腎損傷分子-1、胱抑素C和尿肌酐聯(lián)合檢測(cè)對(duì)先心病體外循環(huán)術(shù)所致急性腎損傷的診斷價(jià)值

胡秀紅，牛哲莉，王 靜，楊洪娟，李明明，任廣偉，崔紅蕊，王會(huì)卿

（1.河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院腎內(nèi)科，河北 石家莊 050031；2.定州市婦幼保健院呼吸科，河北 定州 073000）

腎損傷分子-1、胱抑素C和尿肌酐聯(lián)合檢測(cè)對(duì)先心病體外循環(huán)術(shù)所致急性腎損傷的診斷價(jià)值

胡秀紅1，牛哲莉1，王 靜1，楊洪娟1，李明明1，任廣偉1，崔紅蕊1，王會(huì)卿2

（1.河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院腎內(nèi)科，河北 石家莊 050031；2.定州市婦幼保健院呼吸科，河北 定州 073000）

目的 探討尿腎損傷分子-1(KIM-1)、血清胱抑素C(CysC)和尿肌酐對(duì)先心病體外循環(huán)術(shù)所致急性腎損傷(AKI)的診斷價(jià)值。方法選取2014年5～10月在我院心外科行先心病體外循環(huán)手術(shù)患者100例，根據(jù)尿肌酐的水平分為AKI組(n=26)和非AKI組(n=74)，檢測(cè)兩組術(shù)前、術(shù)后KIM-1、血清CysC、尿肌酐、尿白蛋白、腎小球?yàn)V過率(eGFR)等，分析其對(duì)AKI的診斷價(jià)值。結(jié)果AKI組KIM-1、血清CysC、KIM-1/尿肌酐術(shù)后均明顯上升(P＜0.05)，且在術(shù)后12 h達(dá)到峰值后緩慢下降，而非AKI組KIM-1,CysC變化不明顯，兩組上述指標(biāo)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；AKI組尿白蛋白/肌酐值(UACR)術(shù)后明顯上升，術(shù)后12 h左右達(dá)到峰值，而非AKI組UACR術(shù)后基本未明顯變化；AKI組和非AKI組UACR在術(shù)后2 h后比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，eGFR與UACR變化相反；KIM-1=325.96 ng/L時(shí)，靈敏度為83.45%，特異度為71.03%，ROC下面積最大。當(dāng)三者聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，ROC下面積最大。結(jié)論診斷先心病體外循環(huán)手術(shù)所致AKI時(shí)，尿肌酐無(wú)明顯變化的情況下KIM-1及CysC均有改變，聯(lián)合檢測(cè)KIM-1、血清CysC和肌酐可提高診斷準(zhǔn)確率，降低漏診和誤診率。

腎損傷分子-1；血清胱抑素C;肌酐；急性腎損傷；診斷價(jià)值

隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展，先天性心臟病(先心病)體外循環(huán)術(shù)日臻成熟，其并發(fā)癥發(fā)生率明顯降低，但急性腎損傷(Acute kidney injury，AKI)仍然是其術(shù)后較嚴(yán)重并發(fā)癥之一，嚴(yán)重者會(huì)引起急性腎功能衰竭，嚴(yán)重威脅患者的生命，故早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷AKI的意義重大，可減少急性腎功能衰竭的發(fā)生，且對(duì)判斷疾病預(yù)后有幫助。有研究報(bào)道急性腎損傷時(shí)腎損傷分子-1 (Human kidney injury molecule-1，KIM-1)及血清胱抑素C(Cystatin C，CysC)可作為AKI的早期斷指標(biāo)，但關(guān)于AKI的新型標(biāo)志物的臨床效果評(píng)價(jià)還未取得一致意見，單獨(dú)檢測(cè)一種標(biāo)志物可能會(huì)因?yàn)闇y(cè)定方法的靈敏度不夠而出現(xiàn)假陰性，而聯(lián)合檢測(cè)可起到互補(bǔ)的作用[1-2]。AKI傳統(tǒng)的分子標(biāo)志物有白介素-18、中性粒細(xì)胞明膠蛋白酶相關(guān)載脂蛋白等，但其常存在檢測(cè)過程復(fù)雜、出結(jié)果慢、假陰性率高等不足，而KIM-1、CysC和尿肌酐具有檢測(cè)取材簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn)。本研究旨在探討聯(lián)合檢測(cè)KIM-1、CysC和尿肌酐在先心病體外循環(huán)術(shù)后早期急性腎損傷中的診斷價(jià)值，為AKI的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療和改善預(yù)后提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年5～10月在我院心外科行先心病體外循環(huán)手術(shù)患者100例，所有患者均為先心病患者，均根據(jù)心電圖、X線和超聲心動(dòng)圖等明確診斷。其中男性57例，女性43例，年齡1～14歲，平均(4.69±1.23)歲。排除術(shù)前腎功能不穩(wěn)定，波動(dòng)范圍超過基線值20%，急慢性感染，近期急性腎功能衰竭，CKD分期4期和5期的患者。詳細(xì)記錄患者的各種相關(guān)資料，如性別、年齡、既往病史等。

