慢性乙型肝炎患者血清TGF-B1水平及其與肝纖維化的相關性研究

黃國棟，謝藝琴，楊碧新，黃 鋒

(龍川縣中醫院內科，廣東 龍川 517000)

慢性乙型肝炎患者血清TGF-B1水平及其與肝纖維化的相關性研究

黃國棟，謝藝琴，楊碧新，黃 鋒

(龍川縣中醫院內科，廣東 龍川 517000)

目的 探討血清轉化生長因子-B1(TGF-B1)在慢性乙型肝炎患者中的水平及其與肝纖維化的關系。方法65例慢性乙型肝炎患者根據肝纖維化程度分為輕度肝纖維化組(29例)，重度肝纖維化組(19例)和肝硬化組(17例)，選取25例健康體檢人員納入對照組，檢測各組受試者的血清TGF-B1及透明質酸(HA)、Ⅲ型前膠原(PC-Ⅲ)、層黏蛋白(LN)、Ⅳ型膠原(C-Ⅳ)水平并進行統計學分析。結果兩兩比較，血清TGF-B1及肝纖維化指標HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ在對照組、輕度和重度肝纖維化組、肝硬化組依次上升，差異均有統計學意義(P＜0.05)；TGF-B1水平與血清HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ水平之間均存在正相關性(P均＜0.05)。結論血清TGF-B1水平與肝纖維化發生、發展密切相關，可作為臨床判斷肝纖維化程度的血清學指標。

轉化生長因子B1；乙型肝炎病毒；肝纖維化；肝硬化

肝纖維化是各種病因引起的慢性肝病在向肝硬化進展過程中的一個階段[1]，如果進一步發展到肝小葉結構改建及假小葉形成時則稱為肝硬化。近年來研究表明，轉化生長因子B1(TGF-B1)在肝纖維化的發病過程中具有重要作用[2]，但目前關于血清TGF-B1與慢性乙型肝炎后肝纖維化的臨床研究尚不多見。因此，本研究通過檢測慢性乙型肝炎患者血清TGF-B1水平及肝纖維化指標，探討血清TGF-B1與慢性乙型肝炎肝纖維化的相關性，以期為慢性乙型肝炎肝纖維化早期診治提供理論基礎。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院傳染科于2010年1月至2014年8月期間診治的65例慢性乙型肝炎患者，其中男性38例，女性27例，年齡26～65歲，平均(48.3±6.8)歲，HbeAg均為陽性并接受肝活檢檢查，符合2000年中華醫學會西安會議修訂的《病毒性肝炎防治方案》中慢性乙型肝炎診[3]及《肝纖維化中西醫結合診療指南》肝纖維化診斷標準[4]。排除標準：①其他病毒感染引起的肝功能異常及肝癌；②合并肝硬化腹水，內分泌、血液系統疾病及心、腎功能衰竭者；③妊娠、哺乳期婦女。同時選取在我院體檢中心體檢的健康成人25例納入對照組，其中慢性肝炎患者與對照組患者的年齡、性別比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法 對照組于入組日、慢性乙型肝炎患者于入院后次日晨抽取空腹靜脈血5 ml，2 000 r/min離心15 min，取上層血清置于-70℃備檢，采用ELISA法檢測血清TGF-B1及透明質酸(HA)、Ⅲ型前膠原(PC-Ⅲ)、層黏蛋白(LN)、Ⅳ型膠原(C-Ⅳ)，試劑盒分別由美國ADL公司天津分公司及北京北方生物技術研究所提供，操作步驟嚴格按說明書執行。患者擇期在B超引導下行肝穿刺病理活檢，穿刺組織長度均在1.8 cm以上，常規予以甲醛固定、脫水、石蠟包埋、連續切片、HE染色、網織染色，由同一位病理醫生在光鏡下確定肝纖維化分級。將0～2級、3～4級、5～6級者分別納入輕度肝纖維化組(29例)、重度肝纖維化組(19例)和肝硬化組(17例)。

1.3 統計學方法 應用SPSS17.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差(±s)表示，均數的比較采用t檢驗，相關性采用Spearman相關分析，率的比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組受試者血清TGF-B1及肝纖維化指標比較 血清TGF-B1及肝纖維化指標HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ在對照組、輕度和重度肝纖維化組、肝硬化組依次上升，經兩兩比較差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 各組受試者血清TGF-B1及肝纖維化指標比較(±s)

表1 各組受試者血清TGF-B1及肝纖維化指標比較(±s)

注：a、b、c分別表示與對照組、輕度肝纖維化組比較、重度肝纖維化組比較，P＜0.05。

對照組(n=25)輕度肝纖維化組(n=29)重度肝纖維化組(n=19)肝硬化組(n=17) 336.3±121.2 529.3±189.4a614.6±221.5ab921.64±1.52abc40.3±11.4 226.7±27.5a408.6±38.1ab674.2±61.8abc21.1±6.4 127.6±21.8a231.8±30.6ab342.4±22.4abc20.6±5.7 67.4±12.8a154.9±22.1ab186.5±38.7abc37.6±9.8 94.3±13.7a175.7±22.1ab248.6±24.1abc

