

取死亡鹿回腸10～17cm 的腸內容物，用滅菌生理鹽水稀釋1～3 倍，充分混合后經3000 轉/分鐘離心15分鐘，取上清液，通過除菌濾器過濾，用濾液對試驗兔耳靜脈注射2～4mL。如毒素含量高，10 分鐘試驗兔死亡；毒素含量低，試驗兔30～60 分鐘臥倒，心跳、呼吸加快，60 分鐘以后恢復正常；若腸內容物不含毒素，試驗兔不出現反應。

毒素中和試驗。準備腸內容物濾液，小鼠6 只（分3 組），C 型、D 型抗毒素血清，滅菌生理鹽水，注射器，6 號針頭，試管3 支。取滅菌試管3 支，編為1、2、3 號，分別加入C 型、D 型毒素抗血清及生理鹽水各0.1mL，并各加入腸內容物濾液0.5mL，混合均勻后在37℃下作用40 分鐘。肌肉注射小鼠，第一組注射C 型抗毒素血清與腸內毒素的混合液；第二組注射D 型抗血清與腸內毒素的混合液；第三組注射生理鹽水與腸內毒素的混合液，以作對照。如果第一組的小鼠死亡，第二組的小鼠不死，說明腸內毒素可被D 型毒素抗血清中和，不被C 型毒素抗血清中和，則為D 型魏氏梭菌毒素；如第一組的小鼠不死，第二組的小鼠死亡，說明腸內毒素可被C 型抗毒素血清中和，不被D 型抗毒素血清中和，則為C 型魏氏梭菌毒素。第三組小鼠均應死亡。