1.2 標(biāo)本采集及預(yù)處理 入選患者分別于術(shù)前及術(shù)后2 h、6 h、12 h、24 h、48 h等不同時(shí)間段各采集血樣5 ml檢測(cè)血CysC、尿肌酐(Scr)，并于術(shù)前及術(shù)后2 h、6 h、12 h、24 h、48 h等不同時(shí)間各采集尿樣5 ml檢測(cè)KIM-1，每份標(biāo)本以2 000 r/min離心10 min，取等量上清液，于-40℃保存。

1.3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血CysC、Scr，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)尿KIM-1，尿白蛋白測(cè)定采用聯(lián)苯三酚紅比色法，采用苦味酸動(dòng)力學(xué)法測(cè)定尿肌酐，均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。計(jì)算尿白蛋白/肌酐值(Urine albumin to creatinine ratio，UACR)，采用修訂的MDRD方程估算腎小球?yàn)V過率(eGFR)[3]：男性 eGFR=186×(尿肌酐/ 88.4)-1.154×年齡-0.203；女性eGFR=186×(尿肌酐/ 88.4)-1.154×年齡-0.203×0.742)(肌酐單位：μmol/L)。

1.4 AKI診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]腎功能在≤48 h內(nèi)迅速降低，尿肌酐升高≥26.4 μmol/L或較基線值升高≥50%(或增至基線值的1.50倍)，尿量＜0.5 ml·kg-1·h-1且≥6 h，即可診斷AKI。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，采用Pearson相關(guān)分析指標(biāo)間的關(guān)聯(lián)性，采用受試者工作曲線(ROC)曲線分析KIM-1、CysC、Scr聯(lián)合檢測(cè)對(duì)AKI的診斷價(jià)值；以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者的AKI發(fā)生情況 本組100例患者中26例術(shù)后48 h內(nèi)Scr有不同程度的升高，均符合AKI診斷標(biāo)準(zhǔn)，AKI發(fā)生率為26.0%，其余74例為非AKI組。AKI組患者中男性15例，女性11例，平均年齡(4.53±1.22)歲；非AKI組患者中男性42例，女性32例，平均年齡(4.62±1.32)歲；兩組患者的性別和年齡比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。AKI組1例腎功能嚴(yán)重?fù)p傷，接受腎臟替代治療后恢復(fù)。

2.2 兩組患者手術(shù)前后KIM-1、CysC及KIM-1/ Ucr水平比較 AKI組KIM-1、CysC術(shù)后均明顯上升，且在術(shù)后12 h達(dá)到峰值后緩慢下降，而非AKI組KIM-1、CysC變化不明顯。考慮到患者術(shù)后的尿量不同，可能對(duì)KIM-1產(chǎn)生影響，故計(jì)算KIM-1/Ucr，其變化趨勢(shì)與KIM-1基本一致，見圖1。

圖1 兩組患者手術(shù)前后KIM-1、CysC及KIM-1/Ucr水平變化比較

2.3 兩組患者手術(shù)前后UACR、eGFR水平比較 AKI組UACR術(shù)后明顯上升，術(shù)后12 h達(dá)到峰值后緩慢下降，而非AKI組UACR術(shù)后基本未明顯變化，兩組UACR在術(shù)后2 h、6 h、12 h、24 h、48 h比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；AKI組eGFR術(shù)后明顯下降，而非AKI組eGFR術(shù)后與術(shù)前基本相同，兩組eGFR在在術(shù)后2 h、6 h、12 h、24 h、48 h比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見圖2。