2.2 TGF-B1水平與血清HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ水平的相關性 TGF-B1水平與血清HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ之間均存在正相關性(r=0.967、0.476、0.418、0.412，P＜0.05)。

3 討論

慢性乙型肝炎已成為我國一個重要的公共衛生問題，尤其是本病可進一步發展為肝硬化，嚴重影響患者生活質量[5]。肝纖維化則是發展過程中的一個必經階段，其他肝臟疾病發展為肝硬化也要經歷肝纖維化這一病理改變。肝纖維化指各種損傷作用于肝臟，引起肝組織內細胞外基質成分增生過度，以及在肝臟組織異常沉積，進而影響到肝臟結構功能，使其發生異常的病理變化。肝纖維化發展到第4期即增生的結締組織包繞再生結節并分割殘存肝小葉并形成假小葉，此時雖已達到早期肝硬化，但此階段的病理過程是可逆的[6]，不過由于患者缺乏臨床癥狀往往造成病情延誤。因此，肝纖維化的早期診斷與治療是慢性乙型肝炎診治過程中的重要問題。

目前認為肝星狀細胞(HSC)的異常增殖、活化在肝纖維化形成的過程中具有關鍵作用。在各種致病因素的作用下，靜止期的HSC可以被激活，引起HSC增殖、合成和分泌細胞外基質成分增加，并使其降解減少，在上述作用下，細胞外基質成分不斷增加、積聚而導致了肝纖維化的發生[7]。TGF-B1是一種最重要的促HSC活化因子[8]，肝炎病毒可通過免疫病理損傷(直接或間接)引起Kupffer細胞的大量激活、浸潤，增加其TGF-B1的分泌，分泌增多的TGF-B1又可刺激貯脂細胞和其他間質細胞分泌TGF-B1，從而形成惡性循環[9]。TGF-B1可刺激HSC轉化為肌成纖維細胞，從而增加ECM的合成，同時可上調Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原及HA、LN的表達，降低基質金屬蛋白酶合成及抑制促進纖溶酶原激活物的表達，降低ECM的降解，促使纖維化發生發展[10-11]。肝穿刺活檢是肝纖維診斷的“金標準”，但是肝穿刺具有一定的創傷，而肝纖維化指標HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ對于肝纖維化的診斷及程度判斷目前已在臨床獲得廣泛應用[12]。本研究結果顯示，在慢性乙型肝炎纖維化各期患者血清TGF-B1及肝纖維化指標HA、PC-Ⅲ、LN、C-Ⅳ均較對照組升高，且其水平隨肝纖維化程度的逐級加重而逐級升高，并且TGF-B1與肝纖維化指標呈正相關性，進一步證實TGF-B1是一種在肝纖維化發生、發展的具有重要作用細胞因子，對于慢性乙型肝炎患者測定血清TGF-B1水平有助早期肝纖維化的診斷及肝纖維化程度的判斷。

綜上所述，血清TGF-B1水平與肝纖維化發生、發展密切相關，可作為臨床判斷肝纖維化程度的血清學指標。

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Study of serum TGF-B1levels in patients with chronic hepatitis B virus infection and its correlation with hepatic fibrosis.

HUNAG Guo-dong,XIE Yi-qin,YANG Bi-xin,HUANG Feng.
Department of Internal Medicine, Longchuan County Hospital of Traditional Chinese Medicine,Longchuan 517000,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the serum transforming growth factor-B1(TGF-B1)levels in patients with chronic hepatitis B virus infection and its correlation with hepatic fibrosis.MethodsSixty-five patients with chronic hepatitis B were divided into mild hepatic fibrosis group(29 cases),severe hepatic fibrosis group(19 cases) and hepatic cirrhosis group(17 cases),and 25 healthy volunteers were included into the control group.The serum TGF-B1and hyaluronic acid(HA),Ⅲprocollagen(PC-Ⅲ),laminin(LN),Ⅳcollagen(C-Ⅳ)levels were detected in all the patients.ResultsThe serum TGF-B1and HA,PC-Ⅲ,LN,C-Ⅳlevels were increased successively in the control group,mild hepatic fibrosis group,severe hepatic fibrosis group and hepatic cirrhosis group,and the differences were statistically significant(P＜0.05).There was positive correlations between serum TGF-B1levels and hepatic fibrosis indexes including HA,PC-Ⅲ,LN,C-Ⅳ(P＜0.05).ConclusionThe serum TGF-B1is closely related to the hepatic fibrosis in chronic hepatitis B process.It can be used as serological indicators for judging hepatic fibrosis.

Transforming growth factor B1;Hepatitis B virus;hepatic fibrosis;Hepatic cirrhosis

R512.6+2

A

1003—6350（2015）13—1890—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.13.0681

2015-01-08)

龍川縣2013年度科技計劃項目(編號：LC201308)

黃國棟。E-mail：guodongh@126.com