連翹的加速穩定性實驗研究

姜 濤，張立偉

（1吉林醫藥學院，吉林吉林132013；2山西大學分子科學研究所，山西太原030006）

連翹的加速穩定性實驗研究

姜 濤1，2，張立偉2

（1吉林醫藥學院，吉林吉林132013；2山西大學分子科學研究所，山西太原030006）

目的：對連翹藥材穩定性進行評價。方法：利用溫度（40±2）℃，相對濕度75%為加速條件，以薄層鑒別、雜質、水分、總灰分、浸出物及含量測定為指標，對連翹炮樣品進行加速穩定性實驗。結果：連翹在加速條件下，6個月各項指標均穩定，無明顯改變。結論：連翹炮制品穩定性較好。

連翹；穩定性；連翹苷；連翹酯苷A

穩定性實驗目的是考察原料藥或者藥物制劑在溫度﹑濕度﹑光線的影響下隨著時間變化的規律，為藥品的生產﹑包裝﹑貯存及運輸條件提供了科學依據，同時通過實驗建立了藥品的有效期。而加速穩定性實驗是在加速條件下進行的。其目的是通過加速藥物的化學或者物理變化，探討藥物的穩定性，為其制劑設計﹑包裝﹑運輸﹑貯存提供必要的資料[1]。

在過去的研究中，一般僅對原料藥或藥物制劑進行穩定性實驗[2-3]。連翹，作為一種中藥材，被用于多種中藥成方制劑，它的穩定性直接影響了制劑的質量穩定。目前，對于連翹飲片還沒有系統的穩定性研究，本實驗將對采用沸水煮8 min，加水量為6倍炮制方法炮制的三批連翹樣品及連翹生品進行穩定性實驗，以薄層鑒別﹑雜質﹑水分﹑總灰分﹑浸出物及含量測定為評價指標，對其穩定性進行評價。

1 材料和方法

1.1 實驗材料及儀器

Agilent 1200高效液相色譜儀（美國 Agilent 公司）；旋轉蒸發儀RE52 （上海亞榮生化儀器廠）；Sarturius-BS110S分析天平（北京賽多利斯天平有限公司）；SK22OOH超聲波提取器（上海科導超聲儀器有限公司）；數顯鼓風干燥箱（上海博訊實業有限公司醫療設備廠）；恒溫水浴鍋（余姚市東方電工儀器廠）；馬弗爐（沈陽市節能電爐廠）；HZS-H水浴振蕩器（哈爾濱市東聯電子技術開發有限公司）；連翹苷（批號：110821-201112，中國藥品生物制品檢定所）；連翹酯苷A（批號：111810-201102，中國藥品生物制品檢定所）；乙腈，冰醋酸（均為色譜純，天津市科密化學試劑開發中心）；連翹 （采于山西省黎城縣）；其他試劑均為分析純，所用水均為哇哈哈純凈水 。

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗樣品

采用沸水煮8 min，加水量為6倍炮制方法炮制的三批連翹樣品及連翹生品作為實驗材料，見表1。

1.2.2 加速條件

采用溫度（40±2）℃，相對濕度75%的條件下保存。分別在第1，2，3，6個月各取樣一次，并按照檢測項目進行考察。

表1 連翹樣品統計

1.2.3 檢測指標及方法

（1） 薄層鑒別：稱取連翹粉末1 g，加石油醚20 ml，密塞，采用超聲處理15 min，濾過，棄去石油醚提取液，殘渣揮干石油醚，再加甲醇20 ml，密塞，用超聲處理20 min，濾過，得到的濾液蒸干，殘渣加甲醇10 ml溶解，作為供試品溶液。另稱取一份連翹對照藥材1 g，采用相同法制成對照藥材溶液。再取連翹苷﹑連翹酯苷A對照品，加甲醇制成濃度為0.25 mg/ml的溶液。照薄層色譜法（2010版《中國藥典》附錄VI B）實驗，分別吸取上述4種溶液各2μl，點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯:甲酸:水（9:2:1）為展開劑，進行展開，取出，晾干，再噴以10%硫酸乙醇溶液，使其在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。觀察在供試品色譜中，與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，是否顯相同顏色的斑點。（2）雜質：采用2010版《中國藥典》附錄Ⅸ A法測定其各類雜質重量，計算其在供試品中的含量（%）。（3）水分：稱取供試品30 g，精密稱定，置于短頸園底燒瓶中，加甲苯200 ml，按照藥2010版《中國藥典》附錄Ⅸ H第二法，檢讀水量，并計算出供試品中的含水量（%）。（4）總灰分：取供試品約2 g，按照藥2010版《中國藥典》附錄Ⅸ H法操作，根據殘渣重量，計算供試品中總灰分的含量（%）。（5）浸出物：取供試品約4 g，按照藥2010版《中國藥典》附錄Ⅹ A法操作，并計算供試品中醇溶性浸出物的含量（%）。（6）含量測定[4]：色譜柱選用 Agela Venusil XBP-C18（2）（5 μm，100 ?，4.6×250 nm）；以乙腈（A）-0.3%醋酸溶液（B）為流動相，梯度洗脫，0～5 min，85%～83% A，

5～10 min，83%～80% A，10～15 min，80%～77% A，15～20 min，77%～75% A，選擇流速0.8 ml/min；柱溫為25 ℃；波長230 nm。精密稱取連翹酯苷A對照品，加甲醇制成濃度為0.1 mg/ml的對照品溶液，需臨用配制，避光保存。精密稱取連翹苷對照品，加甲醇制成每濃度為0.2 mg/ml的對照品溶液。取本品粉末（過三號篩）約1.0 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，加入70%甲醇30 ml，稱重，采用超聲處理30 min（250 W，40 kHz），放冷，再稱其重量，用70%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，量取續濾液0.8 ml，置于5 ml的容量瓶中，用70%甲醇定容至刻度，即得供試品溶液。精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μl，分別注入液相色譜儀測定，即得。

2 實驗結果

按2.3 實驗方法對樣品進行考察，考察結果見表2～4。

表2 穩定性實驗結果（1）

實驗結果表明，連翹炮制品在加速條件下，6個月各項指標均穩定，無明顯改變，由此初步確定保質期為2年[5-6]。

3 討論

通過對連翹炮制樣品6個月的加速穩定性考察，結果發現連翹酯苷A及浸出物含量隨時間逐漸減小，但減小的趨勢并不明顯，而連翹苷等其他指標幾乎無變化。由此可知連翹樣品中連翹苷穩定性較連翹酯苷A好。

表4 穩定性實驗結果（3）

［1］ 中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[S].北京: 中國醫藥科技出版社， 2010：附錄199-200.

［2］ 張立偉，楊頻.連翹酯苷穩定性研究[J].中成藥，2003，25（5）:353-356. ［3］ 王曙賓，鄭亞杰.連翹提取物和連翹酯苷A原料中連翹酯苷A的穩定性研究[J].中草藥，2010，41（6）:909-911.

［4］ 許佳.青翅的質量標合理采收期初步研究[D].太原:山西大學，2013. ［5］ 中華人民共和國衛生部藥政局.中藥新藥研究指南[M].北京： 中國中醫藥出版社，1994:21-48.

［6］ 國家藥品監督管理局.中藥新藥研究的技術要求[M].1999:16-19.

R284

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1002-2376（2015）12-0025-02

山西省科技攻關，20140313021-3和山西省國際合作項目，2014081049-1

2015-10-21