2.4 KIM-1與CysC、Scr、UACR、eGFR相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson關(guān)聯(lián)性分析，KIM-1與CysC、Scr、UACR均呈正相關(guān)關(guān)系，而與eGFR呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

圖2 兩組患者手術(shù)前后UACR、eGFR水平變化

表1 KIM-1與CysC、Scr、UACR、eGFR Pearson關(guān)聯(lián)性分析

2.5 KIM-1、CysC、Scr聯(lián)合檢測(cè)對(duì)AKI的診斷價(jià)值 ROC曲線下面積(見圖3及表2)以聯(lián)合檢測(cè)最大，其次為KIM-1，CysC、Scr單獨(dú)檢測(cè)的ROC曲線下的面積無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。KIM-1=325.96 ng/L時(shí)，靈敏度為83.45%，特異度為71.03%，ROC下面積最大。當(dāng)三者聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，靈敏度79.54%，而特異度為97.36%，此時(shí)ROC下面積最大。

圖3 KIM-1、CysC、Scr及聯(lián)合檢測(cè)診斷AKI的ROC曲線

表2 ROC曲線下的面積

3 討論

急性腎損傷仍然是先心病體外循環(huán)術(shù)后較嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，早期發(fā)現(xiàn)急性腎損傷意義重大。目前臨床上診斷AKI主要依靠術(shù)后血清肌酐的變化，但是血清肌酐變化易受性別、年齡、進(jìn)食、肌肉含量及藥物等因素影響，特異度和敏感度均較低，通常在腎功能受損后數(shù)日才有明顯升高，因此用作先心病體外循環(huán)術(shù)后AKI的早期診斷有一定局限性，會(huì)明顯延誤AKI的診斷，使患者急性腎功能衰竭的發(fā)生率升高[5]。

由于早期AKI大多臨床可逆，探索敏感性及特異性良好且能分辨AKI的新型標(biāo)志物能給患者帶來(lái)良好的轉(zhuǎn)歸。有研究報(bào)道KIM-1和CysC均明顯升高，可作為AKI的早期斷指標(biāo)，但上述兩種新型標(biāo)志物的對(duì)AKI的診斷價(jià)值還存在爭(zhēng)議[6-7]。目前國(guó)內(nèi)外已有腎損傷分子-1及血清胱抑素C、中性粒細(xì)胞明膠蛋白酶相關(guān)載脂蛋白、尿白細(xì)胞介素-18等AKI標(biāo)志物的相關(guān)報(bào)道，但關(guān)于KIM-1、CysC的研究較少。單獨(dú)檢測(cè)一種標(biāo)志物可能會(huì)因?yàn)闇y(cè)定方法的靈敏度不夠而出現(xiàn)假陰性，而聯(lián)合檢測(cè)可起到互補(bǔ)的作用，提高靈敏度和特異度。聯(lián)合檢測(cè)KIM-1、CysC、Scr的變化對(duì)先心病體外循環(huán)手術(shù)所致急性腎損傷的診斷意義的相關(guān)研究未見報(bào)道。

本研究首先監(jiān)測(cè)了患者術(shù)后KIM-1、CysC、Scr的水平變化，結(jié)果顯示：術(shù)后上述三指標(biāo)變化趨勢(shì)基本一致，表現(xiàn)為：AKI組術(shù)后開始上升，一致持續(xù)至術(shù)后12 h達(dá)到高峰，然后緩慢下降。為了排除患者術(shù)后尿量的不同對(duì)尿肌酐的影響，故以尿肌酐水平為標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)KIM-1進(jìn)行了標(biāo)化處理，KIM-1/Ucr的變化趨勢(shì)與KIM-1大致相同。非AKI組KIM-1、CysC、Scr的水平?jīng)]有明顯變化。另一方面，對(duì)患者檢測(cè)了UACR及eGFR，以評(píng)估患者的腎功能變化情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：AKI組UACR在術(shù)后明顯上升，12 h達(dá)到峰值，eGFR與UACR變化趨勢(shì)相反；非AKI組UACR及eGFR均未發(fā)生變化。上述兩個(gè)方面的分析，分別直接、間接提示：先心病體外循環(huán)手術(shù)患者，在術(shù)后腎小球損傷已經(jīng)悄然出現(xiàn)，導(dǎo)致腎功能下降，尿白蛋白含量升高，腎小球?yàn)V過濾下降。KIM-1、CysC、Scr的ROC曲線結(jié)果提示：CysC、Scr ROC曲線下的面積差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而KIM-1的靈敏度和特異度均較高，本研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)外研究結(jié)果基本一致[8-9]。同時(shí)，本研究結(jié)果顯示：將三者聯(lián)合監(jiān)測(cè)，診斷AKI的靈敏度和特異度均有明顯改善。從診斷試驗(yàn)評(píng)價(jià)的角度講，聯(lián)合檢測(cè)實(shí)現(xiàn)了三種檢測(cè)指標(biāo)的互補(bǔ)，從而發(fā)揮各自的優(yōu)勢(shì)，最終提高了診斷試驗(yàn)的效率。

盡管多年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)關(guān)于AKI的新型標(biāo)志物進(jìn)行過很多研究，也取得一定進(jìn)展[10-11]，但關(guān)于AKI的新型標(biāo)志物的診斷價(jià)值仍有待進(jìn)一步深入探討。本研究建議：如果條件允許，在診斷先心病體外循環(huán)手術(shù)所致AKI時(shí)，聯(lián)合檢測(cè)KIM-1、CysC、Scr，最終可能提高靈敏度和特異度，提高診斷準(zhǔn)確率，降低漏診和誤診率。

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Correlation between changes in kidney injury molecule-1,cystatin C,urine creatinine and the diagnosis of acute kidney injury after congenital heart bypass surgery.

HU Xiu-hong1,NIU Zhe-li1,WANG Jing1,YANG Hong-juan1,LI Ming-ming1,REN Guang-wei1,CUI Hong-rui1,WANG Hui-qing2.
1.Department of Nephrology,the First Hospital of Medical University of Hebei,Shijiazhuang 050031,Hebei,CHINA;2.Department of Respiration,the Maternal and Child Health Hospital of Dingzhou City,Dingzhou 073000,Hebei,CHINA

ObjectiveTo investigate the correlation between changes in kidney injury molecule-1(KIM-1), cystatin C(CysC),urine creatinine and the diagnosis of acute kidney injury(AKI)after congenital heart bypass surgery.MethodsOne hundred patients with congenital heart disease accepted cardiopulmonary bypass surgery in our hospital from May 2014 to Oct.2014 were selected,which were divided into AKI(n=26)and non-AKI group(n=74) according to urine creatinine levels.Then the levels of urine KIM-1,serum CysC,urine creatinine,urinary albumin, glomerular filtration rate(eGFR)were detected before and after surgery,and their diagnostic value for acute kidney in-jury was analyzed.ResultsThe levels of KIM-1,serum CysC,KIM-1/urine creatinine of the AKI group were significantly increased after surgery(P＜0.05)and reached the peak at 12 h after surgery,while the levels of KIM-1 and CysC of non-AKI group showed no significant change,The differences between the two groups were statistically significant(P＜0.05).The urinary albumin/creatinine ratio(UACR)of AKI group increased significantly after surgery and reached the peak at postoperative 12 h,while no significant change was found in non-AKI group.The two groups showed statistically significant difference in UACR 2 h after surgery(P＜0.05).The change in eGFR was on the contrary of that in UACR.At KIM-1=325.96 ng/L,the sensitivity was 83.45%and the specificity was 71.03%,with maximum area under ROC curve.Combined detection of KIM-1,CysC,urine creatinine had maximum area under ROC.ConclusionIn the diagnosis of AKI due to congenital heart bypass surgery,combined detection of kidney injury molecule-1,serum cystatin C and urine creatinine may eventually increase the sensitivity and specificity to improve diagnostic accuracy and reduce misdiagnosis rate.

Kidney injury molecule-1;Serum cystatin C;Creatinine;Acute kidney injury;Diagnostic value

R541.1

A

1003—6350（2015）13—1934—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.13.0697

2014-11-27)

河北省衛(wèi)生廳科技計(jì)劃項(xiàng)目（編號(hào)：ZL20140029）

牛哲莉。E-mail：niuzheli@126.com